영양소, microbiota 대사와 순환에 의약품의 액세스 창 자-혈액 장벽 (GBB)에 의해 제어 됩니다. 우리는 GBB 침투성에서 vivo에서, 일반적으로 사용 되는 간접 방법, 달리는 거의 영향을 받지 않습니다 간 및 신장 기능을 측정 하기 위한 직접적인 방법을 설명 합니다.
창 자-혈액 장벽 (GBB) 혈 류 장 루멘에서 영양분, 세균 대사 산물과 약물의 흐름을 제어합니다. GBB 무결성 혈 류 창 자 세균 대사 산물 등 생물학적 활성 화합물의 쉽게 액세스 될 수 있습니다 위, 심혈 관 및 대사 질환에 교란 된다. 따라서,는 GBB의 침투성 장 및 extraintestinal 질병의 마커를 있을 수 있습니다. 또한, 세균 대사 산물의 증가 침투 수 있습니다 전체 유기 체의 기능에 영향을.
GBB 침투성 공부에 대 한 일반적으로 사용 되는 방법 수행 비보 전있습니다. 이러한 방법의 정확성은 창 자 혈액의 흐름에 따라는 GBB의 기능 때문에 제한. 다른 한편으로, 일반적으로 사용 되 비보에 방법 편 파 수 있습니다 간 및 신장 성능, 그 메서드는 소변의 평가 기반으로 또는 / 및 exogenous 마커의 주변 혈액 농도. 여기, 우리 장 혈액 흐름을 유지 하 고 간, 신장 기능 영향을 거의 받지 않습니다 메서드를 사용 하는 비보에 포털 혈액 샘플링에 따라 쥐에서 GBB 침투성의 직접 측정을 제시.
폴리우레탄 카 포털 정 맥에 삽입 하 고는 키 모 보다 열 등 한 베 나 정 맥 혈관 합류. 기준선에 및 위장의 원하는 부분에 선택한 마커의 관리 후 혈액 샘플링 됩니다. 여기, 선물이 TMA, 창 자 세균 대사 산물, TMA의 간 정리의 평가 (2) 및 (3) 평가의 직감 직감 포털 혈액-간-주변 혈액 통로의 콜론 침투성의 평가 (1)를 포함 하는 방법의 몇 가지 응용 프로그램 박테리아에서 파생 된 짧은 사슬 지방산입니다. 또한, 프로토콜 장내 흡수와 약물의 간 대사를 추적 또는 포털 혈압의 측정을 위해 사용할 수도 있습니다.
창 자-혈액 장벽 (GBB)로 알려진 장 배리어 영양소1의 흡수를 허용 하는 동안 유해한 화합물의 통행을 제한 하기 위하여 혈 류에서 창 자 루멘을 분리 하는 복잡 한 멀티 레이어 시스템입니다. 그것은 이루어져 있다 3 개 주요 레이어: 점액 레이어, 상피와 lamina propria.
수많은 요인 GBB 무결성 및 기능2영향을 미칠 수 있습니다. 그것은 보였다 GBB 위장과 extraintestinal 질환, 심혈 관 및 대사 질환3, 혈 류4직감 세균 대사 산물의 증가 흐름으로 이어질 수 있는 포함 하 여 교란 된다. 창 자 세균 대사 산물의 증가 침투 전체 유기 체의 기능에 영향을 수 있습니다. 최근 연구 결과 순환 시스템 기능5,6,7 indoles, H2S, 짧은 사슬 지방산 (SCFA), trimethylamine N 산화물 등의 세균성 대사 산물의 상당한 영향을 표시 하는 예를 들어 ,89. 마지막으로, 그것 증가 GBB 침투성 형태학 및 기능 변경 창10과 관련 된 심혈 관 및 대사 질환의 마커로 봉사 수 있습니다 제안 되었습니다. 따라서, 세균 대사 산물의 창 자-포털 간 조직의 혈액 혈액 통로 추적 모두 기본 및 임상 과학에 대 한 관심이 있을 수 있습니다.
GBB 침투성의 평가 대 한 일반적으로 이용한 실험 방법 수행 있다 생체 외에서 절제 장 세그먼트, 점 막, 또는 인공 막11,12의 파편을 사용 하 여. 그 방법의 정확도 GBB의 적절 한 작동 하는 것이 지속적인 장 혈에서는 사실에 의해 손상 됩니다. 다른 한편으로, 사용할 수 있는 비보에 방법 소변의 평가 또는 외 인 마커13의 주변 혈액 농도에 근거한 다. 그러나, 간 대사 뿐만 아니라 신장 기능, 즉, 사 여과 속도 관 배설에 의해 외 인 화합물의 주변 혈액과 소변 농도 영향을, 즉, 물질 대사를 먼저 통과. 두 매개 변수는 GBB 함수 별도로 연구 주제 사이 크게 달라질 수 있습니다.
이 종이 포털 혈액 샘플링을 사용 하 여 쥐에서 GBB 침투성의 직접 측정을 설명 합니다. 이 비보에 메서드 장 혈액 흐름을 유지 하 고 간 및 신장 기능에 의해 영향을 거의 받지 않습니다. 설명한 방법은 사용 되지 않습니다 일반적으로, 아마도 일부 방법론 어려움 때문에. 우리는 문맥 및 간 정 맥 합류 보다 열 등 한 베 나 정 맥 도관 법 자세히 설명합니다. 문맥 및 열 등 한 베 나 정 맥에서 혈액 샘플링 GBB 침투성 및 간 허가의 평가 뿐만 아니라 분자의, 창 자 세균 대사 산물 또는 의약품 등의 용기-포털 간 조직의 혈액 혈액 통로의 추적을 허용 한다. 우리는 또한 우리의 실험실에서 테스트 하는 방법의 몇 가지 응용 프로그램을 제시. TMA, 직감 세균 대사 산물, TMA의 간 정리의 평가 및 평가 SCFA의 창 자-포털 간 조직의 혈액 혈액 통로의 콜론 침투성의 평가 포함 됩니다.
창 자-혈액 장벽 침투성을 평가 하려면 다음 프로토콜 단계 따라야 한다, 순서 대로: 1 (intraintestinal 행정에 대 한 라인의 삽입), 3 (포털 정 맥 도관 법), 4 (문맥 혈액 샘플링 ), 6 (창 자 침투성 표식 관리), 4.
간 통관 및 창 자-포털 간 조직의 혈액 혈액 통로 평가 하려면 다음 프로토콜 단계 따라야 한다, 순서 대로: 1 (intraintestinal 행정에 대 한 라인의 삽입), 2 (열 등 한 베 나 카바 도관 법), 3 (포털 정 맥 도관 법), 4 (문맥 혈액 샘플링), 5 (열 등 한 베 나 정 맥 혈액 샘플링), 6 (창 자 침투성 표식 관리), 4, 5, 7 ( 간 정리의 계산).
설명 직접 vivo에서, GBB 침투성 측정 방법을 유지 closetophysiological 조건 위장 시스템 (장 혈액의 흐름을 유지), 그리고 간, 신장 기능 영향을 거의 받지 않습니다.
이 기술의 중요 한 단계는 포털 카 테 터의 삽입 이다. 이 수행 되어야 합니다 부드럽게 하 고 결정적으로 같은 시간에. 온화 하 고, 짧은 출혈이 문맥;의 올바르게 수행된 펑크에서 발생할 수 있습니다. 그러나, ?…
The authors have nothing to disclose.
작품은 과학과 고 등 교육 공화국 폴란드의 지원, 다이아몬드 부여 no: DI2017 009247.
Needle OD: 9 mm | Becton Dickinson S.A. | 301300 | |
Polyethylene catheter ID: 0.025", OD: 0.040" | Scientific Commodities, Inc. | #BB520-40 | |
Polyethylene catheter ID: 0.012", OD: 0.025" | Scientific Commodities, Inc. | #BB520-25 | |
C-Flex Tubing,Opaque White 1/50"ID x 1/12 " OD | Cole-Parmer Instrument Co. | 06424-59 | |
Pediatric Foley catheter (size 10F or 8F) | Sigmed | 0000 80305 | |
Surgical ligatures 3/0 | Yavo Sp. Z o.o. | P48JE | |
Absorbable surgical sutures – Polyglactine 910 4/0 | KRUUSE Polska Sp. Zo.o. | 152336 | |
Tissue glue – Loctite 454Cyanoacrylate Adhesive | Loctite | 1370127 | |
Povidone iodine | EGIS Pharmaceuticals PLC | 4449 11 | |
Heparin – Heparinium WZF | WZF Polfa S.A. | 02BK0417 | Dilute 10 times with physiological saline |
Glycerin 86% | Laboratorium Farmaceutyczne Avena | 5.90999E+12 | Serves as a lubricant in colon catheterization |
Xylocaine 2% | AstraZenca | 9941342 | |
Urethane | Sigma-Aldrich (Merck) | U2500-500G | |
Trimethylamine solution 45% | Sigma-Aldrich (Merck) | 92262-1L | |
Syringes 2 mL | B.Braun Melsungen AG | 4606027V | |
Saline 250 mL | Fraesenius Kabi Polska Sp. Z o.o. | 15LL707WL | |
Surgical scissors, straight, length 115 mm, 4 1/2 "blunt ends | Braun | NS-010-115-PKM | |
Artery forceps type Micro-Adson bent, length 140 mm 5 1/2 " | Braun | KN-008-140-ZMK | |
Anatomic forceps, lenght 95 mm, 3 3/4" sharp 0.7×0.55 | Braun | PO-001-007-ZMK | |
Micro Scissors type Vannas, straight, lenght 85 mm, 3 3/8 " the length of the blades 6 mm | Braun | NO-010-085-PMK | |
Towel clamps type Backhouse, lenght 130 mm, 5 1/8" | Braun | HO-128-130-PMK | |
Needle holders, lenght 150 mm, 6" t=0.4 1/2 | Braun | IM-927-150-PZMK | |
Delicate Scissors, lenght 110 mm , straight, 4 3/8” sharp | Braun | NO-052-110-PMK | |
Anatomic forceps, lenght 95 mm, 3 3/4" sharp | Braun | PO-022-001-PMK |