Summary

Ein neuer Ansatz zur Überwachung Graft Neovaskularisation in der menschlichen Gingiva

Published: January 12, 2019
doi:

Summary

Diese Studie führt ein Protokoll zur Messung der Mikrozirkulation in menschlichen Mundschleimhaut durch Laser-Speckle-Kontrast-Bildgebung. Die Überwachung der Wundheilung nach Vestibulumplastik kombiniert mit einem xenogenen Kollagen Graft auf ein klinischer Fall zur Geltung kommt.

Abstract

Laser-Speckle-Kontrast imaging (LSCI) ist eine neuartige Methode zur Messung der oberflächliche Durchblutung über große Flächen. Da es nicht-invasiv ist und vermeidet den direkten Kontakt mit gemessenen Bereich, ist es geeignet für die Überwachung von Blut fließen Änderungen bei der Wundheilung bei menschlichen Patienten. Vestibulumplastik ist Parodontalchirurgie, Mundvorhofes, mit dem Ziel, vestibulären Tiefe mit der gleichzeitigen Erweiterung der keratinisierten Gingiva wiederherzustellen. In diesem speziellen klinischen Fall eine Split Dicke Klappe wurde bei der ersten oberen Prämolaren erhoben und eine xenogenen Kollagen-Matrix wurde auf das resultierende Empfänger Bett angepasst. LSCI wurde verwendet, um die Rück und Neovaskularisation des Transplantats und die umliegende Schleimhaut für ein Jahr zu überwachen. Ein Protokoll ist für die korrekte Einstellung der Messung der Mikrozirkulation in der Mundschleimhaut, Hervorhebung, Schwierigkeiten und mögliche Fehler eingeführt.

Die klinische Fallstudie präsentiert gezeigt, dass – nach dem entsprechenden Protokoll — LSCI ist eine geeignete und zuverlässige Methode zur Weiterverfolgung der Mikrozirkulation in eine heilende Wunde in der menschlichen Mundschleimhaut und gibt nützliche Informationen über Transplantat Integration.

Introduction

Langfristige Veränderungen der menschlichen gingival Mikrozirkulation in einer klinischen Situation beobachten, ist ein heißes Thema in der Mund- und parodontale Chirurgie. Zuverlässige Beurteilung der Durchblutung kann jedoch schwierig sein. Es gibt nur wenige Methoden, die Veränderungen in der Durchblutung der menschlichen Schleimhaut nicht invasiv messen. Zwei von diesen beschäftigen ein Laserstrahl1,2,3,4, aber in einer anderen Weise. Laser-doppler-Flowmetry (LDF) nutzt den Doppler Verschiebung in einem Laser beam5,6, während des Laser-Speckle-Kontrasts bildgebendes Verfahren (LSCI) stützt sich auf das Speckle-Muster des rückgestreuten Laserlichts zur Messung der Geschwindigkeit der roten Blutkörperchen Zellen-7.

LDF misst nur in einem einzigen Punkt und reproduzierbare Normung der Position der Sensoren ist wünschenswert, aber schwierige Aufgabe. Ein weiteres Problem ist, dass die Sonde der LDF klein im Durchmesser (1 mm2). Messung an vorbestimmten Punkten vor der Operation ist zu spezifisch, und kann blind für postoperative Kreislauf Änderungen, während Ödeme, Gewebeentnahme, Gewebe-Bewegung oder der implantierten Prothese verursachen erhebliche Veränderungen in der postoperativen Geometrie der betroffenen weiches Gewebe. Der Messabstand von LDF ist weniger als 1 mm verbietet Einsatz von eine Zahnschiene mit einem vorher festgelegten Loch für die Sonde bei volumetrische Veränderung des Gewebes. LSCI erfordert keine Spezialwerkzeuge für die Lokalisierung und in Bereichen von mehreren cm2messen kann. Infolgedessen kann die Wundheilung in der Operationsstelle verfolgt werden. Darüber hinaus kann LSCI Durchblutung in farbkodierten Bilder zu einem Bruchteil einer Sekunde mit einer Auflösung von bis zu 20 μm anzeigen.

Das LSCI Gerät präsentiert in diesem Papier wird überwiegend für Tierforschung Anwendungen genutzt wo hoher Auflösung in kleinen Messflächen erwünscht. Da jedoch die Struktur und Histologie der menschlichen Mundschleimhaut von Bereich zu Bereich (angehängte Gingiva, marginalen Gingiva, vestibulären Schleimhaut) unterschiedlich sind, ist Durchblutung auch heterogene8. Hochauflösende LSCI hat daher einen großen Vorteil gegenüber Normal-Auflösung LSCI, die in der Regel in menschliche Prüfung verwendet wird.

Das LSCI Instrument beschäftigt einen unsichtbaren Laser (Wellenlänge 785 nm). Der Strahl ist auseinander, um den Messbereich, wodurch eine Speckle-Muster zu beleuchten. Eine CCD-Kamera Bilder der Speckle-Muster in der beleuchteten Fläche. In diesem System verwendeten CCD-Kamera hat eine aktive imaging-Bereich von 1386 x 1034 Pixeln und seine Auflösung beträgt zwischen 20 – 60 µm/Pixel abhängig von der Größe des Bereichs Mess- und auf die Einstellung der Software (niedrig, Mittel, hoch). Es kann Bilder mit einer Geschwindigkeit von 16 Bildern pro Sekunde, oder sogar mehr, bis zu 100 Bilder pro Sekunde aufnehmen, wenn die Bildgröße verringert wird. Durchblutung wird durch die integrierte Software berechnet. Es Variationen in der Speckle-Muster analysiert und quantifiziert den Kontrast. Der daraus resultierende Flux ist farbkodiert, um eine Perfusion-Bild zu erzeugen. Nach unseren bisherigen Ergebnissen beurteilt LSCI die Durchblutung des Zahnfleisches mit guten Reproduzierbarkeit und Reproduzierbarkeit9. Dies bedeutet, dass es ein zuverlässiges Werkzeug ist für die Überwachung von Änderungen in der Mikrozirkulation der Mundschleimhaut nicht nur in kurzfristigen Experimenten, sondern auch bei Langzeitstudien Krankheitsverlauf zu verfolgen oder Wunde heilende10.

In diesem Papier stellen wir ein klinischer Fallbericht zu zeigen, dass die hohe räumliche Auflösung der LSCI es möglich macht, die Neovaskularisation Muster von einem xenogenen Kollagen-Transplantat zu offenbaren. Darüber hinaus zeigt dieser Fall, dass LSCI, aufgrund seiner hohen Zuverlässigkeit, einfühlsam individuelle Variation erkennen könnte. Dies gilt als bedeutende lokale anatomische Variation und ein anderen systemischen Hintergrund zwischen den Fällen macht es schwierig, den chirurgischen Eingriff in klinischen Studien mit Parodontalchirurgie zu standardisieren.

Protocol

Die gemeldeten Methode arbeitete in einer klinischen Studie der ethischen Genehmigung des ungarischen Ausschusses der Gesundheit Registrierung und Training Center gewährt wurde (Zulassungsnummer: 034310/2014/OTIG). 1. LSCI Setup Schalten Sie den Computer und Peripheriegeräte. Schalten Sie das LSCI-Gerät mit dem Schalter auf der Rückseite verwendet werden. Lassen Sie das Gerät mindestens 5 Minuten warmlaufen. Das Gerät ist bereit für die Messung, wenn beide …

Representative Results

Vestibulumplastik ist Parodontalchirurgie, Mundvorhofes, mit dem Ziel, vestibulären Tiefe, die Zone der keratinisierten Gingiva und Weichgewebe Dicke für verbesserte Ästhetik und Funktion zu erhöhen. Die apikal neu positionierte Split Dicke Klappe kombiniert mit einem Kollagen-Matrix ist eine häufig verwendete Vestibulumplastik Verfahren. Xenogenen Kollagen-Matrix ist eine echte Alternative zum autogenen gingivale Transplantat für die Erhöhung der Menge der keratinisierten Gingiva<…

Discussion

Das Ziel dieser Studie war es, eine neuartige Technik zur Überwachung der Neovaskularisation ein Transplantat in der menschlichen Gingiva einzuführen. Nach unseren bisherigen Ergebnissen beurteilt LSCI die Durchblutung des Zahnfleisches mit guten Reproduzierbarkeit und Reproduzierbarkeit9, wenn strikte Umsetzung der einzelnen Schritte des geplanten Protokolls als eine entscheidende Voraussetzung erfüllt ist. LSCI gilt als eine semi-quantitative Verfahren, die Kalibrierung regelmäßig, um Genau…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Diese Arbeiten erfolgten teilweise vom Support vom ungarischen wissenschaftlichen Research Fund unter Grant Nummer K112364 vom ungarischen Ministerium für menschlichen Fähigkeiten, Higher Education-Excellence-Programm an der Semmelweis Universität, Therapie Forschungsmodul und durch die Nationale Forschung, Entwicklung und Innovation Office KFI_16-1-2017-0409.

Materials

PeriCam PSI-HR Perimed AB, Stockholm, Sweden The PeriCam PSI System is an imaging system based on LASCA technology (LAser Speckle Contrast Analysis). The system measures superficial blood perfusion over large areas at fast capture rates. This makes it ideal for investigations of both the spatial and temporal dynamics of microcirculation in almost any tissue.
PIMSoft Perimed AB, Stockholm, Sweden PIMSoft is a data acquisition and analysis software, intended for use together with the PeriCam PSI System and the PeriScan PIM 3 System, for measurement and imaging of superficial blood perfusion.
Geistlich Mucograft Geistlich, Switzerland It's a unique 3D collagne matrix designed specifically for soft tissue regeneration. It's indicated for the gain of keratinized tissue and recession coverage.
Omron M4 Omron Healthcare Inc., Kyoto, Japan Blood pressure monitor, which gives accurate readings.
Nikon D5200 Nikon Corportation, Tokyo, Japan Taking intra oral photos
MS Excel Microsoft Corporation, Redmond, Washington, USA The software used for data management
IBM SPSS Statistics 25 IBM Corp., Armonk, NY, USA The software used for statistical analysis

Riferimenti

  1. Nakamoto, T., et al. Two-Dimensional Real-Time Blood Flow and Temperature of Soft Tissue Around Maxillary Anterior Implants. Implant Dentistry. 21 (6), 522-527 (2012).
  2. Kajiwara, N., et al. Soft tissue biological response to zirconia and metal implant abutments compared with natural tooth: microcirculation monitoring as a novel bioindicator. Implant Dentistry. 24 (1), 37-41 (2015).
  3. Kemppainen, P., Forster, C., Handwerker, H. O. The importance of stimulus site and intensity in differences of pain-induced vascular reflexes in human orofacial regions. Pain. 91 (3), 331-338 (2001).
  4. Kemppainen, P., Avellan, N. L., Handwerker, H. O., Forster, C. Differences between tooth stimulation and capsaicin-induced neurogenic vasodilatation in human gingiva. Journal of Dental Research. 82 (4), 303-307 (2003).
  5. Riva, C., Ross, B., Benedek, G. B. Laser Doppler measurements of blood flow in capillary tubes and retinal arteries. Investigative ophthalmology. 11 (11), 936-944 (1972).
  6. Humeau, A., Steenbergen, W., Nilsson, H., Stromberg, T. Laser Doppler perfusion monitoring and imaging: novel approaches. Medical & Biological Engineering & Computing. 45 (5), 421-435 (2007).
  7. Briers, J. D., Webster, S. Laser speckle contrast analysis (LASCA): a nonscanning, full-field technique for monitoring capillary blood flow. Journal of Biomedical Optics. 1 (2), 174-179 (1996).
  8. Fazekas, R., et al. Functional characterization of collaterals in the human gingiva by laser speckle contrast imaging. Microcirculation. 25 (3), 12446 (2018).
  9. Molnar, E., Fazekas, R., Lohinai, Z., Toth, Z., Vag, J. Assessment of the test-retest reliability of human gingival blood flow measurements by Laser Speckle Contrast Imaging in a healthy cohort. Microcirculation. 25 (2), (2018).
  10. Molnar, E., et al. Evaluation of Laser Speckle Contrast Imaging for the Assessment of Oral Mucosal Blood Flow following Periodontal Plastic Surgery: An Exploratory Study. BioMed Research International. 2017, 4042902 (2017).
  11. Sanz, M., Lorenzo, R., Aranda, J. J., Martin, C., Orsini, M. Clinical evaluation of a new collagen matrix (Mucograft prototype) to enhance the width of keratinized tissue in patients with fixed prosthetic restorations: a randomized prospective clinical trial. Journal of Clinical Periodontology. 36 (10), 868-876 (2009).
  12. Nevins, M., Nevins, M. L., Kim, S. W., Schupbach, P., Kim, D. M. The use of mucograft collagen matrix to augment the zone of keratinized tissue around teeth: a pilot study. The International Journal of Periodontics and Restorative Dentistry. 31 (4), 367-373 (2011).
  13. Lorenzo, R., Garcia, V., Orsini, M., Martin, C., Sanz, M. Clinical efficacy of a xenogeneic collagen matrix in augmenting keratinized mucosa around implants: a randomized controlled prospective clinical trial. Clinical Oral Implants Research. 23 (3), 316-324 (2012).
  14. Perry, D. A., McDowell, J., Goodis, H. E. Gingival microcirculation response to tooth brushing measured by laser Doppler flowmetry. Journal of Periodontology. 68 (10), 990-995 (1997).
  15. Yamaguchi, K., Nanda, R. S., Kawata, T. Effect of orthodontic forces on blood flow in human gingiva. Angle Orthodontist. 61 (3), 193-203 (1991).
  16. Molnár, E., et al. Assessment of heat provocation tests on the human gingiva: the effect of periodontal disease and smoking. Acta Physiologica Hungarica. 102 (2), 176-188 (2015).
  17. Gleissner, C., Kempski, O., Peylo, S., Glatzel, J. H., Willershausen, B. Local gingival blood flow at healthy and inflamed sites measured by laser Doppler flowmetry. Journal of Periodontology. 77 (10), 1762-1771 (2006).
  18. Hinrichs, J. E., Jarzembinski, C., Hardie, N., Aeppli, D. Intrasulcular laser Doppler readings before and after root planing. Journal of Clinical Periodontology. 22 (11), 817-823 (1995).
  19. Svalestad, J., Hellem, S., Vaagbo, G., Irgens, A., Thorsen, E. Reproducibility of transcutaneous oximetry and laser Doppler flowmetry in facial skin and gingival tissue. Microvascular Research. 79 (1), 29-33 (2010).
  20. Sasano, T., Kuriwada, S., Sanjo, D. Arterial blood pressure regulation of pulpal blood flow as determined by laser Doppler. Journal of Dental Research. 68 (5), 791-795 (1989).
  21. Ikawa, M., Ikawa, K., Horiuchi, H. The effects of thermal and mechanical stimulation on blood flow in healthy and inflamed gingiva in man. Archives of Oral Biology. 43 (2), 127-132 (1998).
  22. Baab, D. A., Oberg, P. A., Holloway, G. A. Gingival blood flow measured with a laser Doppler flowmeter. Journal of Periodontal Research. 21 (1), 73-85 (1986).
  23. Fazekas, A., Csempesz, F., Csabai, Z., Vág, J. Effects of pre-soaked retraction cords on the microcirculation of the human gingival margin. Operative Dentistry. 27 (4), 343-348 (2002).
  24. Csillag, M., Nyiri, G., Vag, J., Fazekas, A. Dose-related effects of epinephrine on human gingival blood flow and crevicular fluid production used as a soaking solution for chemo-mechanical tissue retraction. Journal of Prosthetic Dentistry. 97 (1), 6-11 (2007).
  25. Tanaka, M., Hanioka, T., Kishimoto, M., Shizukuishi, S. Effect of mechanical toothbrush stimulation on gingival microcirculatory functions in inflamed gingiva of dogs. Journal of Clinical Periodontology. 25 (7), 561-565 (1998).
  26. Rothamel, D., et al. Biodegradation pattern and tissue integration of native and cross-linked porcine collagen soft tissue augmentation matrices – an experimental study in the rat. Head & Face Medicine. 10, 10 (2014).
  27. Schwarz, F., Rothamel, D., Herten, M., Sager, M., Becker, J. Angiogenesis pattern of native and cross-linked collagen membranes: an immunohistochemical study in the rat. Clinical Oral Implants Research. 17 (4), 403-409 (2006).
  28. Vergara, J. A., Quinones, C. R., Nasjleti, C. E., Caffesse, R. G. Vascular response to guided tissue regeneration procedures using nonresorbable and bioabsorbable membranes in dogs. Journal of Periodontology. 68 (3), 217-224 (1997).
  29. Oliver, R. C., Loe, H., Karring, T. Microscopic evaluation of the healing and revascularization of free gingival grafts. Journal of Periodontal Research. 3 (2), 84-95 (1968).
  30. Janson, W. A., Ruben, M. P., Kramer, G. M., Bloom, A. A., Turner, H. Development of the blood supply to split-thickness free ginival autografts. Journal of Periodontology. 40 (12), 707-716 (1969).
  31. Mormann, W., Bernimoulin, J. P., Schmid, M. O. Fluorescein angiography of free gingival autografts. Journal of Clinical Periodontology. 2 (4), 177-189 (1975).
  32. Busschop, J., de Boever, J., Schautteet, H. Revascularization of gingival autografts placed on different receptor beds. A fluoroangiographic study. Journal of Clinical Periodontology. 10 (3), 327-332 (1983).
  33. Fazekas, R., et al. A proposed method for assessing the appropriate timing of early implant placements: a case report. Journal of Oral Implantology. , (2018).
  34. Briers, J. D., Fercher, A. F. Retinal blood-flow visualization by means of laser speckle photography. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 22 (2), 255-259 (1982).
  35. Srienc, A. I., Kurth-Nelson, Z. L., Newman, E. A. Imaging retinal blood flow with laser speckle flowmetry. Front Neuroenergetics. 2, (2010).
  36. Choi, B., Kang, N. M., Nelson, J. S. Laser speckle imaging for monitoring blood flow dynamics in the in vivo rodent dorsal skin fold model. Microvascular Research. 68 (2), 143-146 (2004).
  37. Ayata, C., et al. Laser speckle flowmetry for the study of cerebrovascular physiology in normal and ischemic mouse cortex. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 24 (7), 744-755 (2004).
  38. Armitage, G. A., Todd, K. G., Shuaib, A., Winship, I. R. Laser speckle contrast imaging of collateral blood flow during acute ischemic stroke. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 30 (8), 1432-1436 (2010).
  39. Lindahl, F., Tesselaar, E., Sjoberg, F. Assessing paediatric scald injuries using Laser Speckle Contrast Imaging. Burns. 39 (4), 662-666 (2013).
  40. Mirdell, R., Iredahl, F., Sjoberg, F., Farnebo, S., Tesselaar, E. Microvascular blood flow in scalds in children and its relation to duration of wound healing: A study using laser speckle contrast imaging. Burns. , (2016).
  41. Zotterman, J., Bergkvist, M., Iredahl, F., Tesselaar, E., Farnebo, S. Monitoring of partial and full venous outflow obstruction in a porcine flap model using laser speckle contrast imaging. Journal of Plastic, Reconstructive & Aesthetic Surgery. 69 (7), 936-943 (2016).
  42. Hecht, N., Woitzik, J., Dreier, J. P., Vajkoczy, P. Intraoperative monitoring of cerebral blood flow by laser speckle contrast analysis. Neurosurgical Focus. 27 (4), E11 (2009).
check_url/it/58535?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Fazekas, R., Molnár, E., Mikecs, B., Lohinai, Z., Vág, J. A Novel Approach to Monitoring Graft Neovascularization in the Human Gingiva. J. Vis. Exp. (143), e58535, doi:10.3791/58535 (2019).

View Video