本文介绍了高频超声对小鼠胎儿体内分析的技术。这种方法允许胎儿的随访和胎盘参数的分析, 以及整个怀孕期间的产妇和胎儿血液流动。
超声成像是一种广泛用于检测人体和动物组织器官异常和肿瘤的方法。该方法无创、无害、无痛, 应用简单、快速, 即使使用移动设备, 也可以在任何地方完成。在怀孕期间, 超声成像被用来密切监测胎儿的发育。该技术是重要的评估宫内生长限制 (iugr), 妊娠并发症, 对母亲和胎儿的短期和长期健康的影响。了解 iugr 的过程对于制定有效的治疗策略是不可或缺的。
本手稿中使用的超声波系统是为分析小动物而产生的一种超声波装置, 可用于包括怀孕研究在内的各种研究领域。在这里, 我们描述了系统的使用, 在体内分析胎儿的自然杀手 (nk) 细胞肥大细胞 (mc) 缺乏的母亲, 生的生长限制的幼崽。该协议包括系统的准备、测量前和测量过程中小鼠的处理, 以及 b 模式、彩色多普勒模式和脉冲波多普勒模式的使用。分析了胎儿的大小、胎盘大小和胎儿的血液供应情况。我们发现, 从妊娠中期开始, 缺乏 nkcc 的小鼠的植入面积和胎盘变小。此外, mc/nk 缺乏与胎儿脐叶(uma) 中无端舒张流和反转端舒张流和阻力指数升高有关。协议中描述的方法可以很容易地用于相关和非相关的研究主题。
超声波是高于人耳听觉范围的声波, 高于约20千赫 1.像蝙蝠、威尔士、海豚2、3、老鼠4、老鼠5和老鼠狐猴 6这样的动物都使用超声波进行定向或交流。人类利用超声波进行多种技术和医疗应用。超声波装置能够产生声波, 并传播和表示信号。如果超声波遇到障碍, 声音会被反射、吸收或通过。超声作为一种成像方法的应用, 称为超声, 用于分析人体或兽医的有机组织, 如心脏 (超声心动图)7,8, 肺 9, 甲状腺10, 肾脏11, 和尿和生殖道12,13;检测胆结石14和肿瘤15;并评估血管或器官的灌注16,17。超声是怀孕期间产前护理的标准方法, 胎儿发育障碍或损伤可以及早识别。具体而言, 定期密切监测胎儿的生长情况, 以识别可能的 iugr。最后, 可以监测胎儿的血液流动情况, 因为这可以指出生长限制18、19、20、21.
与其他方法 (如放射学) 相比, 超声成像的一个主要优点是要分析的组织的声音无害性。这种简单快捷的方法是无创、无痛的, 可以多次使用。超声波设备的初始支出昂贵;然而, 所需的消耗品是便宜的。本手稿中使用的超声波系统适用于一系列动物模型(即小鼠和鱼类), 而对于人类而言, 超声波设备需要 3-15 mhz 的频率, 小鼠需要 15-70 mhz 的频率。
本文介绍了一种使用 b 模式、彩色多普勒模式和脉冲波多普勒模式的协议。描述包括小鼠的准备以及性能、数据采集和存储。该方法已成功地应用于不同的小鼠菌株在所有妊娠期, 可用于调查胎儿和胎盘发育以及母亲和胎儿的血液参数。在这里, 所有的应用都解释了基于我们的研究使用怀孕的 mc nk 缺乏和控制小鼠。
利用我们的超声系统, 我们展示了从 gd10 开始缺乏 mcw 的母亲胎儿生长的限制。此外, 在 gd10 和 12, 我们观察到胎盘尺寸减少, 在 gd10 中, 一些缺乏 umcm函的小鼠在 uma 中没有或逆转端部舒张流。这种血管化不良的迹象与动脉的显著阻力指数有关。结果证实了 uMCs 和 uMCs 在妊娠和胎儿健康以及了解 iugr 过程中的重要作用。
该协议适用于从 gd5 开始 (植入后) 的每一个妊娠日。议定书?…
The authors have nothing to disclose.
非常感谢成像仪器公司 (特别是 magdalena steiner、katin suppelt 和 sandra meyer) 提供了令人愉快和快速的支持, 并及时、全面地回答了我们所有有关成像系统及其使用的问题。我们感谢汉斯-雷默·罗德瓦尔德教授和索尔斯滕·费耶拉本德博士 (德国德凯斯兹·海德尔贝格) 提供了 cpa3 殖民地。此外, 我们还要感谢 stefanie langwisch, 他负责鼠标群, 并生成了图1中的图片。
这项工作和成像系统的资金来自德国防方大学 (dfg) 至 a. c. z. (ze526x-1 和 az526/1) 的赠款, 这些项目是 dfg 1394 “健康和疾病中的肥大细胞” 中的项目。
LEAF anti-Maus CD122 (IL-2Rb) | BioLegend | 123204 | Klon TM-β1; 500 µg |
Vevo 2100 System | FujiFilm VisualSonics Inc. | Transducer MS550D-0421 | |
Vevo LAB Software | FujiFilm VisualSonics Inc. | ||
Isoflurane | Baxter | PZN: 6497131 | |
Electrode gel | Parker | 12_8 | |
Surgical tape | 3M Transpore | 1527-1 | |
Eye cream | Bayer | PZN: 1578675 | |
Cotton tipped applicators | Raucotupf | 11969 | 100 pieces |
Depilatory cream | Reckitt Benckiser | 2077626 | |
Compresses | Nobamed Paul Danz AG | 856110 | 10 x 10 cm |
Ultrasound gel | Gello GmbH | 246000 |