JoVE Journal > Cancer Research
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Risultati
Discussion
Divulgazioni
Acknowledgements
Materials
Riferimenti
Traduzione automatica
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.
Ricerca sul cancro

Парамиксовирусы для ориентированных на опухоль иммуномодуляция: дизайн и оценке Ex Vivo

Published: January 07, 2019
doi:
10.3791/58651
,
1Department of Translational Oncology,German Cancer Research Center (DKFZ) and National Center for Tumor Diseases (NCT), 2Faculty of Biosciences,Heidelberg University, 3Department of Medical Oncology,NCT and Heidelberg University Hospital

Summary

Этот протокол описывает подробный рабочий процесс для поколения и ex vivo характеристика онколитического вирусов для выражения иммуномодуляторов, используя вирусы Кори кодирования bispecific Т-клеток Ингейджер качестве примера. Применение и адаптация для других платформ вектор и трансгенов будет ускорить разработку Роман immunovirotherapeutics для клинических перевода.

Abstract

Успешное Рак иммунотерапия имеет потенциал для достижения долгосрочного управления опухоли. Несмотря на недавние успехи клинической сохраняется настоятельная необходимость для безопасного и эффективного лечения, с учетом индивидуального тумора иммунной профилей. Онколитического вирусов позволяют индукции противоопухолевого иммунного ответа, а также экспрессии генов, опухоль ограничена. Этот протокол описывает поколения и ex vivo анализ иммуномодулирующих онколитического векторов. Сосредоточение внимания на вирусы вакцины кори кодирования bispecific Т-клеток Ингейджер качестве примера, Общая методология может быть адаптирована для других видов вирусов и трансгенов. Представлен рабочий процесс включает в себя дизайн, клонирование, спасения и распространение рекомбинантных вирусов. Анализы для анализа кинетики репликации и литические деятельность вектора, а также функциональных возможностей изолированных иммуномодулятора ex vivo включены, способствуя тем самым поколения Роман агентов для дальнейшего развития в доклинических моделях и в конечном счете Клинические перевод.

Introduction

Онколитического вирусы (ОВС) разрабатываются как против рака терапии, что конкретно реплицировать в пределах и убить опухолевые клетки, оставляя нетронутыми здоровые ткани. Это сейчас стало общее понимание что онколитического Виротерапии (ОВТ), в большинстве случаев, не полагаться исключительно на распад опухоли полной эффективности репликации и распространение вируса, но требует дополнительных механизмов действий, для успеха лечения, включая сосудистой и стромальных ориентации и, главное, стимуляции иммунной1,2,3,4. Хотя многие ранние исследования ов используется неизмененное вирусов, текущие исследования выгоду от улучшения биологических, понимание, вирус биобанках, что потенциально содержат Роман OVs и возможности, предоставляемые генной инженерии для создания передовых OV платформы5,6,7.

Учитывая недавний успех иммунотерапия, иммуномодулирующих трансгенов представляют особый интерес о генной инженерии OVs. Целевые выражение такого гена продукции OV-инфицированных опухолевых клеток снижает токсичность, по сравнению с системного администрирования. Таргетинг достигается с помощью вирусов с присущие oncoselectivity или изменяя вирусный тропизм8. Местные иммуномодуляция повышает многогранный механизмы противоопухолевого ОВТ. Кроме того эта стратегия играет важную роль в опрашивания взаимодействие между вирусов, опухолевых клеток и иммунной системе хоста. С этой целью этот протокол обеспечивает применимым и регулируемый рабочий процесс проектирования, клонировать, спасение, распространять и проверить онколитического парамиксовирус (специально вирус кори) векторы кодирования такие трансгенов.

Модуляции иммунного ответа может быть достигнуто путем широкий спектр продукции трансген, ориентация различные этапы рака иммунитет цикла9, включая укрепление опухолевые антигены [например, опухольассоциированных антигенов (ТААС) или индукторов из комплекс гистосовместимости (MHC) сорта молекул] над поддержкой дендритные клетки созревания для презентации эффективного антигена (цитокинов); Рекрутинг и такие как активация желаемого иммунные клетки цитотоксическим и вспомогательные Т-клеток [chemokines, bispecific Ингейджер Т-клеток (BTEs)]; ориентация подавляющие клетки, такие как регулирования T-клетки, клетки миелоидного производные супрессор, связанный тумором макрофагов и связанных рака фибробластов (антител, BTEs, цитокинов); и предотвращение эффекторных клеток торможение и истощения (ингибиторы контрольно-пропускного пункта). Таким образом имеется множество биологических агентов. Оценка таких вирусов кодировке иммуномодуляторов о терапевтической эффективности и возможного синергизма, а также понимания соответствующих механизмов необходимо усовершенствовать терапии рака.

Негативном смысле одноцепочечной РНК-вирусов Paramyxoviridae семьи были характерны несколько функций способствуют их использования как онколитического векторов. К ним относятся природные oncotropism, большой геномной емкости для трансгенов (более 5 КБ)10,11, эффективного распространения, включая syncytia формирования и высокую иммуногенность12. Таким образом OV платформы, основанные на плотоядных вирус13, паротита вирус14, вирус болезни Ньюкасла15, Сэндай вирус16,17, обезьяний вирус 518и Tupaia парамиксовирус19 были разработаны. Наиболее заметно живой аттенуированной вакцины от кори вирус вакцины штаммов (MV) продвинулись в доклинической и клинической разработки20,21. Эти штаммы вируса были использованы на протяжении десятилетий для плановой иммунизации с отличным безопасности записи22. Кроме того нет никакого риска для инсерционному мутагенезу благодаря строго цитозольной репликации парамиксовирусы. Универсальный обратной генетики система, основанная на анти геномной cDNA, который позволяет для вставки трансгенов в дополнительных транскрипции единиц (АТУС) является наличие11,23,24. MV векторов кодирования Симпорт йодистого натрия (MV-ННГ) для изображений и радиотерапии или растворимые раковоэмбрионального антиген (MV-Сеа) как суррогат маркера для экспрессии вирусных генов в настоящее время оцениваются в клинических исследованиях (NCT02962167, NCT02068794, NCT02192775, NCT01846091, NCT02364713, NCT00450814, NCT02700230, NCT03456908, NCT00408590 и NCT00408590). Безопасное управление было подтверждено и эффективности противоопухолевой были случаи в предыдущих исследованиях25,26,27,28,29, 30 (обзор Msaouel et др.31), проложив путь для дополнительных онколитического Кори вирусов, которые были разработаны и испытаны preclinically. MV, кодирование иммуномодулирующих, молекулы, ориентация разнообразные шаги цикла рака иммунитет показали задержки роста опухоли и/или продлить выживание в мышей, с доказательствами для иммунной системы эффективности и долгосрочной защитной иммунной памяти в сингенных модели мыши. Вектор кодировке трансгенов включают гранулоцитарно макрофагальный колонии стимулирующий фактор (ГМ-КСФ)32,33, активация нейтрофилов белка пилорусов 34, ингибиторы иммунной контрольно-пропускного пункта35, Интерлейкин-12 (IL-12)36, ТААС37и BTEs38, которые перекрестные ссылки опухоль поверхностного антигена с CD3 и таким образом побудить противоопухолевую активность поликлональных Т-клеток, независимо от того, Т-клеток рецепторов специфичность и Сопредседатель стимуляции ( Рисунок 1). Перспективных доклинические результаты, полученные для этих конструкций спроса дальнейшие поступательные усилия.

Talimogene laherparepvec (Т-VEC), типа я кодирования ГМ-КСФ, вирус простого герпеса является единственным онколитического терапевтический одобрен США продовольствия и медикаментов (FDA) и Европейское агентство лекарственных средств (EMA). Не исследование III фазы, ведущих к утверждения в конце 2015 года только показал эффективность на сайте интра опухолевой инъекции, но и абскопальные эффекты (то есть, ремиссии не вводили поражений) в передовые меланомы39. T-VEC вступил дополнительные испытания для применения в других опухолевых образований (например,, не Меланома кожи рак, NCT03458117; рак поджелудочной железы, NCT03086642) и для оценки комбинированной терапии, особенно с иммунной контрольно-пропускной пункт ингибиторы (NCT02978625, NCT03256344, NCT02509507, NCT02263508, NCT02965716, NCT02626000, NCT03069378, NCT01740297 и Рибас et др.40).

Это демонстрирует не только потенциал иммунотерапия онколитического, но и необходимость дальнейших научных исследований для выявления Улучшенный комбинации ОВТ и имуннокорекция. Рациональная конструкция дополнительных векторов и их развития для доклинических испытаний является ключом к этой деятельности. Это будет также способствовать понимание основных механизмов и имеет последствия для перехода к более персонализированные лечения рака. С этой целью эта публикация представляет методологию для модификации и развития Парамиксовирусы для целевых Рак иммунотерапия и, более конкретно, вирусы Кори онколитического, кодирование Т клеток привлечение антител (рис. 2).

Protocol

Примечание: [O], [P] и [М] указывают подразделов, применимые к: OVs, в целом, (большинство) Парамиксовирусы или MV только, соответственно. [B] указывает конкретные разделы для Заушных трансгенов. 1 клонирование иммуномодулятор кодирования трансгенов в векторы вирус кори…

Representative Results

Рисунок 1 иллюстрирует механизм действия вирусов Кори онколитического кодирования Ингейджер bispecific Т-клеток. Изображением рабочего процесса этот протокол блок-схема представлена на рисунке 2. На рисунке 3 пока?…

Discussion

Иммунотерапия онколитического (т.е.., ОВТ в сочетании с иммуномодуляция) имеет большие перспективы для лечения рака, требуют дальнейшего развития и оптимизации онколитического вирусов кодирования иммуномодулирующих белков. Этот протокол описывает методы для создания и проверки ?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Эти методы были установлены в группе Виротерапии, возглавляемая Проф д-р д-р Ги Ungerechts в национальном центре опухолевых болезней в Гейдельберге. Мы признательны ему и всем членам группы лаборатории, особенно спек Тобиас доктор, доктор Rūta Veinalde, Джудит Förster, Биргит Hoyler и Джессика Альберт. Эта работа была поддержана, остальное Kröner-Fresenius-Stiftung (Грант 2015_A78 до н.э. Engeland) и немецкий Национальный научный фонд (DFG, Грант EN 1119/2-1 до н.э. Engeland). J.P.W. Heidbuechel получает стипендию, Гельмгольца Международная высшая школа для исследований рака.

Materials

Rapid DNA Dephos & Ligation Kit Roche Life Science, Mannheim, Germany 4898117001
CloneJET PCR Cloning Kit Thermo Fisher Scientific, St. Leon-Rot K1231
Agarose Sigma-Aldrich, Taufkirchen, Germany A9539-500G
QIAquick Gel Extraction Kit QIAGEN, Hilden, Germany 28704
NEB 10-beta Competent E. coli New England Biolabs (NEB), Frankfurt/Main, Germany C3019I
LB medium after Lennox Carl Roth, Karlsruhe, Germany X964.1
Ampicillin Carl Roth, Karlsruhe, Germany HP62.1
QIAquick Miniprep Kit QIAGEN, Hilden, Germany 27104
Restriction enzyme HindIII-HF New England Biolabs (NEB), Frankfurt/Main, Germany R3104S
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) Invitrogen, Darmstadt, Germany 31966-021
Fetal bovine serum (FBS) Biosera, Boussens, France FB-1280/500
FugeneHD Promega, Mannheim, Germany E2311 may be replaced by transfection reagent of choice
Kanamycin Sigma-Aldrich, Taufkirchen, Germany K0129
Vero cells ATCC, Manassas, VA, USA CCL81
B16-CD46/ B16-CD20-CD46 J. Heidbuechel, DKFZ Heidelberg available upon request
Granta-519 DSMZ, Braunschweig, Germany ACC 342
Opti-MEM (serum-free medium) Gibco Life Technologies, Darmstadt, Germany 31985070
Colorimetric Cell Viability Kit III (XTT) PromoKine, Heidelberg, Germany PK-CA20-300-1000 includes XTT reagent
Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline (PBS) Gibco Life Technologies, Darmstadt, Germany 14190-094
QIAquick Ni-NTA Spin Columns QIAGEN, Hilden, Germany 31014
Sodium chloride Carl Roth, Karlsruhe, Germany 3957.3
Imidazole Carl Roth, Karlsruhe, Germany I5513-25G
Amicon Ultra-15, PLGC Ultracel-PL Membran, 10 kDa Merck, Darmstadt, Germany UFC901024
BCA Protein Assay Kit Merck Milipore 71285-3
IgG from human serum Sigma-Aldrich, Taufkirchen, Germany I4506
Anti-HA-PE Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Germany 130-092-257 RRID: AB_871939
Mouse IgG1, kappa Isotype Control, Phycoerythrin Conjugated, Clone MOPC-21 antibody BD Biosciences, Heidelberg, Germany 555749 RRID: AB_396091
Anti-HA-biotin antibody, clone 3F10 Sigma-Aldrich, Taufkirchen, Germany 12158167001 RRID: AB_390915
Anti-Biotin MicroBeads Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Germany 130-090-485
MS Columns Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Germany 130-042-201
MiniMACS Separator Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Germany 130-042-102
MACS MultiStand Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Germany 130-042-303
RIPA buffer Rockland Immunochemicals, Gilbertsville, PA, USA MB-030-0050
CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay Promega, Mannheim, Germany G1780 includes 10x lysis solution, substrate solution (substrate mix and assay buffer), and stop solution
Cell lifter Corning, Reynosa, Mexico 3008
10 cm dishes Corning, Oneonta, NY, USA 430167
15 cm dishes Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany 639160
96-well plates, U-bottom TPP, Trasadingen, Switzerland 92097
96-well plates, flat bottom Neolab, Heidelberg, Germany 353072
6-well plates Neolab, Heidelberg, Germany 353046
12-well plates Neolab, Heidelberg, Germany 353043
50 mL tubes nerbe plus, Winsen/Luhe, Germany 02-572-3001
T175 cell culture flasks Thermo Fisher Scientific, St. Leon-Rot 159910
0.22 µm filters Merck, Darmstadt, Germany SLGPM33RS
DOWNLOAD MATERIALS LIST

Riferimenti

  1. Lichty, B. D., Breitbach, C. J., Stojdl, D. F., Bell, J. C. Going viral with cancer immunotherapy. Nature Reviews Cancer. 14 (8), 559-567 (2014).
  2. Cassady, K. A., Haworth, K. B., Jackson, J., Markert, J. M., Cripe, T. P. To Infection and Beyond: The Multi-Pronged Anti-Cancer Mechanisms of Oncolytic Viruses. Viruses. 8 (2), (2016).
  3. Twumasi-Boateng, K., Pettigrew, J. L., Kwok, Y. Y. E., Bell, J. C. Oncolytic viruses as engineering platforms for combination immunotherapy. Nature Reviews Cancer. , (2018).
  4. Achard, C., et al. Lighting a Fire in the Tumor Microenvironment Using Oncolytic Immunotherapy. EBioMedicine. 31, 17-24 (2018).
  5. Kelly, E., Russell, S. J. History of oncolytic viruses: genesis to genetic engineering. Molecular Therapy. The Journal of the American Society of Gene Therapy. 15 (4), 651-659 (2007).
  6. Russell, S. J., Peng, K. W., Bell, J. C. Oncolytic virotherapy. Nature Biotechnology. 30 (7), 658-670 (2012).
  7. Russell, S. J., Peng, K. W. Oncolytic Virotherapy: A Contest between Apples and Oranges. Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene Therapy. 25 (5), 1107-1116 (2017).
  8. Seymour, L. W., Fisher, K. D. Oncolytic viruses: finally delivering. British Journal of Cancer. 114 (4), 357-361 (2016).
  9. Chen, D. S., Mellman, I. Oncology meets immunology: the cancer-immunity cycle. Immunity. 39 (1), 1-10 (2013).
  10. Gao, Q., Park, M. S., Palese, P. Expression of transgenes from newcastle disease virus with a segmented genome. Journal of Virology. 82 (6), 2692-2698 (2008).
  11. Billeter, M. A., Naim, H. Y., Udem, S. A. Reverse genetics of measles virus and resulting multivalent recombinant vaccines: applications of recombinant measles viruses. Current Topics in Microbiology and Immunology. 329, 129-162 (2009).
  12. Matveeva, O. V., Guo, Z. S., Shabalina, S. A., Chumakov, P. M. Oncolysis by paramyxoviruses: multiple mechanisms contribute to therapeutic efficiency. Molecular Therapy Oncolytics. 2, (2015).
  13. Suter, S. E., et al. In vitro canine distemper virus infection of canine lymphoid cells: a prelude to oncolytic therapy for lymphoma. Clinical Cancer Research. 11 (4), 1579-1587 (2005).
  14. Ammayappan, A., Russell, S. J., Federspiel, M. J. Recombinant mumps virus as a cancer therapeutic agent. Molecular Therapy Oncolytics. 3, 16019 (2016).
  15. Schirrmacher, V. Oncolytic Newcastle disease virus as a prospective anti-cancer therapy. A biologic agent with potential to break therapy resistance. Expert Opinion on Biological Therapy. 15 (12), 1757-1771 (2015).
  16. Saga, K., Kaneda, Y. Oncolytic Sendai virus-based virotherapy for cancer: recent advances. Oncolytic Virotherapy. 4, 141-147 (2015).
  17. Matveeva, O. V., Kochneva, G. V., Netesov, S. V., Onikienko, S. B., Chumakov, P. M. Mechanisms of Oncolysis by Paramyxovirus Sendai. Acta Naturae. 7 (2), 6-16 (2015).
  18. Gainey, M. D., Manuse, M. J., Parks, G. D. A hyperfusogenic F protein enhances the oncolytic potency of a paramyxovirus simian virus 5 P/V mutant without compromising sensitivity to type I interferon. Journal of Virology. 82 (19), 9369-9380 (2008).
  19. Engeland, C. E., et al. A Tupaia paramyxovirus vector system for targeting and transgene expression. The Journal of General Virology. 98 (9), 2248-2257 (2017).
  20. Russell, S. J., Peng, K. W. Measles virus for cancer therapy. Current Topics in Microbiology and Immunology. 330, 213-241 (2009).
  21. Aref, S., Bailey, K., Fielding, A. Measles to the Rescue: A Review of Oncolytic Measles Virus. Viruses. 8 (10), (2016).
  22. Demicheli, V., Rivetti, A., Debalini, M. G., Di Pietrantonj, C. Vaccines for measles, mumps and rubella in children. The Cochrane Database of Systematic Reviews. (2), 004407 (2012).
  23. Radecke, F., et al. Rescue of measles viruses from cloned DNA. The EMBO Journal. 14 (23), 5773-5784 (1995).
  24. Martin, A., Staeheli, P., Schneider, U. RNA polymerase II-controlled expression of antigenomic RNA enhances the rescue efficacies of two different members of the Mononegavirales independently of the site of viral genome replication. Journal of Virology. 80 (12), 5708-5715 (2006).
  25. Russell, S. J., et al. Remission of disseminated cancer after systemic oncolytic virotherapy. Mayo Clinic Proceedings. 89 (7), 926-933 (2014).
  26. Hardcastle, J., et al. Immunovirotherapy with measles virus strains in combination with anti-PD-1 antibody blockade enhances antitumor activity in glioblastoma treatment. Neuro-Oncology. 19 (4), 493-502 (2017).
  27. Dispenzieri, A., et al. Phase I trial of systemic administration of Edmonston strain of measles virus genetically engineered to express the sodium iodide symporter in patients with recurrent or refractory multiple myeloma. Leukemia. 31 (12), 2791-2798 (2017).
  28. Galanis, E., et al. Phase I trial of intraperitoneal administration of an oncolytic measles virus strain engineered to express carcinoembryonic antigen for recurrent ovarian cancer. Ricerca sul cancro. 70 (3), 875-882 (2010).
  29. Galanis, E., et al. Oncolytic measles virus expressing the sodium iodide symporter to treat drug-resistant ovarian cancer. Ricerca sul cancro. 75 (1), 22-30 (2015).
  30. Kurokawa, C., et al. Constitutive Interferon Pathway Activation in Tumors as an Efficacy Determinant Following Oncolytic Virotherapy. Journal of the National Cancer Institute. , (2018).
  31. Msaouel, P., et al. Clinical Trials with Oncolytic Measles Virus: Current Status and Future Prospects. Current Cancer Drug Targets. 18 (2), 177-187 (2018).
  32. Grote, D., Cattaneo, R., Fielding, A. K. Neutrophils contribute to the measles virus-induced antitumor effect: enhancement by granulocyte macrophage colony-stimulating factor expression. Ricerca sul cancro. 63 (19), 6463-6468 (2003).
  33. Grossardt, C., et al. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor-armed oncolytic measles virus is an effective therapeutic cancer vaccine. Human Gene Therapy. 24 (7), 644-654 (2013).
  34. Iankov, I. D., et al. Expression of immunomodulatory neutrophil-activating protein of Helicobacter pylori enhances the antitumor activity of oncolytic measles virus. Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene Therapy. 20 (6), 1139-1147 (2012).
  35. Engeland, C. E., et al. CTLA-4 and PD-L1 Checkpoint Blockade Enhances Oncolytic Measles Virus Therapy. Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene Therapy. 22 (11), 1949-1959 (2014).
  36. Veinalde, R., et al. Oncolytic measles virus encoding interleukin-12 mediates potent antitumor effects through T cell activation. Oncoimmunology. 6 (4), 1285992 (2017).
  37. Hutzler, S., et al. Antigen-specific oncolytic MV-based tumor vaccines through presentation of selected tumor-associated antigens on infected cells or virus-like particles. Scientific Reports. 7 (1), 16892 (2017).
  38. Speck, T., et al. Targeted BiTE expression by an oncolytic vector augments therapeutic efficacy against solid tumors. Clinical Cancer Research. , (2018).
  39. Andtbacka, R. H., et al. Talimogene Laherparepvec Improves Durable Response Rate in Patients With Advanced Melanoma. Journal of Clinical Oncology: Official Journal of the American Society of Clinical Oncology. 33 (25), 2780-2788 (2015).
  40. Ribas, A., et al. Oncolytic Virotherapy Promotes Intratumoral T Cell Infiltration and Improves Anti-PD-1 Immunotherapy. Cell. 170 (6), 1109-1119 (2017).
  41. Patel, S. J., et al. Identification of essential genes for cancer immunotherapy. Nature. 548 (7669), 537-542 (2017).
  42. Kimple, M. E., Brill, A. L., Pasker, R. L. Overview of affinity tags for protein purification. Current Protocols in Protein Science. 73, (2013).
  43. Cattaneo, R., Rebmann, G., Baczko, K., ter Meulen, V., Billeter, M. A. Altered ratios of measles virus transcripts in diseased human brains. Virology. 160 (2), 523-526 (1987).
  44. Gutsche, I., et al. Structural virology. Near-atomic cryo-EM structure of the helical measles virus nucleocapsid. Science. 348 (6235), 704-707 (2015).
  45. Kolakofsky, D., et al. Paramyxovirus RNA synthesis and the requirement for hexamer genome length: the rule of six revisited. Journal of Virology. 72 (2), 891-899 (1998).
  46. Kolakofsky, D., Roux, L., Garcin, D., Ruigrok, R. W. Paramyxovirus mRNA editing, the “rule of six” and error catastrophe: a hypothesis. The Journal of General Virology. 86, 1869-1877 (2005).
  47. Parks, C. L., et al. Analysis of the noncoding regions of measles virus strains in the Edmonston vaccine lineage. Journal of Virology. 75 (2), 921-933 (2001).
  48. JoVE Science Education Database. Molecular Cloning. JoVE Science Education Database. , (2018).
  49. JoVE Science Education Database. Bacterial Transformation: The Heat Shock Method. JoVE Science Education Database. , (2018).
  50. Bergkessel, M., Guthrie, C. Colony PCR. Methods in Enzymology. 529, 299-309 (2013).
  51. Rota, J. S., Wang, Z. D., Rota, P. A., Bellini, W. J. Comparison of sequences of the H, F, and N coding genes of measles virus vaccine strains. Virus Research. 31 (3), 317-330 (1994).
  52. Bankamp, B., Takeda, M., Zhang, Y., Xu, W., Rota, P. A. Genetic characterization of measles vaccine strains. The Journal of Infectious Diseases. 204, 533-548 (2011).
  53. Dulbecco, R., Vogt, M. Plaque formation and isolation of pure lines with poliomyelitis viruses. The Journal of Experimental Medicine. 99 (2), 167-182 (1954).
  54. Smith, P. K., et al. Measurement of protein using bicinchoninic acid. Analytical Biochemistry. 150 (1), 76-85 (1985).
  55. Bradford, M. M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analytical Biochemistry. 72, 248-254 (1976).
  56. JoVE Science Education Database. Separating Protein with SDS-PAGE. JoVE Science Education Database. , (2018).
  57. JoVE Science Education Database. The Western Blot. JoVE Science Education Database. , (2018).
  58. Menck, K., et al. Isolation of human monocytes by double gradient centrifugation and their differentiation to macrophages in teflon-coated cell culture bags. Journal of Visualized Experiments. (91), e51554 (2014).
  59. Quah, B. J., Parish, C. R. The use of carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester (CFSE) to monitor lymphocyte proliferation. Journal of Visualized Experiments. (44), (2010).
  60. Gerdes, J. Ki-67 and other proliferation markers useful for immunohistological diagnostic and prognostic evaluations in human malignancies. Seminars in Cancer Biology. 1 (3), 199-206 (1990).
  61. JoVE Science Education Database. The Transwell Migration Assay. JoVE Science Education Database. , (2018).
  62. Lim, J. F., Berger, H., Su, I. H. Isolation and Activation of Murine Lymphocytes. Journal of Visualized Experiments. (116), e54596 (2016).
  63. Ungerechts, G., et al. Moving oncolytic viruses into the clinic: clinical-grade production, purification, and characterization of diverse oncolytic viruses. Molecular Therapy Methods & Clinical Development. 3, 16018 (2016).
  64. Fridman, W. H., Zitvogel, L., Sautes-Fridman, C., Kroemer, G. The immune contexture in cancer prognosis and treatment. Nature Reviews Clinical Oncology. 14 (12), 717-734 (2017).
  65. Yu, F., et al. T-cell engager-armed oncolytic vaccinia virus significantly enhances antitumor therapy. Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene Therapy. 22 (1), 102-111 (2014).
  66. Fajardo, C. A., et al. Oncolytic Adenoviral Delivery of an EGFR-Targeting T-cell Engager Improves Antitumor Efficacy. Ricerca sul cancro. 77 (8), 2052-2063 (2017).
  67. Freedman, J. D., et al. Oncolytic adenovirus expressing bispecific antibody targets T-cell cytotoxicity in cancer biopsies. EMBO Molecular Medicine. 9 (8), 1067-1087 (2017).
  68. Wing, A., et al. Improving CART-Cell Therapy of Solid Tumors with Oncolytic Virus-Driven Production of a Bispecific T-cell Engager. Cancer Immunology Research. 6 (5), 605-616 (2018).
  69. Myers, R. M., et al. Preclinical pharmacology and toxicology of intravenous MV-NIS, an oncolytic measles virus administered with or without cyclophosphamide. Clinical Pharmacology and Therapeutics. 82 (6), 700-710 (2007).
  70. Rittner, K., Schreiber, V., Erbs, P., Lusky, M. Targeting of adenovirus vectors carrying a tumor cell-specific peptide: in vitro and in vivo studies. Cancer Gene Therapy. 14 (5), 509-518 (2007).
  71. Nakamura, T., et al. Rescue and propagation of fully retargeted oncolytic measles viruses. Nature Biotechnology. 23 (2), 209-214 (2005).
  72. Campadelli-Fiume, G., et al. Retargeting Strategies for Oncolytic Herpes Simplex Viruses. Viruses. 8 (3), 63 (2016).
  73. Leber, M. F., et al. MicroRNA-sensitive oncolytic measles viruses for cancer-specific vector tropism. Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene Therapy. 19 (6), 1097-1106 (2011).
  74. Baertsch, M. A., et al. MicroRNA-mediated multi-tissue detargeting of oncolytic measles virus. Cancer Gene Therapy. 21 (9), 373-380 (2014).
  75. Ruiz, A. J., Russell, S. J. MicroRNAs and oncolytic viruses. Current Opinion in Virology. 13, 40-48 (2015).
  76. Miest, T. S., Cattaneo, R. New viruses for cancer therapy: meeting clinical needs. Nature Reviews Microbiology. 12 (1), 23-34 (2014).
  77. Phuong, L. K., et al. Use of a vaccine strain of measles virus genetically engineered to produce carcinoembryonic antigen as a novel therapeutic agent against glioblastoma multiforme. Ricerca sul cancro. 63 (10), 2462-2469 (2003).
  78. Dingli, D., et al. Image-guided radiovirotherapy for multiple myeloma using a recombinant measles virus expressing the thyroidal sodium iodide symporter. Blood. 103 (5), 1641-1646 (2004).
  79. Abate-Daga, D., et al. Oncolytic adenoviruses armed with thymidine kinase can be traced by PET imaging and show potent antitumoural effects by ganciclovir dosing. PLoS One. 6 (10), 26142 (2011).
  80. Ungerechts, G., et al. Lymphoma chemovirotherapy: CD20-targeted and convertase-armed measles virus can synergize with fludarabine. Ricerca sul cancro. 67 (22), 10939-10947 (2007).
  81. Ketzer, P., et al. Artificial riboswitches for gene expression and replication control of DNA and RNA viruses. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (5), 554-562 (2014).
  82. Freedman, J., et al. Targeting T-cells to human cancer associated fibroblasts using an oncolytic virus expressing a FAP-specific T-cell engager. Keystone Symposia & Digitell, Inc. , (2018).
  83. Nishio, N., et al. Armed oncolytic virus enhances immune functions of chimeric antigen receptor-modified T cells in solid tumors. Ricerca sul cancro. 74 (18), 5195-5205 (2014).
  84. Bressy, C., Benihoud, K. Association of oncolytic adenoviruses with chemotherapies: an overview and future directions. Biochemical Pharmacology. 90 (2), 97-106 (2014).
  85. Wennier, S. T., Liu, J., McFadden, G. Bugs and drugs: oncolytic virotherapy in combination with chemotherapy. Current Pharmaceutical Biotechnology. 13 (9), 1817-1833 (2012).
  86. Fillat, C., Maliandi, M. V., Mato-Berciano, A., Alemany, R. Combining oncolytic virotherapy and cytotoxic therapies to fight cancer. Current Pharmaceutical Design. 20 (42), 6513-6521 (2014).
  87. Li, H., Peng, K. W., Russell, S. J. Oncolytic measles virus encoding thyroidal sodium iodide symporter for squamous cell cancer of the head and neck radiovirotherapy. Human Gene Therapy. 23 (3), 295-301 (2012).
  88. Opyrchal, M., et al. Effective radiovirotherapy for malignant gliomas by using oncolytic measles virus strains encoding the sodium iodide symporter (MV-NIS). Human Gene Therapy. 23 (4), 419-427 (2012).
  89. Mansfield, D., et al. Oncolytic Vaccinia virus and radiotherapy in head and neck cancer. Oral Oncology. 49 (2), 108-118 (2013).
  90. Miest, T. S., et al. Envelope-chimeric entry-targeted measles virus escapes neutralization and achieves oncolysis. Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene Therapy. 19 (10), 1813-1820 (2011).
  91. Santiago, D. N., et al. Fighting Cancer with Mathematics and Viruses. Viruses. 9 (9), (2017).

Tags

Keywords: ParamyxovirusesTumor-targeted ImmunomodulationOncolytic VectorsReverse Genetic SystemMeasles VirusBispecific T Cell EngagerVirus PropagationSyncytia FormationVirus RescueTransfectionMV Producer CellsReporter Gene ExpressionVirus Harvest
check_url/it/58651?article_type=t

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Citazione di questo articolo
Heidbuechel, J. P., Engeland, C. E. Paramyxoviruses for Tumor-targeted Immunomodulation: Design and Evaluation Ex Vivo. J. Vis. Exp. (143), e58651, doi:10.3791/58651 (2019).
Scarica citazione
Ristampe e autorizzazioni

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image