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Articolo metodologico

Raccolta rapida di volatili di fragranze floreali utilizzando una tecnica di raccolta volatile Headspace per il campionamento della postura termica GC-MS

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DOI:

10.3791/58928

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10 dicembre 2019

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In questo articolo

Sommario

Qui, presentiamo un protocollo per raccogliere la fragranza floreale volatile dai fiori in fiore, utilizzando una procedura di campionamento non distruttivo.

Abstract

Sono state campionate le fragranze di molte famiglie di fiori e sono stati analizzati i volatili. Conoscere i composti che compongono le fragranze può essere un passo importante per la conservazione dei fiori che sono minacciati o in via di estinzione. Poiché la fragranza floreale è fondamentale per attirare gli impollinatori, questo metodo potrebbe essere utilizzato per comprendere meglio o addirittura migliorare l'impollinazione. Vi presentiamo un protocollo utilizzando un filtro ad aria a carbone portatile e un vuoto per raccogliere le sostanze volatili delle fragranze floreali, che vengono poi analizzate da un GC-MS. Utilizzando questo metodo, i volatili delle fragranze possono essere campionati utilizzando un metodo non distruttivo con una macchina che viene facilmente trasportata. Questa metodologia utilizza una procedura di campionamento rapido, riducendo il tempo di campionamento da 2-3 ore a circa 10 minuti. Utilizzando GC-MS, i composti della fragranza possono essere identificati singolarmente, sulla base di standard autentici. Vengono presentati i passaggi utilizzati per la raccolta dei dati relativi alle fragranze e al controllo, dall'impostazione del materiale alla raccolta dell'output dei dati.

Introduzione

I fiori producono tipicamente una fragranza utilizzata per attirare gli impollinatori. Queste fragranze sono costituite da molti composti chimici che agiscono tutti insieme come una miscela floreale1,2,3. Senza queste fragranze, i fiori sarebbero meno propensi a trasmettere le loro informazioni genetiche utilizzando impollinatori. La fragranza floreale è stata documentata in molte famiglie di piante da fiore, con Orchidaceae che è una delle famiglie più comuni studiate4. Per comprendere il ruolo della fragranza floreale nell'impollinazione, è ....

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Protocollo

NOTA: I profumi o le lozioni profumate e i prodotti non devono essere indossati durante nessuna di queste procedure.

1. Selezione dei fiori

NOTA: I fiori utilizzati possono essere naturalmente in crescita nell'ambiente o tenuti in condizioni ambientali artificiali. Temperatura, umidità e livello di luce durante la raccolta possono variare in base alle specie di fiori specifici utilizzate e al tipo di dati raccolti. Ad esempio, i dati sono stati raccolti durante il giorno e di notte per lo stesso fiore per determinare se la fragranza varia nel tempo del giorno e raccolti sia da in situ che da fiori in serra.

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Risultati

I dati rappresentativi del GC-MS sono mostrati come un cromatogramma nella figura 1. Oltre al cromatogramma, viene fornito anche un file di dati dei risultati (Supplementary File 1). Questo file di dati fornisce il tempo di conservazione per ogni picco (RT) e un'identificazione di quale composto è tale picco (Libreria/ID). I picchi tra le 10:00 e le 15:00 minuti sono volatili floreali, a causa del peso molecolare dei composti10. I numeri al di sopra d.......

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Discussione

Anche se questa tecnica è incredibilmente preziosa per la sua velocità di campionamento e portabilità, una limitazione è usarla per le specie epifite, o per quelle che crescono sugli alberi e non da terra. Nello studio originale10, uno dei fiori campionati era epifita. Poiché la macchina è troppo pesante per essere appesa liberamente, per il campionamento deve essere fatta una base stabile ed elevata. Inoltre, la macchina può essere collegata a una presa elettrica o a una batteria alimentata, quin.......

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Dichiarazioni

Gli autori non dichiarano conflitti di interesse.

Ringraziamenti

USDA-ARS Research Project numero 6036-22000-028-00D. L'uso di marchi commerciali, ditta o di società in questa pubblicazione è per le informazioni e la convenienza del lettore. Tale utilizzo non costituisce un'approvazione ufficiale o un'approvazione da parte del Dipartimento dell'Agricoltura degli Stati Uniti o del Servizio di Ricerca per l'Agricoltura di qualsiasi prodotto o servizio, ad esclusione di altri che possono essere adatti. Inoltre, il Dipartimento di Biologia dell'Università della Florida-Lewis e la borsa di studio Varina Vaughn in Orchid Biology (2017), e una borsa di ricerca di laurea dell'Università della Florida (2014-2018) ha fornito finanziamenti. R....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Raccordo paratiaCole-PalmerUX-06390-10
Tubo FEPCole-PalmerUX-06407-60
GascromatografiaHewlett Packard6890
Lana di vetro, silianizzataSigma-Aldrich20411
Rivestimento di ingressoAgilent5062-3587
Spettrometro di massaHewlett Packard5973
Reynolds sacchetto da fornoReynolds Consumer ProductsTurchia formato
Tenax polimero poroso adsorbenteSigma-Aldrich11982

Riferimenti

  1. Knudsen, J. T., Tollsten, L., Bergstrom, L. G. Floral scents- A checklist of volatile compounds isolated by head-space techniques. Phytochemistry. 33, 253-280 (1993).
  2. Dudareva, N. A., Pichersky, E. Biology of floral scent. , CRC Taylor and Francis. Boca Raton, FL. (2006).
  3. Altenburger, R., Matile, ....

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Ristampe e permessi

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