뎅기열 바이러스 유발 급성 바이러스 뇌염 같은 질병의 뮤린 모델
Summary
여기에서, 우리는 신경병의 발달을 표시하기 위하여 중추 신경계 감염의 면역적격 ICR (암 연구 연구소) 뮤린 모형을 만들기위한 프로토콜을 제시합니다. 동일한 질병 점수에 의한 급성 바이러스 성 뇌질환 모니터링은 생체 내에서 뎅기열 바이러스 유발 신경병증을 나타내는 데 수행될 수 있었다.
Abstract
뎅기열 바이러스 (DENV), 모기에 의해 전달 되는 절지 동물 매개 바이러스, 뎅기열 출혈열로 알려진 심각한 질병을 일으킬 수 있습니다., 플라즈마 누출으로 인해 치명적인 합병증을 특징으로 하는, 복수, 흉막 삼출액, 호흡 곤란, 심한 출혈, 장기 장애. DENV 감염의 몇 가지 경우는 신경 학적 증상을 제시; 그러나, 연구는 DENV 유도된 신경 병증을 더 탐구하지 않았습니다. 본 연구에서, 우리는 DENV를 가진 중추 신경계 (CNS) 감염의 유도를 조사하기 위한 면역 적격 outbred ICR (암 연구 연구소) 마우스를 사용하는 프로토콜을 제시하고, 급성 바이러스성 뇌염의 진행에 선행됩니다 질병.
Introduction
FLAviviridae 가족의 절지 동물 매개 바이러스 인 DENV는 3 개의 바이러스 구조 단백질 (캡시드, 전막 및 봉투)과 7 개의 바이러스 성 비 구조적 단백질 (NS1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B)을 암호화하는 양성 감각 RNA 게놈을 포함합니다. 및 NS5)를 참조하십시오. 매년 약 3억 9천만 명을 감염시키는 DENV(DENV1-4)의 4가지 혈청형은 정부가 모기 벡터 및질병 대조군 1을 향한 상당한 노력을 기울였음에도 불구하고 전 세계적인 부담을 야기한다. 현재, 보호 백신 및 치료 항 바이러스 약물은 개발중이며 추가적인 장기 검증이 필요합니다 2. 임상 사례에서, CNS 감염을 가진 뎅기열 환자는 드물더라도, 뎅기열 질병 발달의 다양성을 이해하기 위하여 더 탐구될 필요가있다3. 추가 조사 및 유효성 검사가 필요합니다. 특히, 세계보건기구(WHO)는 중증 뎅기열 3,4의분류에 인지 장애, 경련, 뇌병증 및 뇌염과 같은 CNS 장애의 참여를 포함하였다. DENV 감염의 동물 모델을 구축하는 것은 DENV 감염의 신경 병증을 탐구하는 데 필수적입니다.
DENV에 의한 CNS 감염을 생성하기 위해, 여러 연구는 (1) 적응되지 않은 DENV3 5의 4 x 103 플라크 형성 단위 (PFU)를 받은 C57BL/6 마우스의 내역 성 접종을 포함하여 DENV 감염의 다른 경로를 실행했습니다. 6,(2) 생체외 신경적응 DENV47,(3) 생체 내 신경 적응 DENV1 8의 1 x 105 PFU를 받은 스위스 마우스의 자궁 내 내 접종을 받은 BALB/c마우스의 복강 내 접종 적응되지 않은 DENV29의1 x 106 PFU를 받은 ICR 빨기 마우스의 인내뇌및 복강 내 공동 접종. 이러한 연구의 결과에 따르면5,6,7,8,9,DENV 감염은 뇌에서 바이러스 복제를 초래하여 급성 바이러스성으로 이어진다. 뇌염과 같은 증후군, 사지 마비와 자세 불안정을 동반 행동 변화, CNS 신경 독성 및 염증, 혈액 – 뇌 장벽을 통해 일반 및 국소 혈장 누출 (BBB), 및 치사. 이러한 연구의 모든결과 5,6,7,8, 9는 DENV가 CNS를 감염시키고 급성 바이러스성 뇌염과 같은 유도를 하는 능력을 보여주었다. 감염 다음 질병.
우리의 현재 사실인정에 근거하여 9,10,11,12,13,14,15,우리는 생체 내로 DENV 감염의 뮤린 모형을 만들었습니다 바이러스 복제에 대한 표적 제제 / 요인의 치료 효능뿐만 아니라 신경 독성을 검사하는 플랫폼. 여기에서, 우리는 CNS 감염을 공부하고 DENV에 기인한 다른 경벌을 가진 신경병의 발달을 감시하기 위하여 면역적격 outbred ICR 마우스를 만들기 위하여 이용된 프로토콜을 보고합니다. 결과는 DENV 감염마우스에서 뇌염과 같은 질병의 유의한 진행을 시간 의존적인 방식으로 보여준다.
Protocol
Representative Results
Discussion
DENV 감염은 중증 뎅기열 환자3,17의CNS에서 검출되었으며, 뎅기열 병인 동안 급성 바이러스 성 뇌염의 발현 가능성을 시사한다. 여기에서, 우리는 가혹한 뎅기열에 있는 CNS 역기능의 관련을 공부를 위한 DENV 감염의 생체 내 murine 모형을 보고합니다, 특히 DENV 유도한 심각한 바이러스성 뇌염 같이 질병에 초점으로. 이전 모델과 비교하여, 특히 단일 경로 감?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 과학기술부(MOST107-2321-B-038-001)의 보조금과 대만 타이베이의 교내 기금 106TMU-CIT-01-2의 보조금으로 지원되었습니다.
Materials
| Roswell Park Memorial Institute 1640 medium (RPMI) | Gibco | 11875-085 | Diluting virus |
| 0.3-mL Insulin Syringe | BD Ultra-FineII | 328838 | Intracerebral and intraperitoneal injection |
| Microbalance | METTLER TOLEDO's LabX | AL104 | Weight mouse |
| Non-adapted DENV2 (strain PL046) | The Centers for Disease Control of Taiwan | – | Infect mouse |
| Institute of Cancer Research (ICR) suckling mouse | BioLASCO Taiwan Co., Ltd | – | Our murine model |
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