نقدم هنا طريقة استنساخه لوضع نموذج أورثوتوبيك مورين من الخلايا الحرشفية الرأس والرقبة. أورام تظهر ميزات نسيجية ذات الصلة سريرياً للمرض، بما في ذلك نخر، والتمايز الفقراء، الانبثاث العقدي، ومحصنة ضد تسلل. الفئران الحاملة للورم أعراض ذات الصلة سريرياً بما في ذلك عسر البلع، والتشريد الفك، وفقدان الوزن.
الرأس والعنق الخلايا الحرشفية (HNSCC) مرض المدمرة والفتاكة ذات انتشار المرتفع للتكرار وفشل العلاج. لوضع استراتيجيات علاجية أفضل، المهم فهم الورم ميكرونفيرونمينتال العوامل التي تسهم في مقاومة العلاج. يكن عائقا رئيسيا لفهم آليات المرض وتحسين العلاج من خطوط الخلايا مورين التي تشبه الطابع العدواني والمنتشر من هنسككس البشرية. وعلاوة على ذلك، تستخدم غالبية نماذج موريني عللها تحت الجلد من الأورام التي تفتقر إلى السمات الفسيولوجية الهامة لمنطقة الرأس والرقبة، بما في ذلك كثافة الأوعية الدموية والمفرج اللمفاوية واسعة الفلورا المخاطية. والغرض من هذه الدراسة هو تطوير وتميز طراز أورثوتوبيك من هنسكك. نحن نوظف سطرين خلية موريني متميزة وراثيا وأورام ثابتة في الغشاء المخاطي الشدقى للفئران. كنا تحسين أساليب الهضم الورم كولاجيناز القائم لاستعادة الخلايا المفردة الأمثل من الأورام ثابتة. وتظهر البيانات المقدمة هنا أن الفئران تطوير أورام فاسكولاريزيد العالية التي السرطاني إلى الغدد الليمفاوية الإقليمية. ويبين تحليل الخلوي الشامل مولتيباراميتريك خلية واحدة وجود السكان المناعية المتنوعة مع خلايا النقوي يمثلون أغلبية جميع الخلايا المناعية. النموذج المقترح في هذه الدراسة لها تطبيقات في بيولوجيا السرطان وورم في علم المناعة الإكلينيكية تطوير علاجات جديدة. شبه الطراز أورثوتوبيك إلى المظاهر السريرية للمرض البشري سوف توفر أداة للترجمة المحسنة، وتحسين نتائج المرضى.
HNSCC خبيثة الخامس الأكثر شيوعاً على الصعيد العالمي، مع ما يزيد على 600,000 المرضى تشخيص سنوياً1. على الرغم من المعاملة العدوانية التي تنطوي على العلاج الكيميائي والعلاج الإشعاعي (RT)، يظل معدل البقاء على قيد الحياة (نظام التشغيل) للمرضى الذين هنسكك دون الإصابة بفيروس الورم الحليمي البشري (فيروس الورم الحليمي البشري) أقل من 50% بعد 5 سنوات2. وهذا يعزى إلى حد كبير إلى معقدة للغاية وورم المكروية كما يمكن أن تنشأ أورام من عدة مواقع تشريحية متميزة داخل منطقة الرأس والرقبة، بما في ذلك الغشاء المخاطي الشدقى، اللسان، الكلمة من الفم، وجوف الآنف، تجويف الفم، البلعوم، بلعوم فموي، وهيبوفارينكس. وبالإضافة إلى ذلك، منطقة الرأس والعنق هو فاسكولاريزيد عالية ويحتوي على ما يقرب من نصف جميع الغدد الليمفاوية في الجسم3. معظم الدراسات التحقيق في البيولوجيا ورم في الرأس والرقبة تعتمد على نماذج ورم في منطقة الجناح. هذه النماذج يمكن أن توفر نظرة ثاقبة آليات الورم الجوهرية، ولكن عدم المكروية الرأس والرقبة الأصلي يمكن أن يؤثر بشكل ملحوظ إمكانات متعدية الجنسيات مثل هذه النتائج. أسلوب واحد التي تم استخدامها للحث على أورام الفم من خلال التعرض لمادة مسرطنة 9 و 10-ثنائي ميثيل-1، 2-بينزانثراسيني (دمبا)4. ومع ذلك، هذا الأسلوب يرتبط بعملية طويلة، يدفع الأورام في الفئران والهامستر ولكن ليس في الفئران، والأورام الناتجة عن ذلك لا تملك العديد من الميزات نسيجية متمايزة SCCs5،6. إدخال carcinogen4-نيتروكوينوليني 1-أكسيد (4-نقو)، مشتق كوينولوني للذوبان في الماء، أدت إلى أورام الفم الماوس عند تطبيق شفويا لكنها تعاني أيضا من التعرض لأوقات طويلة (16 أسبوعا) ومحدودة تأخذ معدل داخل وفيما بين المجموعات من الفئران7،،من89. عدة مجموعات من أجل وضع النماذج ذات الصلة سريرياً، استخدام نماذج المهندسة وراثيا التي تنطوي على التلاعب بسائق المسرطنة أو ورم المكثف الجينات، بما في ذلك TP53، تجفب، كراس، HRAS، و SMAD410. هذه النماذج يمكن أن توفر نظرة ثاقبة الأورام مع الجينات المعروفة سائق ولكن لا الخص تباين هنسككس البشرية المعقدة.
في هذا العمل، ونحن تثبت جدوى القيام تلقيح خلايا الخلايا الحرشفية إينتراموكوسال في الفئران. خلايا الملقحين تتطور إلى أورام عدوانية خلال أسبوع واحد من الحقن. شبيه هنسككس البشرية، الأورام السرطاني إلى الغدد الليمفاوية الإقليمية. نحن توصيف السمات غذائها والسريرية للمرض وتوفير نظرة ثاقبة وورم المكروية محصنة. ونحن نقترح أن هذا النموذج أورثوتوبيك من هنسكك له تطبيقات في بيولوجيا السرطان وورم في علم المناعة، والدراسات السريرية. آليات للتهرب من الحصانة وتطور الورم ومقاومة العلاج والانبثاث تمثل المجالات ذات الأهمية السريرية التي يمكن معالجتها باستخدام النموذج المقترح.
تحليل دقيق وتوصيف وورم المكروية يمثل استراتيجية هامة لفهم آليات التنمية الورم والتدرج، والانبثاث ولتطوير علاجات فعالة. سرطان الرأس والعنق هو أمراض معقدة التي يمكن أن تنشأ من عدة مواقع التشريحية داخل منطقة الرأس والرقبة. يكن عائقا رئيسيا لفهم آليات المرض وتحسين العلاج من خطوط الخلايا الم…
The authors have nothing to disclose.
لا شيء
Collagenase III | Worthington Biochemical Corp. | LS004183 | |
DNase I | Worthington Biochemical Corp. | LS006328 | |
Fc Block (CD16/32) | BD Biosciences | 553141 | Clone 2.4G2 |
Flow Cytometry Staining Buffer | eBioscience | 00-4222-26 | |
HBSS | ThermoFisher Scientific | 14175079 | no calcium, no magnesium, no pheno red |
Helois mass cytometer | Fluidigm | NA | |
Matrigel membrane matrix | Corning | CB-40234B | |
MRI Scanner | Bruker | NA | 7.4 Tesla |
RBC lysis buffer | BioLegend | 420301 | |
Trypsin inhibitor | Worthington Biochemical Corp. | LS002830 |