研究小鼠创伤性脑损伤后凯库姆微生物群的改动
Summary
这里介绍的是一种使用横向流体打击装置诱导弥漫性创伤性脑损伤的协议，然后收集胆囊成分进行肠道微生物群落分析。
Abstract
越来越多的证据表明，微生物-胃脑轴在脑疾病的发病机制中起着重要的作用。几项研究还表明，创伤性脑损伤导致肠道微生物群的变化。然而，大脑-肠轴的双向调节背后的机制仍然未知。目前，研究创伤性脑损伤后肠道微生物群变化的模型很少。因此，提出的研究结合了利用横向流体打击装置诱导创伤性脑损伤的规程，并分析损伤后的卡库姆样本，以研究肠道微生物群的改变。创伤性脑损伤后肠道微生物群的改变使用16S-rDNA测序确定。本方案为研究肠道微生物与创伤性脑损伤的关系提供了一种有效的方法。
Introduction
创伤性脑损伤（TBI）是一个全球性的公共卫生问题，是青少年死亡和残疾的主要原因。TBI每年导致许多死亡，幸存者经历各种身体、精神、情感和认知障碍。因此，TBI 是患者家庭和社会资源的沉重负担。TBI 既包括创伤时发生的原发性脑损伤，也涉及在最初受伤后数小时至数月出现的任何继发性脑损伤。继发性脑损伤由几个生化级联介，不仅对大脑有害，而且对各种器官系统，包括胃肠道系统3有显著的负面影响。
目前，动物实验中诱导TBI的模型有三种：流体撞击损伤、控制皮质冲击（CCI）和降压加速度。横向流体打击损伤（LFPI）是建立扩散性脑损伤（DAI）最常用的模型4。该设备通过颅骨切除术对完好的杜拉施加短暂的流体压力脉冲来产生脑损伤。此脉冲由钟摆的敲击产生。LFPI是TBI研究的一种可重复、可控的建模方法。
微生物群被定义为存在于人体中的所有微生物的集体基因组。特别是肠道微生物不仅在肠道平衡和功能中起着重要作用，而且调节宿主生理和其他器官功能的许多方面。近年来，越来越多的证据表明，肠道微生物群通过脑-肠轴6调节大脑发育和功能。肠道微生物群的中断与几个大脑功能障碍有关，包括帕金森病、情绪障碍和自闭症7。最近，临床前研究也报道，急性脑损伤可诱发肠道微生物群8、9的变化。
Treangen等人10年的一项研究发现，在CCI诱导的TBI之后，三种微生物物种明显减少，两种微生物物种增加。这一证据表明，肠道微生物群的调制可能是TBI管理的一种治疗方法。然而，脑损伤引起的肠道微生物群变化背后的机制仍然未知。因此，需要一个相对简单有效的模型来研究TBI后肠道微生物群的变化。因此，本研究提出了一种检查小鼠TBI后肠道微生物群变化的协议。
Protocol
Representative Results
Discussion
这里介绍的是一个简单而有效的协议，用于确定小鼠TBI后头亚微生物群的变化。脑损伤的诱导和采集的囊中内容样本是协议的关键部分。
尽管研究人员研究了TBI后肠道微生物群的变化，但这些研究中使用的脑损伤是CCI-8和体重下降/撞击引起的模型9。然而，CCI模型主要复制脑挫伤，而降重模型可能会受到一些不准确的影响。在现有的脑损伤?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
作者没有什么可透露的。
Materials
| DNA isolation kit | QIAGEN | 51604 | For fast purification of genomic DNA from stool samples |
| Gene analysis service | GENEWIZ | Gene analyse service | |
| Heating pad | Shanghai SAFE Biotech Co. | TR-200 | heating pad |
| Injector | The First Affiliated Hospital, School of Medicine, Zhejiang University | injector | |
| LFPI device | Virginia Commonwealth University |
FP302 | LFPI device |
| Micro cranial drill | RWD Life Science | 78061 | Micro cranial drill |
| Povidone Iodine | The First Affiliated Hospital, School of Medicine, Zhejiang University | Povidone Iodine |
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