쥐에서 외상성 뇌 손상 후 Caecum Microbiota에서 변경 을 조사
Summary
여기에 제시된 프로토콜은 직감 미생물군유전체 분석을 위한 케이쿰 함량의 수집에 이어 측면 유체 타악기 장치를 사용하여 확산 외상성 뇌 손상을 유도하는 프로토콜이다.
Abstract
증가하는 기록은 microbiota 창자 두뇌 축이 뇌 질환의 병인에 있는 중요한 역할을 한다는 것을 보여줍니다. 여러 연구는 또한 외상성 뇌 손상 창 자 microbiota에 변화를 일으킬 보여줍니다. 그러나, 두뇌 창 자 축의 양방향 조절 기본 메커니즘 알 수 없는 남아. 현재, 몇몇 모형은 외상성 두뇌 상해 후에 창자 microbiota에 있는 변경을 공부를 위해 존재합니다. 따라서, 제시된 연구 결과는 직감 microbiome에 있는 변경을 조사하기 위한 상해 다음 의 외액 타악기 장치 및 caecum 견본의 분석을 사용하여 외상성 뇌 손상을 유도하기 위한 프로토콜을 결합합니다. 외상성 뇌 손상 후 창 자 microbiota 조성물의 변경 16S-rDNA 시퀀싱을 사용 하 여 결정 됩니다. 이 프로토콜은 장내 미생물과 외상성 뇌 손상 사이의 관계를 연구하기위한 효과적인 방법을 제공합니다.
Introduction
외상성 뇌 손상 (TBI)은 글로벌 공중 보건 문제이며 젊은 성인의 사망과 장애의 주요 원인1,2. TBI는 매년 많은 죽음을 일으키고, 생존자는 신체적, 정신적, 정서적, 인지 적 장애의 다양한 경험. 따라서 TBI는 환자의 가족 및 사회 자원에 무거운 부담입니다. TBI는 외상의 시간에 발생하는 기본 뇌 손상과 초기 부상 다음 달에 시간을 개발하는 보조 뇌 손상을 모두 포함한다. 이차 뇌 손상은 여러 생화학 적 캐스케이드에 의해 매개되며, 이는 뇌에 해로울뿐만 아니라 위장 시스템을 포함한 다양한 장기 시스템에 상당한 부정적인 영향을 미칩니다3.
현재 동물 실험에서 TBI를 유도하는 세 가지 모델이 있습니다: 유체 타악기 손상, 대조피질 충격(CCI), 체중 감소 가속. 측면 유체 타악기 손상 (LFPI)은 확산 뇌 손상 (DAI)를 확립하기 위해 가장 일반적으로 사용되는모델4. 이 장치는 손상되지 않은 경도에 짧은 유체 압력 펄스를 적용하여 두개골 절제술을 통해 뇌 손상을 일으킵니다. 이 펄스는 진자의 파업에 의해 생성됩니다. LFPI는 TBI 연구를 위한 재현 가능하고 제어 가능한 모델링 방법입니다.
미생물군유전체는 인체에 있는 모든 미생물의 집단 게놈으로 정의됩니다. 특히 장내 미생물은 장 항상성 및 기능에 중요한 역할을 할뿐만 아니라 숙주 생리학및 다른 장기의 기능의 많은 측면을 조절합니다5. 최근 몇 년 동안, 창 자 microbiota 뇌-창 자 축을 통해 뇌 개발 및 기능을 조절 하는 것을 나타내는 증가 증거가 있다6. 창 자 microbiota의 중단 파 킨 슨 병을 포함 하 여 여러 뇌 기능 장애에 연결 되었습니다., 기분 장애, 그리고 자폐증7. 최근, 전임상 연구는 또한 급성 뇌 손상이 장내 미생물의 변화를 유도할 수 있다고보고8,9.
Treangen외. 10 에 의해 연구 발견 3 미생물 종에서 상당한 감소를 발견 하 고 CCI 유도 된 TBI 후 두 개의 미생물 종에서 증가. 이 증거는 창 자 microbiota의 변조 TBI 관리에 치료 방법 수 있습니다 나타냅니다. 그러나, 뇌 손상 유도 창 자 microbiota 변경 기본 메커니즘 알 수 없는 남아. 이러한 이유로, TBI 가 필요한 후 창 자 microbiota에 변화를 공부의 상대적으로 간단 하 고 효율적인 모델. 따라서, 본 연구는 마우스에서 TBI 후 창 자 microbiota에 변화를 검사 하는 프로토콜을 제시 한다.
Protocol
Representative Results
Discussion
여기에 제시된 것은 마우스에서 TBI 후에 세칼 미생물의 변화를 결정하는 간단하고 효율적인 프로토콜이다. 뇌 손상의 유도 및 caecum 내용 샘플의 수집은 프로토콜의 중요한 부분입니다.
연구원이 TBI를 따르는 창자 microbiota의 변경을 공부한 에도 불구하고, 이 연구 결과에 사용된 두뇌 상해는 CCI-8 및 무게 투하/충격 유도한 모형9이었습니다. …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 공개 할 것이 없다.
Materials
| DNA isolation kit | QIAGEN | 51604 | For fast purification of genomic DNA from stool samples |
| Gene analysis service | GENEWIZ | Gene analyse service | |
| Heating pad | Shanghai SAFE Biotech Co. | TR-200 | heating pad |
| Injector | The First Affiliated Hospital, School of Medicine, Zhejiang University | injector | |
| LFPI device | Virginia Commonwealth University |
FP302 | LFPI device |
| Micro cranial drill | RWD Life Science | 78061 | Micro cranial drill |
| Povidone Iodine | The First Affiliated Hospital, School of Medicine, Zhejiang University | Povidone Iodine |
Riferimenti
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