Exame ecocardiográfico transtorácico no modelo coelho

Summary

Aqui nós descrevemos, passo a passo, um protocolo detalhado para realizar a Ecocardiografia no modelo do coelho. Nós mostramos como obter corretamente as diferentes visões ecocardiográficas e planos de imagem, bem como os diferentes modos de imagem disponíveis em um sistema de ecocardiografia clínica rotineiramente usado em pacientes humanos e veterinários.

Abstract

Grandes modelos animais como o coelho são valiosos para a pesquisa pré-clínica translacional. Os coelhos têm uma electrofisiologia cardíaca similar comparada àquela dos seres humanos e daquele de outros modelos animais grandes tais como cães e porcos. Entretanto, o modelo do coelho tem a vantagem adicional de uns mais baixos custos de manutenção comparados a outros grandes modelos animais. A avaliação longitudinal da função cardíaca utilizando a Ecocardiografia, quando adequadamente implementada, é uma metodologia útil para avaliação pré-clínica de novas terapias para insuficiência cardíaca com fração de ejeção reduzida (por exemplo, regeneração cardíaca). O uso correto dessa ferramenta não invasiva requer a implementação de um protocolo de exame padronizado seguindo as diretrizes internacionais. Aqui descrevemos, passo a passo, um protocolo detalhado supervisionado por cardiologistas veterinários para a realização de ecocardiografia no modelo do coelho, e demonstrar como obter corretamente as diferentes visões ecocardiográficas e planos de imagem, bem como a diferentes modos de imagem disponíveis em um sistema de ecocardiografia clínica rotineiramente usado em pacientes humanos e veterinários.

Introduction

A avaliação longitudinal da função cardíaca em grandes modelos animais é uma metodologia de pesquisa robusta comumente utilizada para a avaliação dos efeitos de novas terapias para o tratamento da cardiomiopatia isquêmica e não isquêmica. Entre as várias técnicas de imagem cardiovascular disponíveis para pesquisa pré-clínica, a Ecocardiografia tem sido amplamente utilizada devido às suas características não invasivas e portáteis. Em mãos experientes, a Ecocardiografia também é uma técnica de imagem muito reprodutível para estudar a anatomia cardíaca, bem como a função sistólica e diastólica do coração.

Grandes modelos animais pré-clínicos, como suínos, cães e coelhos, são fundamentais para a pesquisa translacional pré-clínica^1,2,3. De fato, o potencial benefício de novas terapias como a medicina regenerativa cardíaca no cenário da cardiomiopatia requer testes de hipóteses extensivos em grandes modelos pré-clínicos antes que possam ser considerados para uso humano^2,4 . Comparado a outros grandes modelos pré-clínicos, o modelo do coelho oferece algumas vantagens, incluindo seu baixo custo de manutenção, que é comparável àquele dos ratos e dos ratos. No entanto, em contraste com camundongos e ratos, o sistema de transporte CA^{+ 2} e a eletrofisiologia cardíaca são semelhantes em coelhos como os dos seres humanos, e os de outros grandes modelos animais, como cães e suínos, aumentando assim o potencial translacional do coelho modelo^1,5. Portanto, o coelho, como um grande modelo pré-clínico experimental, tem um excepcional equilíbrio de custo e reprodutibilidade para a pesquisa translacional pré-clínica.

O coelho tem o benefício adicional de sua receptividade para a imagem latente ecocardiográfica usando as unidades clínicas do ultra-som usadas rotineiramente em pacientes humanos e veterinários, assim aproveitando-se da superioridade da imagem latente harmônica e da estado—arte Tecnologia. Para isso, são preferidos os transdutores setoriais (também conhecidos como matriz de fase) de frequência relativamente alta (até 12 MHz), como os utilizados na Cardiologia neonatal/pediátrica. A examinação ecocardiográfica no modelo pré-clínico do coelho permite a avaliação completa da função sistólica e diastólica usando vistas múltiplas e modalidades diferentes disponíveis em unidades ecocardiográficas modernas (por exemplo. Doppler contínuo da onda (CWD), Doppler de onda pulsada (PWD) e imagem Doppler tecidual (TDI)).

A Ecocardiografia é uma técnica dependente do operador e, portanto, requer treinamento extensivo e conhecimento central da técnica de acordo com as diretrizes internacionais. Parte deste treinamento pode ser facilitada com a visualização de vídeos explicando detalhadamente como diferentes visões ecocardiográficas podem ser obtidas. A conquista de alta competência na imagem ecocardiográfica, bem como o desenvolvimento de um protocolo padronizado e a técnica correta, são essenciais para minimizar a influência do operador e gerar dados quantitativos confiáveis, conforme exigido em rigorosos investigação científica.

Algumas considerações são necessárias em relação à configuração do sistema e do laboratório utilizada para ecocardiografia em coelhos e outros grandes modelos animais. Para uma avaliação ecocardiográfica transtorácica padrão da função cardíaca, o sistema de ultra-som deve incluir as seguintes modalidades: modo bidimensional (modo B ou 2D), modo de movimento (modo M), Doppler colorido, bem como CWD, PWD e TDI. Além disso, a máquina deve ter análise cardíaca completa e software de medição instalado, bem como espaço suficiente no disco rígido interno para armazenar imagens digitais de alta qualidade e loops de vídeo suficientes para análise offline. Alguns sistemas usam transdutores de matriz linear; no entanto, para a melhor imagem do coração, Transdutores de setor phased array com um pequeno diâmetro da cabeça de digitalização são preferidos, porque estes permitem uma passagem mais fácil das ondas de ultra-som através dos espaços intercostais estreitos. Para coelhos, utilizamos transdutores de frequência relativamente alta (até 12 MHz). A posição do animal para a imagem latente é da importância máxima para adquirir imagens da boa qualidade. Assim, as posições recumbentes laterais direita e esquerda são recomendadas para obter todos os planos de imagem padrão durante um exame ecocardiográfico. Para isso, é aconselhável uma tabela com um entalhe que coincida com a área cardíaca do tórax (Figura 1a). Esta tabela entalhado facilita o acesso com o transdutor à área da caixa que será escaneada, e permite conseqüentemente a mobilidade livre da mão do Whist do operador que mantém a melhor posição da exploração do animal. Posicionar o animal em uma posição Recumbent lateral conduz a uma queda do coração para o transdutor e a elevação dos pulmões, assim como o alargamento da janela de acesso do feixe do ultra-som através dos espaços intercostais, assim melhorando a imagem latente total qualidade (Figura 1a). O exame ecocardiográfico deve ser realizado de forma cega e seguindo as diretrizes do Comitê de ecocardiografia do colégio americano de medicina interna veterinária e da sociedade americana de ecocardiografia/European Associação para a imagem latente cardiovascular^6,7,8.

Parte de nossa equipe científica está associada ao serviço de Cardiologia de um hospital veterinário de ensino que atende diariamente a pacientes veterinários (por exemplo, cães e gatos), para os quais tem a formação e acreditação relevantes em Cardiologia veterinária e Ecocardiografia, e suas modalidades diferentes da imagem latente, assim como a experiência extensiva em tamanhos diferentes da imagem latente de pacientes animais e de conformações torácicas com esta técnica. Além disso, comumente utilizamos ecocardiografia para avaliação longitudinal da função cardíaca em modelo de coelho de cardiomiopatia induzida por antraciclinas⁹. Aqui, nós descrevemos um protocolo passo a passo da ecocardiografia para a avaliação da função cardíaca usando uma unidade clínica do ultra-som em um grande modelo pré-clínico tal como o coelho. Este protocolo é adaptado para as diretrizes internacionais atuais⁸, e inclui recomendações práticas baseadas em nossas próprias experiências em configurações clínicas e experimentais.

Protocol

Os experimentos aqui descritos foram aprovados pelo Comitê de ética em pesquisa da Universidade de Múrcia, Espanha, e foram realizados em conformidade com a diretiva 2010/63/UE da Comissão Europeia. Os passos descritos foram realizados protocolos operacionais padrão que faziam parte do plano de trabalho e não foram realizados unicamente com o objetivo de filmar o vídeo que acompanha este artigo. 1. preparação do coelho Antes de prosseguir, comece por injetar uma combinação…

Representative Results

Opinião longa do eixo do parasternal do coração A Figura 5a mostra um plano de imagem da visão pslax direita, onde as 4 câmaras do coração são claramente distinguidas. Pode-se identificar nesta visão o ventrículo direito (VD), a valva tricúspide (TV), o IVS, o ve, o FW, bem como a valva mitral (VM). Quando o ápice é claramente visível no lado esquerdo da imagem nesta v…

Discussion

Nós descrevemos um protocolo para a examinação ecocardiográfica de parâmetros da função cardíaca no coelho, representando um grande modelo pré-clínico^1,2,3. A metodologia passo a passo aqui descrita deve ser considerada como orientação, que com um estudo complementar dos princípios básicos da Ecocardiografia, e um conhecimento básico da ultrassonografia, ajudará o pesquisador a obter, através da prática e orien…

Materials

Bluesensor	Medicotest	13BY1062	Disposable adhesive ECG lectrodes
Domtor (Medetomidine)	Esteve	CN 570686.3	Veterinary prescription is necessary
HD11 XE Ultrasound System	Philips	10670267	Echocardiography system.
Heating Pad	Solac	CT8632
Imalgene (Ketamine)	Merial	RN 9767	Veterinary prescription is necessary
Omnifix-F 1 ml syringe	Braun	9161406V
S12-4	Philips	B01YgG	4-12 MHz phase array transducer
Ultrasound Transmision Gel (Aquasone)	Parker laboratories Inc.	N 01-08