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ヒト多能性幹細胞におけるCRISPR-CAS9を用いて定義されたゲノム修飾の生成

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Generation of Defined Genomic Modifications Using CRISPR-CAS9 in Human Pluripotent Stem Cells

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ヒト多能性幹細胞におけるCRISPR-CAS9を用いて定義されたゲノム修飾の生成

DOI:

10.3791/60085-v

•

09:04 min

•

September 25, 2019

•

Fabian L. Cardenas-Diaz*¹, Jean Ann Maguire*¹, Paul Gadue^2,3, Deborah L. French^2,3

¹Center for Cellular and Molecular Therapeutics,The Children’s Hospital of Philadelphia, ²Department of Pathology and Laboratory Medicine,The Children’s Hospital of Philadelphia, ³Department of Pathology and Laboratory Medicine,University of Pennsylvania

Chapters

00:04Title
01:19Test gRNA (GuidE RNA) Cutting Efficiency
03:50Clone Screening
04:51Transfection Setup
06:07Checking for Mutations in Single Colonies
07:11Results: Cutting Efficiency, and Generation and Screening of Mutations
08:10Conclusion

Summary

Automatic Translation

このプロトコルは、ヒト多能性幹細胞におけるCRISPR-CAS9を用いて定義されたヘテロ接合性またはホモ接合ヌクレオチド変化の生成を容易にする方法を提供する。

Tags

CRISPR-Cas9 Human Pluripotent Stem Cells Isogenic Lines Heterozygous Mutations Gene Function Disease Modeling Colony Picking Fluorescence-activated Cell Sorting MEFs ROCK Inhibitor

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