تقييم الأورام الدموية الغازية لنظام البطين الأيمن وفرط ضغط الدم الرئوي الناجم عن نقص الأكسجين في الفئران
Summary
هنا ، نقدم بروتوكولا لاجراء تقييم الدموية الغازية من البطين الأيمن والشريان الرئوي في الفئران باستخدام نهج جراحه الصدر المفتوح.
Abstract
فرط ضغط الدم الشرياني الرئوي هو اضطراب مزمن وحاد في القلب. الفئران هي نموذج الحيوانية شعبيه تستخدم لتقليد هذا المرض. ومع ذلك ، يبقي تقييم ضغط البطين الأيمن (RVP) وضغط الشريان الرئوي (PAP) صعبا من الناحية التقنية في الفئران. ومن الصعب قياس RVP و PAP من ضغط البطين الأيسر بسبب الاختلافات التشريحية بين أنظمه القلب الأيمن والأيسر. في هذه الورقة ، نقوم بوصف طريقه القياس الديناميكية للقلب الأيمن المستقرة والتحقق من صحتها باستخدام الفئران الصحية والسليمة. ويستند هذا الأسلوب علي جراحه الصدر المفتوح ودعم التهوية الميكانيكية. وهو اجراء معقد بالمقارنة مع إجراءات الصدر المغلقة. في حين مطلوب جراح مدرب تدريبا جيدا لهذه الجراحة ، وميزه هذا الاجراء هو انه يمكن ان تولد كلا RVP و PAP المعلمات في نفس الوقت ، لذلك هو الاجراء الأفضل لتقييم نماذج الهيئة الخاصة بالهيئة.
Introduction
فرط ضغط الدم الشرياني الرئوي هو اضطراب مزمن وحاد في القلب مع ارتفاع في ضغط الشريان الرئوي (PAP) وضغط البطين الأيمن (RVP) الناجم عن الانتشار الخلوي وتليف الشرايين الرئوية الصغيرة 1. القسطرة الشريان الرئوي ، وتسمي أيضا القسطرة سوان-Ganz2، وتستخدم عاده في الرصد السريري لل RVP و PAP. وعلاوة علي ذلك ، تم استخدام نظام مراقبه عنق الرحم لاسلكيه سريريا3،4،5. لتقليد هذا المرض للدراسة في الفئران ، يتم استخدام بيئة نقص الأكسجين لمحاكاة المظاهر السريرية البشرية لل بي6. في تقييم PAP في الحيوانية ، والحيوانية الكبيرة من السهل نسبيا لرصد من خلال قسطرة الشريان الرئوي باستخدام نفس الأسلوب كما للمواد البشرية ، ولكن الكائنات الصغيرة مثل الفئران والفئران من الصعب تقييم بسبب حجم الجسم الصغيرة. القياس الحركي للنظام البطيني الأيمن في الفئران هو ممكن مع الموجات فوق الصوتية حجم 1 Fr القسطرة7. وقد تم الإبلاغ عن طريقه لقياس rvp و PAP في الفئران في الأدب8,9, ولكن المنهجية تفتقر إلى وصف مفصل. RVP و PAP هي أكثر تحديا لقياس من الضغط البطين الأيسر بسبب الاختلافات التشريحية بين أنظمه القلب الأيمن والأيسر.
للحصول علي كل من المعلمات PAP و RVP في نفس الماوس ، ونحن وصف النهج القائم علي الجراحة في الصدر المفتوح لقياسات القلب السليم الحركية ، والتحقق من صحة مع الفئران الصحية والصحة العامة ، وكيفيه تجنب توليد البيانات الاصطناعية خلال معقده مفتوحة الصدر جراحه. علي الرغم من ان هذا الأسلوب هو أفضل أداء من قبل جراح مدرب تدريبا جيدا ، لديه ميزه القدرة علي تقييم PAP و RVP في نفس الماوس.
Protocol
Representative Results
Discussion
التنبيب الرغامي هو الخطوة الهامه الاولي لعمليات جراحيه في الصدر المفتوح. الطريقة الكلاسيكية للتنبيب الرغامي للحيوانات الصغيرة ، مثل الفئران أو الفئران ، ينطوي علي اجراء شق علي شكل حرف T علي القصبة الهوائية وادراج مباشره أنابيب الرغامي من النوع Y في القصبة الهوائية. في الممارسة العملية ، ن…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ويدعم هذا البحث مشروع التعليم العالي وإصلاح التدريس في كليه الطب التابعة لاتحاد بكين (10023-2016-002-03) ، وصندوق الشباب في مستشفي فواي (2018-F09) ، وصندوق مدير مختبر بكين الرئيسي للبحوث السابقة لاكلينيكيه تقييم لمواد زرع القلب والاوعيه الدموية (2018-PT2-ZR05).
Materials
| 2,2,2-Tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-5G | For anesthesia |
| Animal temperature controller | Physitemp Instruments, Inc. | TCAT-2LV | For temperature control |
| Dissection forceps | Fine Science Tools, Inc. | 11274-20 | For surgery |
| Gemini Cautery System | Gemini | GEM 5917 | For surgery |
| Intravenous catheter (22G) | BD angiocath | 381123 | For intubation |
| LabChart 7.3 | ADInstruments | For data analysis | |
| Light illumination system | Olympus | For surgery | |
| Mikro-Tip catheter | Millar Instruments, Houston, TX | SPR-1000 | For pressure measurement |
| Millar Pressure-Volume Systems | Millar Instruments, Houston, TX | MVPS-300 | For pressure measurement |
| O2 Controller and Hypoxia chamber | Biospherix | ProOx 110 | For chronic hypoxia |
| PowerLab Data Acquisition System | ADInstruments | PowerLab 16/30 | For data recording |
| Scissors | Fine Science Tools, Inc. | 14084-08 | For surgery |
| Small animal ventilator | Harvard Apparatus | Mini-Vent 845 | For surgery |
| Stereomicroscope | Olympus | SZ61 | For surgery |
| Surgery tape | 3M | For surgery | |
| Terg-a-zyme enzyme | Sigma-Aldrich | Z273287-1EA | For catheter cleaning |
Riferimenti
- Humbert, M., et al. Advances in therapeutic interventions for patients with pulmonary arterial hypertension. Circulation. 130 (24), 2189-2208 (2014).
- Chatterjee, K. The Swan-Ganz catheters: past, present, and future: a viewpoint. Circulation. 119 (1), 147-152 (2009).
- Adamson, P. B., et al. CHAMPION trial rationale and design: the long-term safety and clinical efficacy of a wireless pulmonary artery pressure monitoring system. Journal of Cardiac Failure. 17 (1), 3-10 (2011).
- Abraham, W. T., et al. Wireless pulmonary artery haemodynamic monitoring in chronic heart failure: a randomised controlled trial. The Lancet. 377 (9766), 658-666 (2011).
- Adamson, P. B., et al. Wireless pulmonary artery pressure monitoring guides management to reduce decompensation in heart failure with preserved ejection fraction. Circulation: Heart Failure. 7 (6), 935-944 (2014).
- Shatat, M. A., et al. Endothelial Kruppel-like Factor 4 modulates pulmonary arterial hypertension. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 50 (3), 647-653 (2014).
- . SPR-1000 Mouse Pressure Catheter Available from: https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000 (2019)
- Tabima, D. M., Hacker, T. A., Chesler, N. C. Measuring right ventricular function in the normal and hypertensive mouse hearts using admittance-derived pressure-volume loops. American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 299 (6), 2069-2075 (2010).
- Skuli, N., et al. Endothelial deletion of hypoxia-inducible factor-2alpha (HIF-2alpha) alters vascular function and tumor angiogenesis. Blood. 114 (2), 469-477 (2009).
- . LabChart Available from: https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=c_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE (2019)
- Marius, M. H., et al. Definitions and diagnosis of pulmonary hypertension. Journal of the American College of Cardiology. 62 (25), 42-50 (2013).
- Ciuclan, L., et al. A novel murine model of severe pulmonary arterial hypertension. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 184 (10), 1171-1182 (2011).
- Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A. A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice. Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).
- Chen, W. C., et al. Right ventricular systolic pressure measurements in combination with harvest of lung and immune tissue samples in mice. Journal of Visualized Experiments. (71), 50023 (2013).
- Ma, Z., Mao, L., Rajagopal, S. Hemodynamic characterization of rodent models of pulmonary arterial hypertension. Journal of Visualized Experiments. (110), 53335 (2016).
- Chen, M. Berberine attenuates hypoxia-induced pulmonary arterial hypertension via bone morphogenetic protein and transforming growth factor-β signaling. Journal of Cellular Physiology. , (2019).
- Bueno-Beti, C., Hadri, L., Hajjar, R. J., Sassi, Y., Ishikawa, K. The Sugen 5416/Hypoxia mouse model of pulmonary arterial hypertension. Experimental Models of Cardiovascular Diseases. Methods in Molecular Biology. vol 1816. , (2018).
