यह प्रोटोकॉल त्वचा में मलासेज़िया-मेजबानबातचीत का अध्ययन करने के लिए एक माउस मॉडल की स्थापना की रूपरेखा तैयार करता है। यह विट्रो में मलासेज़िया की खेती, मलासेज़ियाके साथ मूत्र त्वचा के संक्रमण और त्वचा के ऊतकों में सूजन और फंगल बोझ के बाद के विश्लेषण का वर्णन करता है।
पशु मॉडल संक्रामक रोग अनुसंधान के लिए महत्वपूर्ण हैं। वे ऊतक-विशिष्ट तरीके से वीवो में रोगाणुओं और उनके मेजबान के बीच होने वाली बातचीत के पूर्ण स्पेक्ट्रम का विश्लेषण करने के लिए एक महत्वपूर्ण आधार प्रदान करते हैं। रोगजनक कवक को मनुष्यों के लिए एक गंभीर खतरे के रूप में तेजी से पहचाना जाता है और इस तरह के संक्रमण मॉडलों का शोषण करने से कवक रोगजनकता की हमारी समझ में काफी सुधार हुआ है। मलसेज़िया जीनस की प्रजातियां मानव त्वचा माइक्रोबायोटा की सबसे प्रचुर मात्रा में कवक हैं और वे गंभीर भड़काऊ त्वचा विकारों जैसे सेबोरेनिक त्वचा विशेषज्ञ और एटोपिक डर्मेटाइटिस के विकास से भी जुड़े हुए हैं। हालांकि, मलासेज़िया और रोग रोगजनकता के बीच एक कारक लिंक अज्ञात रहता है, एक तथ्य यह है कि त्वचा प्रतिरक्षा प्रणाली के साथ Malassezia के जटिल क्रॉसटॉक के गरीब ज्ञान के लिए जिंमेदार ठहराया जा सकता है । यह प्रोटोकॉल एक प्रयोगात्मक माउस मॉडल की स्थापना का वर्णन करता है जो वीवो में स्तनधारी त्वचा के साथ मालासेज़िया की बातचीत का अध्ययन करने की अनुमति देता है। यह प्रयोगशाला की स्थिति के तहत Malassezia spp की खेती के लिए विधि रूपरेखा, कैसे Malassezia spp के साथ मूत्र त्वचा को संक्रमित करने के लिए और कैसे त्वचा सूजन और कवक बोझ विश्लेषण के माध्यम से संक्रमण के परिणाम का आकलन करने के लिए । यहां वर्णित मॉडल पूरी तरह से इम्यूनोसक्षम जानवरों में काम करता है और जानवरों के प्रतिरक्षा दमनकारी या एंटीबायोटिक प्रीट्रीटमेंट पर भरोसा नहीं करता है। यह इसके अलावा लगभग सभी आनुवंशिक रूप से संशोधित माउस उपभेदों के लिए अनुकूलनीय है और अन्य त्वचा रोग मॉडल के साथ जोड़ा जा सकता है। ये विशेषताएं इस संक्रमण मॉडल को वीवो में त्वचा में मालसेज़िया के खिलाफ मेजबान की जन्मजात और अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का विस्तार से अध्ययन करने के लिए एक बहुत शक्तिशाली उपकरण बनाती हैं।
त्वचा कई अलग-अलग रोगाणुओं से आबाद है। माइक्रोबायोटा के लिए त्वचा का निरंतर जोखिम मेजबान की प्रतिरक्षा प्रणाली को आकार देने और शिक्षित करने में योगदान देता है। कवक को माइक्रोबायोटा के एक महत्वपूर्ण हिस्से के रूप में तेजी से पहचाना जाता है और वे बैक्टीरिया और वायरस1के समान मेजबान शरीर विज्ञान और प्रतिरक्षा के लिए एक महत्वपूर्ण भूमिका को पूरा करते हैं। मलसेज़िया जीनस की प्रजातियां गर्म खून वाले कशेरुकी की त्वचा को उपनिवेश बनाने वाली अब तक की सबसे प्रचुर मात्रा में कवक हैं और वे मानव त्वचा माइकोबायोम2,3के 90% से अधिक के लिए बनाते हैं। मलसेज़िया की अठारह विभिन्न प्रजातियों की पहचान अब तक मानव और पशु त्वचा4से की गई है ।
त्वचा की विभिन्न विकृतियों को कम से कम आंशिक रूप से उत्पन्न होने के लिए सोचा जाता है, एक डिस्बैलेंस्ड माइक्रोबायोटा संरचना के परिणामस्वरूप। डिस्बायोसिस रोगजनक क्षमता के साथ प्रजातियों के अति वृद्धि के लिए नेतृत्व कर सकते हैं अवसरवादी संक्रमण और रोग5में जिसके परिणामस्वरूप । लगातार, इस बात के सबूत बढ़ रहे हैं कि मलासेज़िया,अपनी कॉममेंसल जीवन शैली के अलावा, विभिन्न त्वचा विकृतियों के विकास में योगदान देता है, जिसमें डैंड्रफ और पिट्रियासिस वर्सीकलर से लेकर अधिक गंभीर भड़काऊ विकार ों तक सेबोरेरिक डर्मेटाइटिस और एटोपिक डर्मेटाइटिस4,6के रूप में . जबकि मलासेज़िया और पिट्रियार्सिस वर्सिकलर के बीच एक कारक लिंक स्थापित किया गया है, अधिक गंभीर त्वचा विकृतियों में कवक की रोगविज्ञानी भूमिका काफी हद तक अज्ञात बनी हुई है।
त्वचा homeostasis और रोग में Malasssezia की भूमिका का निर्धारण त्वचा और cutaneous प्रतिरक्षा प्रणाली के साथ कवक की बातचीत के बारे में अधिक गहराई से ज्ञान के लिए कहते हैं । ध्यान दें, मलासेज़िया पर शोध अन्य मानव फंगल रोगजनकों (जैसे, कैंडिडा एल्बिकान या एस्परगिलस फ्यूमिगाटस)की तुलना में अभी भी नवेली चरण में है। यह प्रयोगशाला की स्थिति के तहत Malassezia की खेती में कठिनाई और वीवो में मेजबान के साथ संपर्क में कवक का अध्ययन करने के लिए उपयुक्त प्रयोगात्मक मॉडल की कमी के लिए जिंमेदार ठहराया जा सकता है । संस्कृति में अलग कोशिकाओं के साथ पिछले प्रयोगों ने मलासेज़िया और विभिन्न प्रतिरक्षा और गैर-प्रतिरक्षा कोशिकाओं7के बीच प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष बातचीत की एक विस्तृत श्रृंखला का संकेत दिया। हालांकि, ये इन विट्रो प्रयोग केवल आंशिक रूप से वीवो में जटिल त्वचा पर्यावरण की स्थिति को फिर से दोहराते हैं जहां कई सेलुलर और आणविक घटनाएं कवक और विभिन्न कोशिका प्रकारों के बीच सहवर्ती रूप से होती हैं।
इसके साथ, हम चूहों में मलासेज़िया त्वचा संक्रमण के एक प्रयोगात्मक मॉडल के लिए प्रोटोकॉल की रूपरेखा तैयार करते हैं, जिसे हमने हाल ही में स्थापित किया था, वीवो7में कवक-मेजबान बातचीत का अध्ययन करने के लिए। इसमें (1) विट्रो में मालासेज़िया की सफल खेती, (2) मूत्र कान की त्वचा पर मालासेज़िया का एपिक्यूटेनेस एप्लिकेशन, और (3) मलसेज़िया-प्रेरित त्वचा का विश्लेषण करने के तकनीकी विवरण शामिल हैं सूजन और संक्रमित त्वचा का फंगल बोझ। महत्वपूर्ण बात, यह मॉडल संक्रमण से पहले इम्यूनोसप्रेसिंग (उदाहरण के लिए, कॉर्टिकोस्टेरॉयड द्वारा) या चूहों के एंटीबायोटिक उपचार पर भरोसा नहीं करता है, क्योंकि यह फंगल संक्रमण8,9के अन्य माउस मॉडल में अभ्यास किया जाता है। बदले में, यह सामान्य त्वचा में मालसेज़िया के खिलाफ जन्मजात और अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के पूर्ण स्पेक्ट्रम का अध्ययन करने की अनुमति देता है। नोट की, विशिष्ट रोगजनक मुक्त (एसपीएफ) स्थितियों के तहत रखे गए जंगली प्रकार के चूहों को स्वाभाविक रूप से मालासेज़िया के साथ उपनिवेश नहीं किया जाता है और इसलिए, कवक के संपर्क में आने से लगातार उपनिवेशीकरण नहीं होता है, लेकिन मेजबान से भीतर मंजूरी दे दी जाती है लगभग 1.5 सप्ताह। हालांकि, मॉडल एंटीफंगल होस्ट रिस्पांस दीक्षा और विनियमन के तंत्र का अध्ययन करने की अनुमति देता है, जो बदले में, प्रतिरक्षा स्मृति उत्पन्न होने का आधार है। मॉडल बहुमुखी है कि यह आसानी से आनुवंशिक रूप से संशोधित माउस उपभेदों की एक विस्तृत विविधता के लिए लागू किया जा सकता है और यह बाधा की कमी के मॉडल के रूप में अंय मौजूदा त्वचा रोग मॉडल के साथ जोड़ा जा सकता है, के तहत Malassezia के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए पैथोलॉजिकल एंड भड़काऊ स्किन कंडीशन7. इसलिए, चूहों में प्रायोगिक Malassezia त्वचा संक्रमण का वर्णित मॉडल होमोस्टोसिस और रोग के संदर्भ में त्वचा प्रतिरक्षा प्रणाली के साथ कवक की बातचीत की जांच करने के लिए उच्च स्तर का लचीलापन प्रदान करता है।
यह प्रोटोकॉल मलसेज़िया एसपीपी के साथ चूहों के प्रायोगिक त्वचा संक्रमण का वर्णन करता है। इसकी रोगजनक क्षमता के कारण, मलासेज़िया एसपीपी को स्विट्जरलैंड सहित कुछ देशों में BSL2 रोगजनकों के रूप में वर्गीकृत किया गया है। कृपया स्थानीय दिशा-निर्देशों की जांच करें और स्थानीय प्राधिकारियों द्वारा विनियमों का पालन करें । बीएसएल2-वर्गीकृत जीवों को बीएसएल2-प्रमाणित जैव सुरक्षा कैबिनेट (बीएससी) के तहत प्रशिक्षित कर्मियों द्वारा संभाला जाना चाहिए। बीएसएल2-वर्गीकृत जीवों से दूषित जैविक अपशिष्ट, साथ ही, ऐसे जीवों से संक्रमित चूहों से शवों को निपटान से पहले स्वचालित किया जाना चाहिए। चूहों के साथ प्रयोगों के लिए, दुख को कम करने और 3आर सिद्धांतों के अनुसार उच्चतम नैतिक और मानवीय मानकों को सुनिश्चित करने के लिए सभी प्रयास किए जाने चाहिए (प्रतिस्थापित, परिष्कृत, कम)10। इस प्रोटोकॉल में वर्णित प्रयोगों में एम पचिडरमैटिस (एटीसीसी 14522), एम फर्फर (एटीसीसी 14521) और एम संगोष्ठी (एटीसीसी 42132)7के साथ किए गए थे।
यह प्रोटोकॉल मलासेज़िया पीपी द्वारा आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले इंब्रीड माउस स्ट्रेन C57BL/6 की त्वचा के संक्रमण का वर्णन करता है । इस प्रोटोकॉल को एक अलग आनुवंशिक पृष्ठभूमि (जैसे, बाल्ब/सी) या आनुवंशिक रूप से संशोधित माउस के साथ अन्य माउस उपभेदों के लिए अनुकूलित करना उपभेदों को संक्रमण खुराक, विश्लेषण के समय बिंदु (एस) आदि के समायोजन की आवश्यकता हो सकती है। प्रजनन क्षमता सुनिश्चित करने के लिए, चूहों के समूह हमेशा एक ही उम्र और सेक्स के होने चाहिए। चूहों के स्रोत को स्थिर रखा जाना चाहिए, क्योंकि आनुवंशिक पृष्ठभूमि में मामूली परिवर्तन और माइक्रोबायोटा में अंतर, जो विक्रेताओं के बीच मौजूद है और एक प्रजनन सुविधा की विभिन्न इकाइयों के बीच भी मौजूद हो सकता है, पर अप्रत्याशित प्रभाव पड़ सकता है संक्रमण का कोर्स। इस प्रोटोकॉल में वर्णित मलासेज़िया संक्रमण मॉडल की स्थापना करते समय, संक्रमण के पाठ्यक्रम की सावधानीपूर्वक निगरानी करने के लिए एक प्रायोगिक अध्ययन करने की सलाह दी जाती है, जिसमें उपनिवेशीकरण की सीमा, कवक निकासी की गतिज और डिग्री शामिल है सूजन और विकृति जिसे प्रेरित किया जा सकता है (उदाहरण के लिए, यदि कान की त्वचा संक्रमण से पहले बाधा बाधित होती है) इष्टतम परख की स्थिति निर्धारित करने के लिए।
प्रजनन क्षमता सुनिश्चित करने और प्रयोगात्मक समूहों के बीच मतभेदों का मज़बूती से पता लगाने के लिए, प्रति समूह उपयोग किए जाने वाले जानवरों की संख्या की गणना सांख्यिकीय विश्लेषण के आधार पर की जानी चाहिए । नमूना आकार की गणना प्रभाव आकार, त्रुटि दर और शक्ति के आधार पर की जाती है, जो प्रतिरक्षा प्रणाली में भिन्नता के कारण जैविक और प्रयोगात्मक विविधताओं (उदाहरण के लिए) पर विचार करती है। नैतिक कारणों से जानवरों की अनावश्यक रूप से अधिक संख्या का उपयोग करने से बचें। Malassezia त्वचा संक्रमण के बारे में, कवक के साथ केवल एक कान का इलाज और एक ही माउस के भीतर एक नियंत्रण के रूप में दूसरे कान का उपयोग कर, सलाह नहीं दी है क्योंकि चूहों दोनों कानों को कवक फैल सकता है जब संवारने । हालांकि, विभिन्न पद्धतिविज्ञान ी रीड आउट के लिए 1/2 कान का उपयोग करना जैसे फंगल बोझ का निर्धारण, प्रतिरक्षा कोशिकाओं का अलगाव या हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण अक्सर पर्याप्त होता है और इसके परिणामस्वरूप प्रयोगों के लिए उपयोग किए जाने वाले पशु संख्या में महत्वपूर्ण कमी आती है।
मलासेज़िया की 18 विभिन्न प्रजातियों को अद्यतित बताया गया है। मलसेज़िया जीनस के भीतर अंतर और इंट्राप्रजाति विविधताएं मेजबान के साथ बातचीत को प्रभावित कर सकती हैं, जैसा कि हमने अन्य मानव रोगजनक कवक13पर अध्ययन से भी सीखा है। विभिन्न Malassezia प्रजातियों और उपभेदों उनके मूल में अलग है (जैसे, एम pachydermatis सबसे अक्सर जानवरों से अलग प्रजातियों है, जबकि एम प्रतिबंधित, एम ग्लोबोसा और एम संगोष्ठी सबसे अधिक हैं विभिन्न त्वचा क्षेत्रों के बीच इन प्रजातियों के चर वितरण के साथ मनुष्यों में कवक त्वचा माइक्रोबायोम के प्रमुख सदस्य)। कुछ प्रजातियां commensalism के साथ जुड़े हुए हैं, जबकि दूसरों को और अधिक रोगजनक माना जाता है, हालांकि विस्तृत सबूत अपेक्षाकृत कमजोर रहता है । महत्वपूर्ण बात, कुछ प्रजातियों और उपभेदों स्वाभाविक रूप से दूसरों की तुलना में विकसित करने के लिए और अधिक कठिन हैं । इस प्रकार, संक्रमण के लिए किस प्रजाति/तनाव का उपयोग करने का निर्णय अनुसंधान प्रश्न पर आधारित होना चाहिए ।
कुछ माइक्रोबियल जीवों जैसे कैंडिडा एल्बिकान या स्टेफिलोकोकस ऑरियस के साथ मूत्र त्वचा के प्रायोगिक संक्रमण के लिए संक्रमण से पहले एपिडर्मल बाधा के व्यवधान की आवश्यकता होती है, उदाहरण के लिए, रेत के कागज14केसाथ, 15,16. इसके विपरीत, यहां वर्णित मालासेज़िया संक्रमण का मॉडल बाधा व्यवधान7के साथ और बिना समान रूप से कुशल है। यदि त्वचा को संक्रमण7से पहले टेप छीन लिया जाता है तो कवक द्वारा प्रेरित सूजन की डिग्री को बड़े पैमाने पर बढ़ाया जाता है । इसलिए, क्या मलसेज़िया के आवेदन से पहले त्वचा में हेरफेर किया जाना चाहिए शोध के सवाल पर निर्भर करता है। पुरानी और तीव्र त्वचा सूजन के विभिन्न मॉडल (उदाहरण के लिए, विलंबित प्रकार अतिसंवेदनशीलता (डीटीएच) और संपर्क अतिसंवेदनशीलता (सीएचएस) के लिए मॉडल और बाधा की कमी के मॉडल मौजूद हैं जो कॉममेंसल खमीर के योगदान की जांच के लिए रुचि रखते हैं त्वचा विकृतियों के लिए।
विशिष्ट रोगजनक मुक्त (एसपीएफ) शर्तों के तहत बनाए गए Inbred चूहों (हमारे ज्ञान के लिए) स्वाभाविक रूप से Malasseziaके साथ उपनिवेश नहीं हैं । इसलिए, माउस कान की त्वचा पर मलासेज़िया का प्रयोगात्मक अनुप्रयोग कवक के प्राथमिक संपर्क का प्रतिनिधित्व करता है जो मेजबान में एक तीव्र प्रतिक्रिया को प्रेरित करता है, जो बदले में 1 – 2 सप्ताह7के भीतर फंगल निकासी की ओर जाता है। जबकि इस प्रोटोकॉल में वर्णित मॉडल इसलिए केवल आंशिक रूप से इम्यूनोसक्षम मनुष्यों या अन्य मेजबान जीवों की स्थिति को दर्शाता है जो स्थायी रूप से Malasseziaके साथ उपनिवेश हैं, प्रयोगात्मक संक्रमण की पर्याप्त खिड़की की अनुमति देता है एंटीफंगल प्रतिरक्षा और सेलुलर और आणविक तंत्र का अध्ययन करने का अवसर जो इस प्रतिक्रिया को रेखांकित करते हैं। यह विभिन्न प्रयोगात्मक परिस्थितियों में विभिन्न Malassezia प्रजातियों और उपभेदों के जवाब में भिन्नता की जांच करने की अनुमति देता है (उदाहरण के लिए, त्वचा के बाधा व्यवधान के साथ और बिना)।
मलासेज़िया का अध्ययन – मेजबान बातचीत अतीत में संस्कृतियों में अलग सेल प्रकार (जैसे, keratinocyte सेल लाइनों, PBMCs) के साथ इन विट्रो प्रयोगों के लिए सीमित किया गया है। हालांकि इन अध्ययनों ने फंगल और होस्ट निर्धारकों पर कुछ प्रकाश डाला है जो मलासेज़िया और मेजबान17के बीच परस्पर क्रिया को आकार देते हैं, वे परिसर में कवक-मेजबान बातचीत की व्यापक समझ हासिल करने की अनुमति नहीं देते हैं त्वचा का वातावरण, जिसमें कई सेल प्रकार शामिल हैं जो लगातार संचार में हैं, जैसे कि केराटिनोसाइट्स, फाइब्रोब्लास्ट और ऊतक-निवासी प्रतिरक्षा कोशिकाएं, लेकिन ल्यूकोसाइट आबादी भी जो ऊतक में केवल माइक्रोबियल मुठभेड़ पर घुसपैठ करती है त्वचा. इस बहुकोशिकीय नेटवर्क को इन विट्रो मॉडल में पूरी तरह से पुन: पेश नहीं किया जा सकता है, यहां तक कि सबसे उन्नत ऑर्गनॉइड सिस्टम के साथ भी। इस प्रकार, चूहों का प्रायोगिक संक्रमण अभी भी इम्यूनोलॉजी और संक्रामक रोग अनुसंधान में सोने के मानक का प्रतिनिधित्व करता है, और यहां वर्णित मॉडल की उपलब्धता मालासेज़िया अनुसंधान के क्षेत्र में एक सफलता का प्रतिनिधित्व करती है। महत्वपूर्ण बात, यह मॉडल अन्यथा बेफिक्र माउस कान की त्वचा पर Malassezia के epicutaneous आवेदन पर निर्भर करता है, और यह ऊतक में इंजेक्शन द्वारा कवक के टीका फंसाने नहीं है, जैसे, चमड़े या इंट्रापेरिटोनी, के रूप में पिछले अध्ययनोंमें 18की सूचना दी गई, जिनमें से दोनों स्वाभाविक रूप से उपनिवेश मेजबानों की स्थिति से अधिक दूर हैं।
अन्य उपलब्ध माउस मॉडल के साथ इस प्रोटोकॉल में वर्णित मालासेज़िया संक्रमण के मॉडल को संयोजित करने की संभावना आवेदन के दायरे और लचीलेपन को बहुत बढ़ाती है। उत्तरार्द्ध में विशिष्ट त्वचा विकारों के विभिन्न मॉडल शामिल हैं, जैसे बाधा की कमी का मॉडल जो एटोपिक डर्मेटाइटिस की महत्वपूर्ण विशेषताओं की नकल करता है, जो मनुष्यों और कुत्तों दोनों में मालासेज़िया से जुड़ी बीमारी है। इसके अलावा, Malassezia के साथ त्वचा के epicutaneous संक्रमण आसानी से ब्याज की मेजबान जीन में आनुवंशिक दोषों के साथ चूहों के लिए लागू किया जा सकता है, या चूहों जिसमें ब्याज की एक सेल प्रकार आनुवंशिक रूप से हटा रहे है या औषधीय रूप से समाप्त किया जा सकता है (जैसे, साधनों से डिप्थीरिया टॉक्सिन रिसेप्टर-व्यक्त चूहों में डिप्थीरिया टॉक्सिन प्रशासन की। इस तरह के मॉडल मलसेज़ियासहित कॉममेंसल और रोगजनक रोगाणुओं के लिए मेजबान प्रतिक्रिया को विच्छेदन करने और कवक-मेजबान बातचीत में इन जीन और सेल प्रकार की भूमिका का आकलन करने के लिए एक अपरिहार्य उपकरण का प्रतिनिधित्व करते हैं। इस प्रोटोकॉल में वर्णित मलसेज़िया-मेजबानत्वचा संपर्क के विश्लेषणों का विस्तार अभी तक किया जा सकता है। इनमें हिस्टोलॉजी (उदाहरण के लिए, त्वचा विकृति की डिग्री या कवक द्वारा प्रेरित एपिडर्मल मोटाकरने की डिग्री निर्धारित करने के लिए), इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री या कोशिका प्रकार के खिलाफ निर्देशित एंटीबॉडी का उपयोग करके ऊतक वर्गों के इम्यूनोफ्लोरेसेंटिंग द्वारा विश्लेषण शामिल हैं विशिष्ट मार्कर या ब्याज के अन्य अणु। इसमें कोशिकाओं के अलगाव (जैसे, ऊतक निवासी या ऊतक-घुसपैठ ल्यूकोसाइट सबसेट) संक्रमित त्वचा ऊतक से ध्रुवीकरण, विनियमन और बड़ी गहराई में मलासेज़िया की प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की गतिशीलता का अध्ययन करने के लिए भी शामिल हो सकता है।
The authors have nothing to disclose.
इस काम को स्विट्जरलैंड के ज़ुरिच विश्वविद्यालय ने समर्थन दिया था।
Agar | Sigma-Aldrich | A1296-1KG | |
Attane Isoflurane | Piramal Healthcare | – | |
Biosaftey cabinet (BSC) Faster Ultra Safe | DASIT GROUP | TEC 5594 | BSL2 certified |
Centrifuge | Eppendorf | 5415D | compatible with 2ml Eppendorf tubes |
Dessicated Ox-bile | Sigma-Aldrich | 70168-100G | |
Eppendorf Tubes (2 ml) | Eppendorf | 0030 120.094 | |
Glucose | Sigma-Aldrich | 49159-5KG | |
Gylcerol (99 %) | Honeywell | 10314830 | |
Heating pad | Eickenmeyer | 648048 | |
Incubator Hereaus B20 | Heraeus | 412047753 | BSL2 certified |
Ketasol (100 mg) | Graeub AG | 6680416 | |
Magentic heating plate MR Hei-Standard | Heidolph Instruments | 442-1355 | |
Malassezia spp. | ATCC | 14522, 14521, 42132 | |
Malt extract | Sigma-Aldrich | 70167-500G | |
Multiply Biosphere Tubes (200 µl) | Sarstedt AG | 7084211 | Safelock |
Native olive oil | – | – | commerc. available |
Nonidet P40 | Axon Lab | A1694,0250 | |
Oditest measurment devise | Kroeplin | S0247 | range 0-5 mm |
Oleic Acid | Sigma-Aldrich | 75090-5ML | |
Peptone | Oxoid | LP0037 | |
Petri dishes | Sarstedt AG | 82.1473 | |
Phosphat buffered salt solution (PBS, 1x) | Amimed/Bioconcept | 3-05F39 | |
Rompun (2 %) | Bayer | KP0BFHR | |
Shaking incubator Infors Minitron | Infors | – | BSL2 certified |
Spectrometer | Jenway | 20308 | optical density measurement at 600nm |
Spectrometer Cuvettes | Greiner Bio-One | 613101 | |
Stainless Steel balls (5mm) | ABF | KU.5G80 1.3541 | |
Syringes 1 ml Sub-Q | BD Bioscience | 305501 | |
Tissue Lyzer II | Quiagen | 85300 | |
Transpore Hypoallergic Tape | 3M | 1527-1 | |
Tween 40 | Sigma-Aldrich | P1504-100ML | |
Vitamin A Retinoli Palmitas Eye Cream | BAUSCH & LOMB | commerc. available |