Infezione da HIV cronica, acuta e riattivata in modelli di topo immunodeficienti umanizzati

Federico Perdomo-Celis; Sandra Medina-Moreno; Alonso Heredia; Harry Davis; Joseph Bryant; Juan Carlos Zapata

doi:10.3791/60315

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Articolo metodologico

Infezione da HIV cronica, acuta e riattivata in modelli di topo immunodeficienti umanizzati

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DOI:

10.3791/60315

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3 dicembre 2019

Federico Perdomo-Celis¹^,² , Sandra Medina-Moreno¹ , Alonso Heredia¹ , Harry Davis¹ , Joseph Bryant¹ , Juan Carlos Zapata¹

¹Institute of Human Virology, School of Medicine, University of Maryland, ²Grupo Inmunovirología, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia

In questo articolo

Sommario

Qui sono descritti tre approcci sperimentali per studiare la dinamica dell'infezione da HIV nei topi umanizzati. Il primo consente lo studio di eventi di infezione cronica, mentre i due ultimi consentono lo studio di eventi acuti dopo l'infezione primaria o la riattivazione virale.

Abstract

I topi^nulli umanizzati NOD/SCID/IL-2 ricapitolano alcune caratteristiche dell'immunità umana, che possono essere sfruttate nella ricerca di base e pre-clinica sulle malattie infettive. Qui sono descritti tre modelli di topi immunodeficienti umanizzati per studiare la dinamica dell'infezione da HIV. Il primo si basa sull'iniezione intraepatica di CD34^- cellule staminali ematopoietiche nei topi neonati, che consente la ricostituzione di diverse cellule confinate nel sangue e nel linfoide, seguita da infezione con un ceppo HIV di riferimento. Questo modello consente il monitoraggio fino a 36 settimane dopo l'infezione ed è quindi chiamato il modello cronico. Il secondo e il terzo modello sono indicati come modelli acuti e di riattivazione, in cui le cellule mononucleari del sangue periferico vengono iniettate intraperitonealmente nei topi adulti. Nel modello acuto, le cellule di un donatore sano vengono innestate attraverso il percorso intraperitoneale, seguito da infezione con un ceppo HIV di riferimento. Infine, nel modello di riattivazione, le cellule di un donatore infetto dall'HIV sottoposto a terapia antiretrovirale vengono innestate attraverso il percorso intraperitoneale. In questo caso, un ambiente privo di farmaci nel mouse consente la riattivazione del virus e un aumento del carico virale. I protocolli qui forniti descrivono l'approccio sperimentale convenzionale per i modelli murini umanizzati e immunodeficienti dell'infezione da HIV.

Introduzione

Il modello murino umorizzato NOD/SCID/interleukin (IL)-2 receptor-chain^null (qui di seguito indicato come huNS-chain^null) è stato ampiamente utilizzato per studiare la patogenesi delle infezioni, l'autoimmunità e il cancro, così come per gli studi preclinici di farmaci e terapie basate su cellule umane¹^,². Questi topi sono basati su un background non obeso diabetico (NOD), con la mutazione scid e mutazione mirata al locus a catena del recettore IL-2 (comune catena z per IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 e IL-21), che provocano una grave compromissione nello sviluppo delle cellule T-,....