मूत्राशय भरने के दौरान सुब्रुरोथलियम तक सीधी पहुंच के लिए डिट्रूसेर मांसपेशी के साथ एक विकेंद्रीकृत (पूर्व वीनो) मूत्राशय मॉडल हटाया गया
Summary
डिट्रूसर-मुक्त मूत्राशय मॉडल मूत्र के भंडारण और शून्य के दौरान सुबूरोथेलियम/लैमिना प्रोपेरिया में जैविक रूप से सक्रिय मध्यस्थ उपलब्धता के नियमन के लिए स्थानीय तंत्र ों का अध्ययन करने के लिए सुबूरोथेलियम तक सीधी पहुंच सक्षम बनाता है । तैयारी बारीकी से एक बरकरार मूत्राशय के भरने जैसा दिखता है और दबाव की मात्रा अध्ययन प्रणालीगत प्रभावों के बिना प्रदर्शन करने की अनुमति देता है ।
Abstract
पिछले अध्ययनों ने यूएसएसिंग कक्षों में चिपका फ्लैट मूत्राशय म्यूकोसा शीट से रासायनिक पदार्थों की रिहाई की स्थापना की है और हाइड्रोस्टैटिक दबाव या यांत्रिक खंड में परिवर्तन के संपर्क में है और हाइड्रोस्टैटिक दबाव परिवर्तन, खिंचाव, सेल सूजन, या ड्रैग बलों पर सुसंस्कृत यूरोथेलियाल कोशिकाओं से, और भरने के अंत में मूत्राशय लुमेन में। इस तरह के निष्कर्षों से यह धारणा बनी कि इन मध्यस्थों को मूत्राशय भरने के दौरान सुबूरोथेलियम (SubU)/लैमिना प्रोपरिया (एलपी) में भी जारी किया जाता है, जहां वे मूत्राशय की दीवार में गहरी कोशिकाओं को अंततः मूत्राशय की स्थिरता को विनियमित करने के लिए प्रभावित करते हैं । ऐसे अध्ययनों में कम से कम दो स्पष्ट सीमाएं हैं: 1) इनमें से कोई भी दृष्टिकोण सुबू/एलपी में मध्यस्थों की उपस्थिति के बारे में प्रत्यक्ष जानकारी प्रदान नहीं करता है, और 2) उपयोग की जाने वाली उत्तेजनाएं शारीरिक नहीं हैं और मूत्राशय के प्रामाणिक भरने को फिर से दोहराती नहीं हैं। यहां, हम एक प्रक्रिया पर चर्चा करते हैं जो मूत्राशय भरने के दौरान मूत्राशय म्यूकोसा की सुबेरोथेल सतह तक सीधी पहुंच को सक्षम बनाती है। मूत्र detrusor मुक्त तैयारी हम बारीकी से बनाए बरकरार मूत्राशय के भरने जैसा दिखता है और दबाव की मात्रा अध्ययन रीढ़ की हड्डी सजगता और detrusor चिकनी मांसपेशियों से संकेत confounding की अनुपस्थिति में मूत्राशय पर प्रदर्शन करने की अनुमति देता है । उपन्यास detrusor मुक्त मूत्राशय मॉडल का उपयोग करना, हम हाल ही में प्रदर्शन किया है कि मध्यस्थों के इंट्राव्सिक माप क्या जारी किया गया है या मूत्राशय भरने के दौरान SubU/एलपी में मौजूद करने के लिए एक प्रॉक्सी के रूप में इस्तेमाल नहीं किया जा सकता है । यह मॉडल मूत्राशय भरने के दौरान मूत्राशय भरने के दौरान उपरू/एलपी में ले जाए गए यूरोथेलियम-व्युत्पन्न सिग्नलिंग अणुओं की जांच में सक्षम बनाता है ताकि मूत्राशय की चिकनी मांसपेशी को जानकारी प्रसारित की जा सके और संयम और micturition के दौरान इसकी उत्तेजनीयता को विनियमित किया जा सके ।
Introduction
इस मॉडल का उद्देश्य मूत्राशय भरने के विभिन्न चरणों के दौरान मूत्राशय म्यूकोसा के उपमुकोसल पक्ष तक सीधी पहुंच को सक्षम करना है।
मूत्राशय को भरने के दौरान समय से पहले संकुचन से बचना चाहिए और जब महत्वपूर्ण मात्रा और दबाव तक पहुंच जाता है तो खाली होना चाहिए। मूत्राशय भरने के दौरान असामान्य स्थिरता या मूत्र की शून्यता अक्सर डिट्रूसर चिकनी मांसपेशियों (डीएसएम) की असामान्य स्थिरता से जुड़ी होती है। डीएसएम की एकाधिकता चिकनी मांसपेशियों की कोशिकाओं के लिए आंतरिक कारकों और मूत्राशय की दीवार के भीतर विभिन्न कोशिका प्रकारों द्वारा उत्पन्न प्रभावों द्वारा निर्धारित की जाती है। मूत्राशय की दीवार में यूरोथेलियम (म्यूकोसा), सुबूरोथेलियम (सुबू)/लेमिना प्रोपेरिया (एलपी), डिट्रूसर चिकनी मांसपेशी (डीएसएम) और सेरोसा(चित्रा 1A)होते हैं। यूरोथेलियम में छाता कोशिकाएं (यानी, यूरोथेलियम की सबसे बाहरी परत), मध्यवर्ती कोशिकाएं और बेसल कोशिकाएं (यानी, यूरोथेलियम की अंतरतम परत) होती हैं। विभिन्न प्रकार की कोशिकाएं, जिनमें इंटरस्टिशियल कोशिकाएं, फाइब्रोब्लास्ट, असंबद्ध तंत्रिका टर्मिनल, छोटी रक्त वाहिकाएं और प्रतिरक्षा कोशिकाएं सुबू/एलपी में रहती हैं । यह व्यापक रूप से माना जाता है कि मूत्राशय एक संवेदी अंग है जो मध्यस्थों को उपमुकोसा में छोड़कर पलटा मिटूराइटिस और संयम शुरू करता है जो सुबू /एलपी और डीएसएम1,2,3में कोशिकाओं को प्रभावित करता है । अधिकांश भाग के लिए, ऐसी धारणाएं उन अध्ययनों पर आधारित हैं जिन्होंने मध्यस्थों की रिहाई का प्रदर्शन किया है: हाइड्रोस्टैटिक दबाव4,5में परिवर्तन के संपर्क में म्यूकोसा के टुकड़ों से ; 6,7,हाइपोटॉनिसिटी-प्रेरित कोशिका सूजन7 या ड्रैगफोर्स्स 8केसंपर्क में आने वाली सुसंस्कृत यूरोथेलियाल कोशिकाओं से । पृथक मूत्राशय की दीवार से रिसेप्टर या तंत्रिका सक्रियण9,10,11,12,13,14पर स्ट्रिप्स से । और मूत्राशय लुमेन में15, 16,17,18,19भरने के अंत में . जबकि इस तरह के अध्ययनमूत्र दीवार खंडों या सुसंस्कृत यूरोथेलियल कोशिकाओं की यांत्रिक उत्तेजना पर मध्यस्थों की रिहाई को प्रदर्शित करने के लिए महत्वपूर्ण भूमिका निभाते थे, उन्हें उपमुकोसा में मध्यस्थों की रिहाई के लिए प्रत्यक्ष सबूतद्वारा समर्थित होना चाहिए जो मूत्राशय भरने को पुन: पेश करने वाले शारीरिक उत्तेजनाओं द्वारा प्राप्त किया जाता है। यह एक चुनौतीपूर्ण कार्य है कि सुबू/एलपी मूत्राशय भरने के दौरान सुबू/एलपी के आसपास के क्षेत्र तक सीधी पहुंच में बाधा डालने वाली मूत्राशय की दीवार में गहरा स्थित है ।
यहां, हम डिट्रूपर मांसपेशियों के साथ एक विकेंद्रीकृत (पूर्व वीनो) मूत्राशय मॉडल को चित्रित करते हैं13 को हटा दिया गया था जिसे मूत्राशय की दीवार में मूत्राशय यूरोथेलियम, डीएसएम और अन्य कोशिका प्रकारों के बीच सिग्नलिंग में भाग लेने वाले मेचनोट्रांसडुक्शन के स्थानीय तंत्र पर अध्ययन को सुविधाजनक बनाने के लिए विकसित किया गया था। यह दृष्टिकोण फ्लैट मूत्राशय की दीवार चादरें, मूत्राशय की दीवार स्ट्रिप्स या सुसंस्कृत यूरोथेलियल कोशिकाओं का उपयोग करने के लिए बेहतर है क्योंकि यह मूत्राशय में शारीरिक दबावों और मात्राओं के जवाब में जारी या गठित किए गए यूरोथियम-व्युत्पन्न मध्यस्थों के SubU/एलपी के आसपास के क्षेत्र में प्रत्यक्ष माप की अनुमति देता है और सेल संस्कृति में संभावित फेनोटिपिक परिवर्तनों से बचा जाता है । इसका उपयोग मूत्राशय भरने के विभिन्न चरणों में सुबू/एलपी में मध्यस्थों की उपलब्धता, रिहाई, चयापचय और ट्रांसरोथेलल परिवहन को मापनेकेलिए किया जा सकता है । तैयारी का उपयोग अति सक्रिय और असक्रिय मूत्राशय सिंड्रोम के मॉडल में यूरोथेलियासिग्नलिंग और मेचनोट्रांसक्शन की जांच करने के लिए भी किया जा सकता है।
Protocol
Representative Results
Discussion
मूत्राशय में दो कार्य होते हैं: मूत्र का भंडारण और शून्य। इन कार्यों के सामान्य संचालन के लिए मूत्राशय की दीवार में कोशिकाओं के माध्यम से इंट्राल्यूमिनल मात्रा और दबाव और संकेतों के ट्रांसड्यूक्शन क?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम को नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ डायबिटीज एंड डाइजेस्टिव एंड किडनी डिजीज ग्रांट DK41315 ने सपोर्ट किया ।
Materials
| CaCl2 | Fisher | C79 | Source flexible |
| Dextrose | Fisher | D16 | Source flexible |
| Dissecting pins | Fine Science Tools | 26002-20 | Source flexible |
| Infusion Pump | Kent Scientific | GenieTouch | Source flexible |
| KCl | Fisher | P217 | Source flexible |
| KH2PO4 | Fisher | P284 | Source flexible |
| Light source | SCHOTT ACEI | Source flexible | |
| Microscope | Olympus SZX7 | Flexible to use any scope | |
| MgCl2 | Fisher | M33 | Source flexible |
| NaCl | Fisher | S671 | Source flexible |
| NaHCO3 | Fisher | S233 | Source flexible |
| Needles 25G | Becton Dickinson | 305122 | Source flexible |
| Organ bath | Custom made | Flexible source; We made it from Radnoti dissecting dish | |
| PE-20 tubing | Intramedic | 427405 | Source flexible |
| Pressure transducer | AD instrument | Source flexible | |
| S&T Forceps | Fine Science Tools | 00632-11 | Source flexible |
| Software pressure-volume | AD Instruments | Power lab | |
| Suture Nylon, 6-0 | AD surgical | S-N618R13 | Source flexible |
| Suture Silk, 6-0 | Deknatel via Braintree Scientific, Inc. | 07J1500190 | Source flexible |
| Syringes 1 ml | Becton Dickinson | 309602 | Source flexible |
| Vannas Spring Scissors | Fine Science Tools | 15000-08 | Source flexible |
| Water circulator | Baxter | K-MOD 100 | Source flexible |
Riferimenti
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