Qui descriviamo un nuovo metodo per rilevare la creazione di successo della circolazione condivisa del sangue di due parabionts attraverso un'iniezione di vena caudale di glucosio, che provoca danni minimi e non è fatale per i parabionts.
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Articolo metodologico
Rilevare l'istituzione dell'afflusso di sangue condiviso nei topi parabiotici da Caudal Vein Glucose Injection
In questo articolo
Sommario
Abstract
La parabiosi è un metodo sperimentale per combinare chirurgicamente due animali paralleli lungo l'asse longitudinale del corpo. Vi presentiamo un protocollo per rilevare il successo del chimerismo del sangue nei parabionts da un'iniezione caudale di glucosio. Sono stati costruiti topi parabiotici. Il glucosio è stato iniettato nel topo donatore attraverso la vena della coda, e la fluttuazione del livello di glucosio nel sangue è stata misurata in entrambi i topi utilizzando un glucometer del sangue in diversi punti di tempo. I nostri risultati hanno mostrato che dopo l'iniezione di glucosio, il livello di glucosio nel sangue nei topi donatori è aumentato bruscamente dopo 1 min e è diminuito lentamente in seguito. Nel frattempo, il livello di glucosio nel sangue dei topi ricittori ha raggiunto il picco di 15 min dopo l'iniezione. Risultati simili sono stati ottenuti con Evans blu, utilizzato come un controllo positivo per il glucosio. La fluttuazione sincrona dei livelli di glucosio nel sangue indica che il flusso sanguigno tra i due topi è stato stabilito con successo.
Introduzione
La parabiosi è un metodo di modellazione in cui due organismi viventi vengono uniti chirurgicamente e si sviluppano come un unico sistema fisiologico con un sistema circolatorio condiviso1. Tali modelli sono stati ampiamente utilizzati per studiare la fisiologia a causa del vantaggio che le sostanze prodotte da un singolo individuo possono agire su entrambi gli animali contemporaneamente attraverso il sistema circolatorio condiviso. Dalla metà del 1800, quando gli esperimenti parabiotici sono stati introdotti da Paul Bert2,i metodi per la costruzione di modelli parabiotici sono diventati standardizzati. Tuttavia, manca u....
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Protocollo
Tutte le procedure che coinvolgono gli animali e la loro cura sono state approvate dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali dell'Università di Harbin Medical.
NOTA: gli strumenti e le attrezzature necessari per il metodo sono elencati nella Tabella dei materiali.
1. Preparazione di materiali e animali
- Ordinare c57BL/6 topi maschi con peso compreso tra 20 g-25 g da un fornitore di animali da laboratorio standard.
- Ospita i topi in un ciclo di luce di 12 h: 12 h di buio a 24,26 gradi centigradi con accesso ad alto libitum all'acqua e al cibo.
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Risultati
In sei topi donatori, i livelli di glucosio nel sangue sono nettamente aumentati a 26,5 mall/L (aumento del 173%) ad una media di 1 min dopo l'iniezione di 100 l di glucosio (1,2 g/kg) attraverso la vena della coda e poi sono gradualmente diminuiti a 13,3 smol a 60 min. Nei topi ricintori, la glicemia è aumentata lentamente dopo l'iniezione e ha raggiunto il primo livello di picco a 15 min (aumento del 47%, 12,2 zol/L). Sulla base dei risultati di cui sopra, lo standard per il chimerismo .......
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Discussione
La parabiosi si riferisce alla tecnica chirurgica di collegamento di due animali viventi per stabilire un sistema vascolare comune con mezzisperimentali 6,7,8. Il vantaggio di questo modello è che le sostanze prodotte da un singolo individuo possono agire su entrambi gli animali contemporaneamente. Così, il modello di parabiosi può essere utilizzato per esplorare il ruolo di una sostanza o fattore in una malattia correlata, prod.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto dalla National Nature Science Foundation of China (81570399 e 81773735), dal National Key Research and Development Program of China - Traditional Medicine Modernization Research (2017YFC1702003) e da Hei Long Jiang Eccezionale Fondo scientifico giovanile (JC2017020).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| pinze curve | JZ strumenti chirurgici, Cina | J31340 | |
| forbici fini | JZ strumenti chirurgici, Cina | WA1030 | |
| pinza ad ago | JZ strumenti chirurgici, Cina | 60017961 | |
| 2,5 mL siringhe | Agilent, USA | 5182-9642 | |
| Tribromoethano | Sigma-Aldrich, USA | T48402-5G | |
| penicillina | Solarbio, Cina | IP0150 | |
| tramadolo | Yijishiye, Cina | glucometro YJT712520 | |
| Roche Diabetes Care, Indiana | Accu-Chek Active strisce | ||
| Evan's blue Counterstain | Solarbio, Cina | G1810 | |
| crema depilatoria | Nair, USA | LL9161 | |
| Coperta riscaldante ( Kent | Scientific Corp, USA | TP-22G | |
| Rasoio elettrico | Codos, Cina | CP-5000 | |
| 3-0,5-0 sutura chirurgica | Shanghai Medical Suture Needle Factory, Cina | SYZ 3-0#, SYZ 5-0# |
Riferimenti
- Baruch, K., et al. Aging-induced type I interferon response at the choroid plexus negatively affects brain function. Science. 346 (6205), 89-93 (2014).
- Zhang, Y., et al. Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue. Na....
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Ristampe e permessi
