Rilevare l'istituzione dell'afflusso di sangue condiviso nei topi parabiotici da Caudal Vein Glucose Injection

Summary

Qui descriviamo un nuovo metodo per rilevare la creazione di successo della circolazione condivisa del sangue di due parabionts attraverso un'iniezione di vena caudale di glucosio, che provoca danni minimi e non è fatale per i parabionts.

Abstract

La parabiosi è un metodo sperimentale per combinare chirurgicamente due animali paralleli lungo l'asse longitudinale del corpo. Vi presentiamo un protocollo per rilevare il successo del chimerismo del sangue nei parabionts da un'iniezione caudale di glucosio. Sono stati costruiti topi parabiotici. Il glucosio è stato iniettato nel topo donatore attraverso la vena della coda, e la fluttuazione del livello di glucosio nel sangue è stata misurata in entrambi i topi utilizzando un glucometer del sangue in diversi punti di tempo. I nostri risultati hanno mostrato che dopo l'iniezione di glucosio, il livello di glucosio nel sangue nei topi donatori è aumentato bruscamente dopo 1 min e è diminuito lentamente in seguito. Nel frattempo, il livello di glucosio nel sangue dei topi ricittori ha raggiunto il picco di 15 min dopo l'iniezione. Risultati simili sono stati ottenuti con Evans blu, utilizzato come un controllo positivo per il glucosio. La fluttuazione sincrona dei livelli di glucosio nel sangue indica che il flusso sanguigno tra i due topi è stato stabilito con successo.

Introduction

La parabiosi è un metodo di modellazione in cui due organismi viventi vengono uniti chirurgicamente e si sviluppano come un unico sistema fisiologico con un sistema circolatorio condiviso¹. Tali modelli sono stati ampiamente utilizzati per studiare la fisiologia a causa del vantaggio che le sostanze prodotte da un singolo individuo possono agire su entrambi gli animali contemporaneamente attraverso il sistema circolatorio condiviso. Dalla metà del 1800, quando gli esperimenti parabiotici sono stati introdotti da Paul Bert^2,i metodi per la costruzione di modelli parabiotici sono diventati standardizzati. Tuttavia, manca u....

Protocol

Tutte le procedure che coinvolgono gli animali e la loro cura sono state approvate dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali dell'Università di Harbin Medical.

NOTA: gli strumenti e le attrezzature necessari per il metodo sono elencati nella Tabella dei materiali.

1. Preparazione di materiali e animali

1. Ordinare c57BL/6 topi maschi con peso compreso tra 20 g-25 g da un fornitore di animali da laboratorio standard.
2. Ospita i topi in un ciclo di luce di 12 h: 12 h di buio a 24,26 gradi centigradi con accesso ad alto libitum all'acqua e al cibo.

Results

In sei topi donatori, i livelli di glucosio nel sangue sono nettamente aumentati a 26,5 mall/L (aumento del 173%) ad una media di 1 min dopo l'iniezione di 100 l di glucosio (1,2 g/kg) attraverso la vena della coda e poi sono gradualmente diminuiti a 13,3 smol a 60 min. Nei topi ricintori, la glicemia è aumentata lentamente dopo l'iniezione e ha raggiunto il primo livello di picco a 15 min (aumento del 47%, 12,2 zol/L). Sulla base dei risultati di cui sopra, lo standard per il chimerismo .......

Discussion

La parabiosi si riferisce alla tecnica chirurgica di collegamento di due animali viventi per stabilire un sistema vascolare comune con mezzi^{sperimentali 6,7,8}. Il vantaggio di questo modello è che le sostanze prodotte da un singolo individuo possono agire su entrambi gli animali contemporaneamente. Così, il modello di parabiosi può essere utilizzato per esplorare il ruolo di una sostanza o fattore in una malattia correlata, prod.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
pinze curve	JZ strumenti chirurgici, Cina	J31340
forbici fini	JZ strumenti chirurgici, Cina	WA1030
pinza ad ago	JZ strumenti chirurgici, Cina	60017961
2,5 mL siringhe	Agilent, USA	5182-9642
Tribromoethano	Sigma-Aldrich, USA	T48402-5G
penicillina	Solarbio, Cina	IP0150
tramadolo	Yijishiye, Cina	glucometro YJT712520
	Roche Diabetes Care, Indiana	Accu-Chek Active strisce
Evan's blue Counterstain	Solarbio, Cina	G1810
crema depilatoria	Nair, USA	LL9161
Coperta riscaldante ( Kent	Scientific Corp, USA	TP-22G
Rasoio elettrico	Codos, Cina	CP-5000
3-0,5-0 sutura chirurgica	Shanghai Medical Suture Needle Factory, Cina	SYZ 3-0#, SYZ 5-0#