क्रोनिक स्यूडोमोनास एरुजिनोसा घाव संक्रमण का एक विलंबित टीका मॉडल
Summary
हम इम्यूनोसक्षम चूहों में पुराने घाव संक्रमण पैदा करने के लिए एक विलंबित टीका प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं।
Abstract
स्यूडोमोनास एरुजिनोसा (पी एरुजिनोसा)मानव स्वास्थ्य और रोग के लिए प्रासंगिकता बढ़ाने का एक प्रमुख नोसोकोमियल रोगजनक है, विशेष रूप से मधुमेह और अस्पताल में भर्ती रोगियों में पुराने घाव संक्रमण की स्थापना में। घाव रोगजनककी जांच और इस रोगजनक के खिलाफ नए उपचारों के विकास में सहायता करने के लिए पुराने संक्रमण मॉडलों की तत्काल आवश्यकता है। यहां, हम एक प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं जो पूर्ण मोटाई उत्तेजित घायल होने के 24 घंटे बाद विलंबित टीका का उपयोग करता है। इस समय मौजूद अनंतिम घाव मैट्रिक्स का संक्रमण या तो तेजी से निकासी या संक्रमण के प्रसार को वनील करता है और इसके बजाय विदेशी सामग्रियों या प्रतिरक्षा दमन के प्रत्यारोपण की आवश्यकता के बिना 7-10 दिनों तक चलने वाले पुराने संक्रमण को स्थापित करता है। यह प्रोटोकॉल मनुष्यों में पोस्ट-ऑपरेटिव संक्रमण के एक विशिष्ट अस्थायी पाठ्यक्रम की नकल करता है। एक ल्यूमिनेसेंट पी aeruginosa तनाव (PAO1:lux) का उपयोग पी aeruginosa घाव संक्रमण के लिए जीवाणु बोझ के मात्रात्मक दैनिक मूल्यांकन के लिए अनुमति देता है । यह उपन्यास मॉडल बैक्टीरियल रोगजनकता की जांच और क्रोनिक पी एरुजिनोसा घाव संक्रमण के लिए नए उपचारों के विकास में एक उपयोगी उपकरण हो सकता है।
Introduction
स्यूडोमोनास एरुजिनोसा (पी एरुजिनोसा)मानव स्वास्थ्य और रोग के लिए बढ़ती प्रासंगिकता के साथ एक ग्राम-नकारात्मक रॉड के आकार का जीवाणु है। यह नोसोकोमियल सेटिंग्स में व्यापक रुग्णता और मृत्यु दर के लिए जिम्मेदार है, विशेष रूप से इम्यूनोसमझौता रोगियों में घाव संक्रमणशामिल 1,2। इस रोगजनक के मल्टीड्रग प्रतिरोधी उपभेदों के उद्भव ने पी एरुजिनोसा उग्रता, पी एरुजिनोसा एंटीबायोटिक प्रतिरोध के तंत्र और इस घातक संक्रमण3की रोकथाम और उपचार के लिए नए तरीकों में योगदान करने वाले कारकों की जांच के लिए और प्रोत्साहन प्रदान किया है । जैसे, इन शोध सवालों की जांच के लिए उपकरण के रूप में पुराने घाव संक्रमण के पशु मॉडल के लिए की जरूरत है और अधिक कभी नहीं किया गया है ।
दुर्भाग्य से, पी aeruginosa संक्रमण के कई पशु मॉडल सेप्सिस4,5के कारण संक्रमण या तेजी से गिरावट के तेजी से समाधान के साथ तीव्र संक्रमण का अनुकरण करते हैं, जो इन संक्रमणों की अक्सर पुरानी प्रकृति का पर्याप्त रूप से अनुकरण नहीं करता है। इस खामी को दूर करने के लिए, कुछ मॉडल विदेशी निकायों जैसे आगर मोतियों, सिलिकॉन प्रत्यारोपण, या अल्गिनेट जैल6,7,8के प्रत्यारोपण का उपयोग करते हैं। अन्य मॉडल उन चूहों का उपयोग करते हैं जिन्हें उन्नत उम्र, मोटापा या मधुमेह के कारण या औषधीय साधनों जैसे साइक्लोफोस्फामिमाइड-प्रेरित न्यूट्रोपेनिया9,10,11,12के कारण इम्यूनोसमझौता किया जाता है। हालांकि, या तो विदेशी सामग्री या प्रतिरक्षा समझौता मेजबानों का उपयोग स्थानीय भड़काऊ प्रक्रिया को बदल देता है, जिससे अन्यथा सामान्य प्रतिरक्षा प्रणालियों के साथ मेजबानों में पुराने घाव संक्रमणों में शामिल रोगविज्ञान की समझ हासिल करना मुश्किल हो जाता है।
हमने चूहों में पी aeruginosa घाव संक्रमण का एक पुराना मॉडल विकसित किया है जिसमें एक्सिशनल घायल होने के बाद बैक्टीरिया के साथ देरी से टीका शामिल है। देरी टीका बैक्टीरियल बोझ का आकलन करने वाले प्रयोगों के लिए कम से कम 7 दिनों तक विस्तार करने की अनुमति देता है। यह मॉडल पी एरुजिनोसा क्रोनिक संक्रमणों के रोगजनन और नए उपचारदोनों की जांच के लिए नए अवसरों को खोलता है।
Protocol
Representative Results
Discussion
हमने एक उपन्यास देरी से टीका पी aeruginosa घाव संक्रमण मॉडल विकसित किया है। एक्सिजनल घायल होने के बाद 24 घंटे तक बैक्टीरिया के साथ टीका में देरी की रणनीति 1 सप्ताह की समय सीमा पर घाव संक्रमण के मूल्यांकन को स?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
PUT-Tn5-EM7-लक्स-Km1 ल्यूमिनेसेंट निर्माण वेक्टर जे हार्डी से एक शालीन उपहार था । BioRender.com के साथ योजनाबद्ध बनाया गया था। हम घाव संक्रमण मॉडल पर उनकी सलाह के लिए जी गुर्टनर की लैब का शुक्रिया अदा करते हैं । हम अपनी तकनीकी विशेषज्ञता के लिए वीवो इमेजिंग में स्टैनफोर्ड सेंटर फॉर इनोवेशन से टी डॉयल को भी धन्यवाद देते हैं । इस काम को अनुदान R21AI133370, R21AI 133240, R01AI12492093, और स्टैनफोर्ड स्पार्क, फाल्क मेडिकल रिसर्च ट्रस्ट और सिस्टिक फाइब्रोसिस फाउंडेशन (CFF) से P.L.B. C.R.D. द्वारा समर्थित T32AI0007502 द्वारा समर्थित किया गया था । विज्ञान और इंजीनियरिंग के लिए एक गैबलन स्टैनफोर्ड ग्रेजुएट फेलोशिप और एक लुबर्ट स्ट्राइकर बायो-एक्स स्टैनफोर्ड इंटरडिसिप्लिनरी ग्रेजुएट फेलोशिप ने जेएमएस का समर्थन किया ।
Materials
| 0.9% Sodium Chloride injection | Hospira | 2484457 | |
| 18 G x 1 sterile needle | BD | 305195 | |
| 25 G x 1 1/5 sterile needle | BD | 305127 | |
| Alcohol swab | BD | 326895 | |
| Aura Imaging Software | Spectral Instruments Imaging | n/a | |
| Betadine | Purdue Frederick Company | 19-065534 | |
| Buprenorphine SR LAB | Zoopharm | n/a | |
| C57BL/6J male mice | The Jackson Laboratory | 000664 | |
| Disposable biopsy punch, 6mm | Integra | 33-36 | |
| Fine scissors – Tungsten Carbide | Fine Science Tools | 14568-09 | |
| Glass Bead Dry Sterilizer | Harvard Apparatus | 61-0183 | |
| Granulated Agar | Fisher BioReagents | BP9744 | |
| Heating Pad | Milliard | 804879481218 | |
| Insulin syringe with 28 G needle | BD | 329461 | |
| Lago X Imaging System | Spectral Instruments Imaging | n/a | |
| LB broth | Fisher BioReagents | BP1426 | |
| Leur-Lok 1 mL syringe | BD | 309628 | |
| Mini Arco Animal Trimmer | Wahl Professional | 919152 | |
| Nair Hair Removal Lotion with Baby Oil | Church and Dwight | n/a | Available at any pharmacy |
| Octagon Forceps | Fine Science Tools | 11041-08 | |
| Petri dish | Falcon | 351029 | |
| Phosphate Buffered Saline (PBS) 1x | Corning | 21-040-CV | |
| Press and Seal Cling Wrap | Glad | n/a | |
| SafetyGlide Insulin syringe with 30 G needle | BD | 305934 | |
| Safetyglide Insulin syringe, 1/2 mL, 30 G x 5/16 TW | BD | 305934 | |
| Scale | Ohaus Scout Pro | SP202 | |
| Supplical Nutritional Supplement | Henry Schein Animal Health | 29908 | |
| Tegaderm, 6 cm x 7 cm | 3M | 1624W |
Riferimenti
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