자동 식품 섭취 모니터링 시스템을 사용하여 쥐에서 자당 선호 및 참신 유도 Hypophagia 테스트
Summary
여기에 제시 된 쥐에서 우울증과 같은 과금 행동을 연구하는 프로토콜입니다. 그것은 두 개의 잘 확립 된 행동 방법, 자당 환경 설정 및 참신 유도 hypophagia 테스트, 자동화 된 식품 및 액체 섭취 모니터링 시스템을 결합, 간접적으로 대리 매개 변수를 사용 하 여 설치류 행동을 조사.
Abstract
우울 장애의 보급 그리고 부각은 동물 모형에 있는 행동 연구 결과를 위한 필요를 밑줄, 대략 3억 2,200만 명의 개별에 영향을 미치는 전 세계적으로 상승하고 있습니다. 이 프로토콜에서, 쥐에 있는 불경기 같이 그리고 anhedonic 행동을 공부하기 위하여는, 확립된 자당 선호도 및 참신유도한 hypophagia 시험은 자동화한 음식 및 액체 섭취 감시 시스템과 결합됩니다. 테스트 하기 전에, 자당 선호 패러다임에서, 남성 쥐는 수돗물 이외에 자당 용액을 소비 하기 위해 적어도 2 일 동안 훈련. 시험 도중, 쥐는 다시 물과 자당 용액에 드러난다. 소비는 자동화된 시스템에 의해 매 초마다 등록됩니다. 총 수분 섭취량(자당 선호도 비율)에 대한 자당비율(자당 선호도 비율)은 안도니아에 대한 대리 매개변수이다. 참신유도 hypophagia 시험에서, 남성 쥐는 맛있는 간식에 드러내는 훈련 기간을 겪습니다. 훈련 하는 동안, 설치류는 안정적인 기준 간식 섭취를 보여줍니다. 테스트 당일, 동물들은 홈 케이지에서 알려진 맛있는 간식에 접근할 수 있는 새로운 알려지지 않은 환경을 나타내는 신선하고 빈 케이지로 옮겨갑니다. 자동화된 시스템은 총 섭취량과 기본 미세 구조(예: 간식에 접근하는 대기 시간)를 기록하여 무증하고 불안한 행동에 대한 통찰력을 제공합니다. 이러한 패러다임과 자동화된 측정 시스템의 조합은 측정 오류를 줄임으로써 더 높은 정확도와 함께 보다 자세한 정보를 제공합니다. 그러나, 테스트는 대리 매개 변수를 사용 하 고 간접적인 방식으로 우울증과 anhedonia를 묘사.
Introduction
평균적으로, 세계 인구의 4.4%는 불경기의 영향을 받습니다. 이는 전 세계적으로 3억 2,200만 명으로 10년 전대비 18% 증가한수치입니다. 세계보건기구(WHO)의 추정에 따르면, 우울증은 2020년 장애조정생활 순위에서2위를차지하게 됩니다. 정서적 장애의 상승 보급을 해결하고 새로운 중재 전략을 수립하기 위해,이 행동을 더 연구 할 필요가있다. 인간에서 검사하기 위해서는 동물 연구가 필요합니다.
몇몇 모형은 우울한 행동 (즉, 강제 수영 시험, 꼬리 정지 시험, 자당 특혜 시험 및 참신 유도 hypophagia)3,4의구성 요소를 연구하기 위하여 설치되었습니다. 자당 선호도 테스트 (SPT) 및 참신 유도 hypophagia (NIH) 동물에서 우울증 같은 행동을 감지할 수 있습니다. 이러한 테스트 자체는 설치류에 있는 불경기의 상태를 유도하지 않습니다 그러나 행동에 있는 심각한 변경을 묘사합니다. SPT와 NIH 는 모두 안에도니아로 알려진 우울증의 특성을 평가하며, 이는 보람있는 활동, 한때 개인이 즐겼던 활동5,그리고 보상6에대한 복잡한 현상의 한 측면입니다. 두 테스트 모두 맛있는 음식의 형태로 보람있는 자극에 대한 반응을 연구합니다. 소비의 범위는 anhedonia,7,8,89에대한 대리 매개 변수 역할을한다.
anhedonia를 조사하는 테스트의 가치는 물질의 무게를 정밀하게 측정하여 발생하는 정확한 소비 측정에 크게 의존합니다. 종래, 이 측정은 시험 전후에 한 번 수동으로 수행됩니다. 그러나 이것은 여러 가지 이유로 잘못된 측정을 하는 경향이 있습니다. 첫째, 설치류는 음식을 비축하는 경향이, 그들은 즉시 소비하지 않고 음식을 제거 한 다음 안전한 장소에 숨길 것을 의미. 따라서, 이러한 식품 손실은 총 소비량의 계산에 포함될 수 있다. 둘째, 쥐는 음식과 물을 유출, 각 소비없이 체중 감소의 결과. 셋째, 의도하지 않은 액체 손실은 병을 케이지에서 삽입하고 제거하여 병을 취급하기 때문에 발생합니다.
이러한 오류 원인을 줄이기 위한 접근 방식에서, 우리는 자동 식품 및 액체 섭취 모니터링 시스템을 사용하여 음식과 물 섭취량을 측정하여 anhedonia (SPT3,,4 및 NIH9)를평가하는 두 가지 일반적인 테스트를 결합했습니다. 이 절차는 맛있는 물질의 소비에 대한 정확한 조사를 허용하고 우울증과 같은 행동의 특징으로 쥐의 즐거움경험에 대한 정보를 제공합니다. 수동 측정과 관련된 위에서 언급한 오류는 나중에 자세히 설명되는 다른 접근 방식을 사용하여 감소됩니다.
미세 구조에 대한 정보를 제공하기 위해 이프로토콜(10)에 사용되는 자동화된 섭취 모니터링 시스템은 초당 식품(±0.01g)의 무게를 측정합니다. 따라서 안정된 체중은 “먹지 않음”으로 문서화되고 불안정한 체중은 “먹기”로 기록됩니다. “시합”은 이벤트 전후의 안정적인 중량 의 변화로 정의됩니다. 식사는 하나 이상의 시합으로 구성되며 쥐의 최소 크기는 0.01 g로 정의되었습니다. 식사는 쥐의 다른 식사와 15 분 (표준화 된 값)으로 분리됩니다. 따라서, 음식 섭취량은 시합이 15 분 이내에 발생하고 체중 변화가 0.01 g보다 크거나 클 때 하나의 식사로 간주됩니다. 이 프로토콜에서 평가된 식사 매개 변수에는 식사 시간, 식사 시간, 시합 크기, 시합 시간, 시합 시간, 시합에 소요된 시간, 첫 시합에 대한 대기 시간 및 시합 횟수가 포함됩니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
자당 선호도 및 참신 유도 hypophagia 시험은 쥐에 있는 anhedonia를 평가하기 위한 2개의 확립된 기술입니다. 자동화된 식품 섭취 모니터링 시스템과의 결합을 통해 방해받지 않는 쥐에서 보다 자세한 분석을 할 수 있으며 잘못된 측정을 줄일 수 있습니다.
오류발생률은 다른 접근법에 의해 감소됩니다. 첫째, 유출로 인한 오류를 해결하기 위해 식품 호퍼와 게이트 사이의 간격을 ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 독일 연구 재단 (STE 1765/3-2)과 샤리테 대학 기금 (UFF 89/441-176, A.S.)의 자금 지원을 통해 지원되었습니다.
Materials
| Assembly LH Cage Mount – RAT-FOOD – includes Stainless cage mount, hopper, blocker, coupling | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BCMPRF01 | |
| Assembly LH Cage Mount unplugged – RAT – FOOD includes stainless steel cage mount, hopper, blocker, unplugged adapter, coupling | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BCMUPRF01 | |
| cage w/ 2 openings – RAT – costum modified cage – includes cage top and standard water bottle | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BCR02 | single housing |
| Data collection Laptop Windows – Configured w/ BioDAQ Software | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BLT003 | |
| enrichment (plastic tubes, gnawing wood) | distributed by the animal facility | ||
| HoneyMaid Graham Cracker Crumbs | Nabisco, East Hanover, NJ, USA | ASIN: B01COWTA98 | palatable snack for NIH test |
| low vibration polymer rack | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BRACKR | |
| male Sprague Dawley rats | Envigo | Order Code: 002 | |
| Model #2210 32x Port BioDAQ Central Controller – includes cables, and calibration kit | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BCC32_03 | |
| Peripheral sensor Controller – includes cable | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BPSC01 | |
| SigmaStat 3.1 | Systat Software, San Jose, CA, USA | statistical analysis | |
| Stainless steel blocker | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BBLKR | |
| standard rodent diet with 10 kcal% fat | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | D12450B | |
| sucrose powder | Roth | 4621.1 | for SPT |
Riferimenti
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