एक मुरीन मॉडल में इस्केमिया Reperperfusion चोट के बाद स्टेम सेल की विलंबित इंट्रामायोकार्डियल डिलीवरी
Summary
उपजी कोशिकाओं को लगातार मायोकार्डियल क्षति वाले व्यक्तियों के लिए संभावित उपचार के रूप में जांच की जाती है, हालांकि, घायल ऊतकों के भीतर उनकी कम व्यवहार्यता और प्रतिधारण उनकी दीर्घकालिक प्रभावकारिता को प्रभावित कर सकता है। इस पांडुलिपि में हम इस्केमिया रिपरफ्यूजन चोट के एक मुरीन मॉडल में स्टेम सेल डिलीवरी के लिए एक वैकल्पिक विधि का वर्णन करते हैं।
Abstract
मायोकार्डियल चोटों वाले व्यक्तियों में हृदय समारोह की वसूली के लिए स्टेम सेल (एससी) के उपयोग में महत्वपूर्ण रुचि है। सबसे अधिक, कार्डियक स्टेम सेल थेरेपी का अध्ययन अनुसूचित जाति को मायोकार्डियल चोट के प्रेरण के साथ समवर्ती रूप से वितरित करके किया जाता है। हालांकि, यह दृष्टिकोण दो महत्वपूर्ण सीमाएं प्रस्तुत करता है: प्रारंभिक शत्रुतापूर्ण समर्थक भड़काऊ इस्कीमिक वातावरण प्रत्यारोपित अनुसूचित जाति के अस्तित्व को प्रभावित कर सकता है, और यह उप-तकनीकीय इन्फेक्शन परिदृश्य का प्रतिनिधित्व नहीं करता है जहां अनुसूचित जाति का उपयोग किया जाएगा। यहां हम इस्केमिया-रिफ्यूजन इंजरी और मेसेंचिमल स्टेम सेल (एमएससी) की डिलिवरी को शामिल करने के लिए सर्जिकल प्रक्रियाओं की दो-भाग श्रृंखला का वर्णन करते हैं । स्टेम सेल प्रशासन की यह विधि प्रारंभिक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को दरकिनार करके क्षतिग्रस्त ऊतक के आसपास लंबी व्यवहार्यता और प्रतिधारण के लिए अनुमति दे सकती है। इस्केमिया रिपरफ्यूजन चोट का एक मॉडल चूहों में मेसेंचिमल स्टेम कोशिकाओं (3.0 x 105)के वितरण के साथ प्रेरित किया गया था, जो 7 दिन बाद संविलय रूप से व्यक्त सीएमवी प्रमोटर के तहत रिपोर्टर जीन जुगनू लूसिफ़ेरेस को व्यक्त करता था। जानवरों को क्रमशः चोट और कोशिकाओं के इंजेक्शन की पुष्टि के लिए अल्ट्रासाउंड और बायोल्यूमिनेसेंट इमेजिंग के माध्यम से चित्रित किया गया था। महत्वपूर्ण बात, अनुसूचित जाति के वितरण के लिए इस दो प्रक्रिया दृष्टिकोण प्रदर्शन करते समय कोई जोड़ा जटिलता दर थी । स्टेम सेल प्रशासन की यह विधि, सामूहिक रूप से अत्याधुनिक रिपोर्टर जीन के उपयोग के साथ, प्रारंभिक इस्केमिया की स्थिति में प्रत्यारोपित अनुसूचित जाति की व्यवहार्यता और प्रतिधारण के वीवो अध्ययन में अनुमति दे सकती है, जबकि प्रारंभिक समर्थक भड़काऊ प्रतिक्रिया को भी दरकिनार कर सकती है। संक्षेप में, हमने मायोकार्डियम में स्टेम कोशिकाओं की देरी से वितरण के लिए एक प्रोटोकॉल स्थापित किया, जिसका उपयोग क्षतिग्रस्त ऊतक के उत्थान को बढ़ावा देने में एक संभावित नए दृष्टिकोण के रूप में किया जा सकता है।
Introduction
हृदय रोग दुनिया भर में रुग्णता और मृत्यु दर का सबसे आम कारण बना हुआ है । कार्डियक इस्कीमिक घटनाओं को मायोकार्डियम और आसपास की कोशिकाओं के समग्र कार्य के लिए हानिकारक पाया गया है1. केवल ̴0.45-1.0% कार्डियोमायोसाइट्स हर साल मायोकार्डियल क्षति के बाद पुनर्जीवित होगा2। बढ़ती मांग और उपचार विकसित करने पर अंतर्निहित ध्यान देने के बावजूद, घायल ऊतकों के उत्थान में सहायता करने वाले उपचारों को स्थापित करना मुश्किल हो गया है और अभी भी आगे अनुकूलन3,,4,,5की आवश्यकता है। स्टेम सेल चिकित्सा एक इस्कीमिक घटना के बाद क्षतिग्रस्त ऊतक को फिर से जीवंत करने के लिए एक वैकल्पिक मार्ग के रूप में पेश किया गया है; हालांकि, इन चिकित्सा की उन्नति सीमित अस्तित्व और एक घायल क्षेत्र6.
इस्कीमिक घटना के बाद दिल के माइक्रोएनवायरमेंट को हाइपोक्सिक, प्रो-ऑक्सीडेंट और प्रो-भड़काऊ के रूप में चिह्नित किया जा सकता है, जो चिकित्सीय स्टेम कोशिकाओं के लिए शत्रुतापूर्ण परिस्थितियों को अस्तित्व7,,8के अनुकूल बनाने के लिए पेश करता है। चोट के बाद प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया शुरू हो जाती है, भोले लिम्फोसाइट्स, मैक्रोफेज, न्यूट्रोफिल और मस्तूल कोशिकाएं मरने वाली कोशिकाओं को हटाकर नुकसान की मरम्मत करने का प्रयास करती हैं और ऊतकरीमॉडलिंग 9,10,,11के लिए प्रक्रिया को मॉडुलन करती हैं।, इस्केमिया के बाद के पहले 3 दिनों के भीतर, क्षेत्र10,,12में न्यूट्रोफिल और मोनोसाइट्स की उच्च संख्या के साथ समर्थक भड़काऊ साइटोकिन्स की रिहाई के साथ सूजन अपने चरम पर है। 7 दिनों के बाद, बहुत सूजन थम गई है और रिपारेटिव कोशिकाओं में संक्रमण शुरू होता है, जब तक कि रीमॉडलिंग कैस्केड पूरा नहीं हो जाता, चूहों में लगभग14 दिन 13। हमारी शल्य चिकित्सा विधि इस्केमिया प्रतिरफ़ूक चोट के बाद चोटी जन्मजात प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को बाईपास करने के लिए मायोकार्डियम में जीवविज्ञान की शुरूआत के लिए एक संभावित वैकल्पिक दृष्टिकोण है। इसके साथ ही, यह उप-एक्यूट/क्रॉनिक इस्केमिया की स्थिति में किसी भी उपचार के अध्ययन के लिए अनुमति देगा जहां तीव्र मायोकार्डियल इंफेक्शन की तुलना में विचार करने के लिए विभिन्न चर हो सकते हैं ।
Protocol
Representative Results
Discussion
दुनिया भर में 85 मिलियन से अधिक लोग हृदय रोग से प्रभावित हैं3. इन इस्कीमिक घटनाओं की उच्च व्यापकता क्षतिग्रस्त ऊतकों के उत्थान को बढ़ावा देने के लिए वैकल्पिक उपचारों के आगे विकास और विस्तार की आ…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
कोई नहीं.
Materials
| 0.9% NaCl Irrigation, USP | Baxter | 0338-0048-04 | |
| 11×12" Press n' Seal surgical drape, autoclavable | SAI Infusion Technologies | PSS-SD | |
| 24G 3/4" IV catheter tube | Jelco | 4053 | |
| 28G x 1/2" 1mL allergy syringe | BD | 305500 | Injection of analgesic |
| 30G x 1/2" 3/10cc insulin syringe | Ulticare | 08222.0933.56 | Injection of stem cells |
| 6-0 S-29, 12" Vicryl suture | Ethicon | J556G | Intercostal, superficial muscle and skin layer incision closure |
| 9-0 BV100-4, 5" Ethilon suture | Ethicon | 2829G | Ligation of the LAD artery |
| Absorbent underpad | Thermo Fischer Scientific | 14-206-64 | For underneath the animal |
| Alcohol prep pads, 2 ply, medium | Coviden | 6818 | |
| Anti-fog face mask | Halyard | 49235 | |
| Bonn Strabismus scissors, curved, blunt | Fine Science Tools | 14085-09 | |
| Buprenorphine HCL SR LAB 1mg/ml, 5 ml | ZooPharm Pharmacy | Buprenorphine narcotic analgesic formulated in a polymer that slows absorption extending duration of action (72 hours duration of activity). | |
| Castroviejo needle holders, curved | Fine Science Tools | 12061-01 | |
| Curity sterile gauze sponges | Coviden | 397310 | |
| Delicate suture tying forceps, 45 angle bent | Fine Science Tools | 11063-07 | |
| Electric Razor | Wahl | Fur removal | |
| Isoflurane 100 ml | Cardinal Health | PI23238 | Anesthetic |
| Lab coat | |||
| Monoject 1 mL hypodermic syringe | Coviden | 8881501400 | |
| Moria iris forceps, curved, serrated (x2) | Fine Science Tools | 11370-31 | |
| Moria speculum retractor | Fine Science Tools | 17370-53 | |
| Mouse endotracheal intubation kit | Kent Scientific | ||
| Nair depilatory cream | Johnson & Johnson | Fur removal | |
| Optixcare eye lube plus | Aventix | Sterile ocular lubricant | |
| Physiosuite ventilator | Kent Scientific | ||
| PolyE Polyethylene tubing | Harvard Apparatus | 72-0191 | Temporary compression of LAD artery |
| Povidone-iodine swabs | PDI | S41125 | |
| Scalpel, 10-blade | Bard-Parker | 371610 | |
| Sterile 3" cotton tipped applicators | Cardinal Health | C15055-003 | |
| Sterile 6" tapered cotton tip applicators | Puritan | 25-826-5WC | |
| Sterile gloves | Cardinal Health | N8830 | |
| Sterilization pouches | Medline | MPP100525GS | |
| Surgery cap | |||
| Surgical Microscope | Leica | M125 | |
| Suture tying forceps, straight (x2) | Fine Science Tools | 10825-10 | |
| Transpore surgical tape | 3M | 1527-1 | |
| Triple antibiotic ointment | G&W Laboratories | 11-2683ILNC2 | Topical application to prevent infection |
| Vannas-Tübingen Spring Scissors, curved | Fine Science Tools | 15004-08 | |
| Vetflo vaporizer | Kent Scientific |
Riferimenti
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