Summary

Constrição aórtica transversal operacional com sutura absorvível para obter hipertrofia miocárica transitória

Published: September 09, 2020
doi:

Summary

Este protocolo apresenta um método aprimorado para obter hipertrofia miocárdia transitória com sutura absorvível, simulando diminuição da hipertrofia ventricular esquerda após a remoção da sobrecarga de pressão. Pode ser valioso para os estudos sobre pré-condicionamento hipertrófico do miocárdio.

Abstract

Com base em constrições aórticas transversais duas vezes (TACs) em camundongos, é comprovado que o pré-condicionamento hipertrófico do miocárdio (MHP) poderia atenuar a hipertrofia cardiomiocófica e retardar a progressão para insuficiência cardíaca. Para os novatos, no entanto, o modelo MHP geralmente é bastante difícil de estabelecer devido aos obstáculos técnicos na operação do ventilador, abertura do peito repetidamente e sangramento causado pela desbandada. Para facilitar esse modelo, para aumentar a taxa de sucesso cirúrgico e reduzir a incidência de sangramento, mudamos para suturas absorvíveis para o primeiro TAC penteando com uma técnica livre de ventiladores. Usando uma sutura absorvível de 2 semanas, demonstramos que este procedimento pode causar hipertrofia miocárdia significativa em 2 semanas; e 4 semanas após a cirurgia, a hipertrofia do miocárdio foi quase completamente regredida à linha de base. Usando este protocolo, os operadores poderiam dominar o modelo MHP facilmente com uma menor mortalidade operacional.

Introduction

O pré-condicionamento isquêmico é um fenômeno que induz breves episódios não letais de isquemia e reperfusão ao coração e tem a capacidade de reduzir drasticamente a lesão do miocárdio1. Dadas as óbvias implicações clínicas do pré-condicionamento isquêmico, como limitar o infarto do miocárdio tamanho2 e suprimir as taquiarritmias ventriculares após a revascularização do miocárdio3,tem havido muitas pesquisas para dissecar os mecanismos subjacentes aos efeitos cardioprotetos induzidos pelo pré-condicionamento4,5. Em contraste, outros tipos não isquêmicos de pré-condicionamento receberam relativamente pouca atenção. A hipertrofia cardíaca pode ser amenada em pacientes com estenose aórtica submetida à substituição da válvula aórtica6. Onde quer que exista o estado de hipertrofia patológica do miocárdio, o princípio do pré-condicionamento raramente é relatado.

Em 1991, Rockman et al. estabeleceram em primeiro lugar um modelo de rato de hipertrofia ventricular esquerda por constrição aórtica transversa (TAC)7. Ao operar tac duas vezes em camundongos, já provamos anteriormente que o pré-condicionamento hipertrófico do miocárdio (MHP) leva à estimulação hipertrófica transitória no coração, tornando assim o coração mais resistente ao estresse hipertrófico sustentado no futuro8. As características do modelo MHP foram validadas por biomicroscópio de ultrassom e avaliação hemodinâmica9. Os principais pontos na construção do modelo foram realizar a toracotomia três vezes, TAC por uma semana, debandada por uma semana, e TAC secundário por 6 semanas. No entanto, a desbandada pode causar sangramento, o que dificultou ser dominado por novatos e difícil de ser popularizado. Além disso, também é um desafio técnico entubar ratos. Intubação inadequada pode causar lesões traqueais, pneumotórax e até mesmo morte em camundongos. Por isso, é necessário e valioso melhorar alguns procedimentos ao construir o modelo MHP.

Para reduzir a dificuldade do modelo e aumentar seu sucesso, mudamos para suturas absorvíveis para o primeiro TAC e monitoramos o sucesso do modelo medindo o gradiente de pressão através da constrição aórtica sob ecocardiografia10. Com base em nosso experimento preliminar, seria difícil induzir hipertrofia mofárdia suficiente em camundongos com gradiente de baixa pressão, enquanto camundongos com gradiente de alta pressão desenvolveriam insuficiência cardíaca aguda ou até mesmo morreriam. O gradiente de pressão ideal para o modelo varia de 40 a 80 mmHg11. Além disso, este experimento não contava com um ventilador, o que poderia efetivamente evitar manipulação técnica associada ao ventilador e lesão12.

Protocol

Todos os procedimentos foram realizados seguindo as diretrizes do Cuidado e Uso de Animais de Laboratório publicados pelos Institutos Nacionais de Saúde dos EUA (Publicação NIH nº 85-23, revisado em 1996). Os camundongos machos C57BL/6J (8-10 semanas, 20-25 g) foram fornecidos pelo Centro Animal da Universidade Médica do Sul. 1. Preparação pré-operatória Aperte a ponta de uma agulha de 25 G com um suporte de agulha e corte-a com um objeto duro como o suporte. …

Representative Results

Neste estudo, dividimos aleatoriamente 45 camundongos em três grupos, o sham, o grupo de sutura de seda e o grupo de sutura absorvível (o número de cada grupo em D0 (linha de base), D14 e D28 após tac foi 15, 10 e 5, respectivamente). Em D7, D14, D21 e D28 após a cirurgia, a velocidade de pico constrito foi determinada pela ecocardiografia. Descobrimos que a velocidade de fluxo sanguíneo na constrição ainda era superior a 3.000 mm/s na segunda semana após o TAC, embora uma sutura absorvível tivesse sido usada p…

Discussion

Ainda há uma área muito pouco explorada no pré-condicionamento cardíaco não isquêmico. Com base em nossos estudos anteriores, passamos a usar suturas absorvíveis para melhorar o modelo de pré-condicionamento hipertrófico do miocárdio.

Em relatórios anteriores, muitos investigadores usaram sutura de seda para restringir o arco aórtico8,14,15. A sutura de seda estava facilmente disponível e…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabalho foi apoiado por bolsas da Fundação Nacional de Ciência Natural da China (81770271; de Y, Liao), dos Fundos Conjuntos da Fundação Nacional de Ciência Natural da China (U1908205; de Y, Liao), e dos Projetos Municipais de Planejamento de Tecnologia Científica de Guangzhou (201804020083; para o Dr. Liao).

Materials

Absorbable suture (5-0) Shandong Kang Lida Medical Products Co., Ltd 5-0 Ligation
Animal ultrasound system VEVO2100 Visual Sonic VEVO2100 Echocardiography
Cold light illuminator Olympus ILD-2 Light
Heat pad- thermostatic surgical system (ALC-HTP-S1) SHANGHAI ALCOTT BIOTECH CO ALC-HTP-S1 Heating
Isoflurane RWD life science R510-22 Inhalant anaesthesia
Matrx VIP 3000 Isofurane Vaporizer Midmark Corporation VIP 3000 Anesthetization
Medical nylon suture (5-0) Ningbo Medical Needle Co. 5-0 Close the skin
Pentobarbital sodium salt Merck 25MG Anesthetization
Precision electronic balance Denver Instrument TB-114 Weighing sensor
Self-made spacer 25-gauge needle
Silk suture (5-0) Yangzhou Yuankang Medical Devices Co., Ltd. 5-0 Ligation
Small animal microsurgery equipment Napox MA-65 Surgical instruments
Transmission Gel Guang Gong pai 250ML Echocardiography
Veet hair removal cream Reckitt Benchiser RQ/B 33 Type 2 Remove hair of mice
Vertical automatic electrothermal pressure steam sterilizer Hefei Huatai Medical Equipment Co. LX-B50L Auto clean the surgical instruments

Riferimenti

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Citazione di questo articolo
Lao, Y., Zheng, C., Zhu, H., Lin, H., Huang, X., Liao, Y. Operating Transverse Aortic Constriction with Absorbable Suture to Obtain Transient Myocardial Hypertrophy. J. Vis. Exp. (163), e61686, doi:10.3791/61686 (2020).

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