Summary

哮喘鼠模型中的针灸

Published: August 25, 2020
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Summary

高平台可以不受限制地修复大鼠,并在针灸操作期间完全暴露背部的穴位。本文描述了制造高平台的方法,建立了哮喘的老鼠模型,并使用非侵入性和实时全身全息摄影(WBP)系统测量呼吸功能的变化。

Abstract

高平台可以不受限制地修复大鼠,并在针灸操作期间完全暴露背部的穴位。本文描述了制造高平台的方法,建立了哮喘的老鼠模型,并使用非侵入性和实时全身全息摄影(WBP)系统测量呼吸功能的变化。

Introduction

哮喘是一种慢性疾病,其特征是支气管收缩和气道反应过度。全世界约有3.394亿人被诊断患有哮喘2。全球哮喘患病率正在上升,预计未来十年将新增1亿例吸入皮质类固醇和长效β 2-agonists不能有效地控制所有患者的症状4。因此,使用针灸等替代疗法治疗哮喘已受到越来越多的关注。治疗哮喘的有效方法是针GV14(大泽),双边BL12(丰门)和双边BL13(飞舒)6。针灸显著降低过敏性哮喘患者唾液和鼻分泌物中分泌免疫球蛋白A(SIgA)的水平,减少周围血液中嗜血球菌的计数,总有效率为85%6。慢性哮喘小鼠的BL13和ST36(Zusanli)针灸可降低IL-17水平40%,与椭圆形布明(OVA)组相比,平滑肌肉厚度降低33%,从而缓解炎症症状7、8。然而,哮喘针灸治疗的机制并不完全清楚。

动物模型是哮喘研究的重要工具9,因为动物模型可用于持续测量呼吸功能,以评估哮喘治疗10的有效性。同时,哮喘病理生理学的研究需要测试样本,包括气管、肺和支气管厕所的样本,以验证关键因素11水平的变化。哮喘的老鼠模型通常用于评估哮喘病理生理学,因为它们产生持久的气道反应,并显示即时和后期气道反应12。然而,由于反复的实验刺激,大鼠往往变得易怒。因此,需要一种合适的方法来修复老鼠。常用的老鼠固定方法包括麻醉和结合13。虽然麻醉方法提供了更好的暴露穴位,它可能会影响神经传导,并最终影响实验结果14。结合方法不会诱导与麻醉相同的生理效果,但受约束的老鼠会经历骨骼肌肉紧张。此外,针头不能轻易到达指定位置15。在这里,我们引入了一个高平台,可用于修复大鼠,而无需限制它们,并充分暴露背面的穴位。在针灸管理期间,大鼠可以放在高平台上。高平台只能容纳老鼠,因为它被放置在离地面一定距离的地方,老鼠不会移动,因为害怕高度16。

本文详细描述了高平台的制造、哮喘鼠模型的建立、高平台上需要大鼠的操作以及使用全身全息摄影(WBP)系统测量呼吸功能。

Protocol

所有动物实验均经上海中医药大学动物实验伦理委员会审核通过(伦理许可号PZSHUTCM190308020)。 1. 高平台的制造 将支撑装置的长度和宽度设置为 86 厘米 x 17 厘米(图 1)。 垂直修复连接设备以连接到支持设备。连接装置应长约30厘米,以防止大鼠跑到高平台的顶部表面,宽度为14厘米。 将水平踏板(5 厘?…

Representative Results

在GV14、双边BL12和双边BL13点进行针灸时,大鼠保持一个容易的位置。老鼠只能把头扭到外面,不能扭到里面,因为一个方向被木板挡住了(图5)。 随着甲基苯甲酰浓度的增加,Penh 呈现出上升趋势,增长率逐渐增加。浓度为3.125毫克/千升、6.25毫克/千升、12.5毫克/mL、25毫克/mL和50毫克/千升, Penh 增长 18.40% ± 10.70%, 27.55% ± 26.30%, 88.10% ± 45.63 %,427.60%±17…

Discussion

本研究中使用的GV14、双边BL12和双边BL13穴位位于背面,因此高平台适合固定大鼠。在其他研究中,应根据穴位15的位置选择适当的固定方法。对于腹部的穴位,大鼠可以向下放置在一个黑色的圆锥体(类似于面包师使用的糕点袋)17。链条连接到约束锥固定,大鼠的后腿也固定。这样,动物身体的前部被牢牢地固定在圆锥体中,而腹部和背部则暴露在外。对于腿…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

这项工作得到了中国国家自然科学基金委员会(第81922076号、81973951号、81873373号)、上海市合作创新建设项目(第81922076号)的支持。ZYJKFW201811010,ZYJKFW201701005)。

Materials

0.3 mm x 13.0 mm acupuncture needle China Suzhou Medical Device Factory
Al(OH)3 American Thermo 77161
Compression nebulizer Jiangsu Lude Medical Electronics Co., Ltd. NB-212C
Fine Pointe V2.0 American Buxco
Laboratory gas drying unit American Drierite 26800
Methacholine American Sigma MKCF6054
Ovalbumin American Sigma A5503-25G
Phosphate Buffer solution (1x) Gelifesciences SH30256.01
Seal box IRIS Corporation of Japan
Whole-body plethysmography respiratory function measurement system American Buxco

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Citazione di questo articolo
Zhou, D., Zhang, G., Zhao, Q., Cheng, M., Lu, J., Wang, Y., Xu, Y., Chen, Y., Yang, Y., Yin, L. Acupuncture in a Rat Model of Asthma. J. Vis. Exp. (162), e61762, doi:10.3791/61762 (2020).

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