Summary

Akupunktur i en rotte model af astma

Published: August 25, 2020
doi:

Summary

En høj platform kan rette rotter uden begrænsning og helt udsætte akupunkterne på bagsiden under akupunkturmanipulation. Denne artikel beskriver metoder til fremstilling af den høje platform, etablerer en rottemodel af astma og måler ændringer i åndedrætsfunktionen ved hjælp af et ikke-invasivt og realtids fuldkrops plethysmografi (WBP) system.

Abstract

En høj platform kan rette rotter uden begrænsning og helt udsætte akupunkterne på bagsiden under akupunkturmanipulation. Denne artikel beskriver metoder til fremstilling af den høje platform, etablerer en rottemodel af astma og måler ændringer i åndedrætsfunktionen ved hjælp af et ikke-invasivt og realtids fuldkrops plethysmografi (WBP) system.

Introduction

Astma er en kronisk sygdom karakteriseret ved bronchoconstriction og luftveje hyper-lydhørhed1. Ca. 339.400 tusind mennesker verden over er diagnosticeret med astma2. Forekomsten af astma er stigende globalt, med 100 millioner nye tilfælde forventes i det næste årti3. Inhalerede kortikosteroider og langtidsvirkende β2-agonisterkontrollerer ikke effektivt symptomerne på alle patienter4. Derfor har brugen af alternative behandlingsformer såsom akupunktur til behandling af astma fået øget opmærksomhed5. En effektiv metode til behandling af astma er at nål GV14 (Dazhui), bilateral BL12 (Fengmen) og bilateral BL13 (Feishu)6. Akupunktur reducerer niveauet af sekretorisk immunoglobulin A (SIgA) i spyt- og næsesekretioner hos patienter med allergisk astma og reducerer perifere blodeosinofiler med en samlet effektiv sats på 85%6. Akupunktur ved BL13 og ST36 (Zusanli) hos mus med kronisk astma reducerer niveauet af IL-17 med 40% og reducerer den glatte muskeltykkelse med 33% sammenlignet med ovalbumingruppen (OVA) og lindrer dermed inflammationssymptomer7,8. Men mekanismen for akupunktur behandling for astma er ikke helt klart.

Dyremodeller er et vigtigt redskab til astmaforskning9, fordi dyremodellen kan bruges til kontinuerlig måling af åndedrætsfunktion til at vurdere effektiviteten af astmabehandlingen10. I mellemtiden kræver undersøgelser af astmas patofysiologi testprøver, herunder prøver fra luftrøret, lungerne og bronchoalveolar-toilettet for at verificere ændringer i niveauerne af nøglefaktorer11. Rottemodeller af astma er almindeligt anvendt til at vurdere astma patofysiologi, fordi de producerer langvarige luftvejsresponser og viser øjeblikkelige og sene luftvejsresponser12. Men på grund af gentagen eksperimentel stimulation bliver rotterne ofte irritabel. Derfor er der brug for en passende metode til at fikse rotter. Almindeligt anvendte metoder til rottefiksering omfatter anæstesi og binding13. Selvom anæstesimetoden giver bedre eksponering af akupunkterne, kan det påvirke nerveledningen og i sidste ende påvirke de eksperimentelle resultater14. Bindingsmetoden fremkalder ikke de samme fysiologiske virkninger som anæstesi, men tilbageholdte rotter vil opleve skeletmuskelspændinger. Nålen kan heller ikke nemt nå den angivne position15. Her introducerer vi en høj platform, der kan bruges til at fikse rotter uden at begrænse dem og fuldt ud udsætte akupunkterne på bagsiden. Rotterne kan placeres på den høje platform under administration af akupunktur. Den høje platform er kun i stand til at rumme rotten, mens den står, og da den er placeret en vis afstand fra jorden, vil rotterne ikke bevæge sig på grund af frygt for højder16.

Denne artikel beskriver i detaljer fremstillingen af den høje platform, etableringen af en rottemodel af astma, driften af at have brug for en rotte på den høje platform og måling af åndedrætsfunktion ved hjælp af et helkrops plethysmografisystem (WBP).

Protocol

Alle dyreforsøg blev gennemgået og godkendt af Komitéen for Etik af Dyreforsøg på Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (Etisk clearance nummer PZSHUTCM190308020). 1. Fremstilling af den høje platform Anstil længden og bredden af støtteanordningen til 86 cm x 17 cm (Figur 1). Fastgør tilslutningsenheden lodret til støtteenheden. Tilslutningsenheden skal være ca. 30 cm lang for at forhi…

Representative Results

Med akupunktur på GV14, bilaterale BL12 og bilaterale BL13-punkter opretholder rotten en udsat position. Rotten kan kun vride hovedet til ydersiden og ikke indersiden, fordi en retning er blokeret med et træbræt(Figur 5). Efterhånden som methacholinkoncentrationen steg, viser Penh en stigende tendens, og vækstraten stiger gradvist. Ved koncentrationer på 3,125 mg/mL, 6,25 mg/mL, 12,5 mg/mL, 25 mg/mL og 50 mg/mL steg Penh med 18,40% ± 10,70%, 27,55% ± 26,30…

Discussion

De GV14-, bilaterale BL12- og bilaterale BL13-akkupunkter, der anvendes i denne undersøgelse, er placeret på bagsiden, og den høje platform er således velegnet til fastgørelse af rotter. I andre undersøgelser bør der vælges en passende fikseringsmetode i overensstemmelse med akupunkternes position15. For akupunkter på maven kan rotten placeres nedad i en sort kegle (svarende til en konditorpose, der bruges af bagere)17. En kæde er fastgjort til fastholdelseskegler…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dette arbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China (nr. 81922076, 81973951, 81873373), Byggeprojekt for samarbejdsinnovation i Shanghai (nr. ZYJKFW201811010, ZYJKFW201701005).

Materials

0.3 mm x 13.0 mm acupuncture needle China Suzhou Medical Device Factory
Al(OH)3 American Thermo 77161
Compression nebulizer Jiangsu Lude Medical Electronics Co., Ltd. NB-212C
Fine Pointe V2.0 American Buxco
Laboratory gas drying unit American Drierite 26800
Methacholine American Sigma MKCF6054
Ovalbumin American Sigma A5503-25G
Phosphate Buffer solution (1x) Gelifesciences SH30256.01
Seal box IRIS Corporation of Japan
Whole-body plethysmography respiratory function measurement system American Buxco

Riferimenti

  1. Papi, A., Brightling, C., Pedersen, S. E., Reddel, H. K. Asthma. Lancet. 391 (10122), 783-800 (2018).
  2. . Global strategy for asthma management and prevention Available from: https://ginasthma.org/gina-reports/ (2019)
  3. Enilari, O., Sinha, S. The Global Impact of Asthma in Adult Populations. Annals of Global Health. 85 (1), (2019).
  4. . Global strategy for asthma management and prevention Available from: https://ginasthma.org/gina-reports/ (2020)
  5. Zhuang, Y., Xing, J. J., Li, J., Zeng, B. Y., Liang, F. R. History of acupuncture research. International Review of Neurobiology. 111, 1-23 (2013).
  6. Yang, Y. Q., et al. Considerations for use of acupuncture as supplemental therapy for patients with allergic asthma. Clinical Reviews in Allergy & Immunology. 44 (3), 254-261 (2013).
  7. Nurwati, I., et al. Reduction of interleukin-17 level by acupuncture at Feishu (BL13) is strengthened by acupuncture at Zusanli (ST36) in a mouse model of chronic asthma: An experimental study. Medical Acupuncture. 27 (4), 278-282 (2015).
  8. Nurwati, I., et al. Improvement in inflammation and airway remodelling after acupuncture at BL13 and ST36 in a mouse model of chronic asthma. Acupuncture in Medicine. 37 (4), 228-236 (2019).
  9. Reddy, A. T., Lakshmi, S. P., Reddy, R. C. Murine model of allergen induced asthma. Journal of Visualized Experiments. (63), e3771 (2012).
  10. Zhou, D. D., et al. Metallothionein-2 is associated with the amelioration of asthmatic pulmonary function by acupuncture through protein phosphorylation. Biomedicine & Pharmacotherapy. 123, 109785 (2020).
  11. Yin, L. M., et al. Transgelin-2 as a therapeutic target for asthmatic pulmonary resistance. Science Translational Medicine. 10 (427), (2018).
  12. Shin, Y. S., Takeda, K., Gelfand, E. W. Understanding asthma using animal models. Allergy Asthma & Immunology Research. 1 (1), 10-18 (2009).
  13. Cui, K. M., et al. Electro-acupuncture relieves chronic visceral hyperalgesia in rats. Neuroscience Letters. 376 (1), 20-23 (2005).
  14. Tobin, J. R., Martin, L. D., Breslow, M. J., Traystman, R. J. Selective anesthetic inhibition of brain nitric oxide synthase. Anesthesiology. 81 (5), 1264-1269 (1994).
  15. Dimitrov, N., Sivrev, D., Atanasova, D. Method of rat immobilization during experimental acupuncture. Scripta Scientifica Medica. 45, 105-108 (2013).
  16. Aguilar, R., et al. emotional reactivity and fear of heights: a factor analytic map from a large F(2) intercross of Roman rat strains. Brain Research Bulletin. 57 (2), 17-26 (2002).
  17. Lai, X., et al. Proteomic response to acupuncture treatment in spontaneously hypertensive rats. PloS One. 7 (9), 44216 (2012).
  18. Niu, C., et al. A novel uni-acupoint electroacupuncture stimulation method for pain relief. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2011, 209879 (2011).
  19. McFadden, E. R., Luparello, T., Lyons, H. A., Bleecker, E. The mechanism of action of suggestion in the induction of acute asthma attacks. Psychosomatic Medicine. 31 (2), 134-143 (1969).
  20. Savov, J. D., et al. Ozone-induced acute pulmonary injury in inbred mouse strains. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 31 (1), 69-77 (2004).
check_url/it/61762?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Zhou, D., Zhang, G., Zhao, Q., Cheng, M., Lu, J., Wang, Y., Xu, Y., Chen, Y., Yang, Y., Yin, L. Acupuncture in a Rat Model of Asthma. J. Vis. Exp. (162), e61762, doi:10.3791/61762 (2020).

View Video