Summary

Acupunctuur in een Rattenmodel van Astma

Published: August 25, 2020
doi:

Summary

Een hoog platform kan ratten zonder beperking repareren en de acupunten op de rug volledig blootleggen tijdens acupunctuurmanipulatie. Dit artikel beschrijft methoden voor de fabricage van het hoge platform, stelt een rattenmodel van astma vast en meet veranderingen in de ademhalingsfunctie met behulp van een niet-invasief en real-time plethysmografiesysteem voor het hele lichaam (WBP).

Abstract

Een hoog platform kan ratten zonder beperking repareren en de acupunten op de rug volledig blootleggen tijdens acupunctuurmanipulatie. Dit artikel beschrijft methoden voor de fabricage van het hoge platform, stelt een rattenmodel van astma vast en meet veranderingen in de ademhalingsfunctie met behulp van een niet-invasief en real-time plethysmografiesysteem voor het hele lichaam (WBP).

Introduction

Astma is een chronische ziekte die wordt gekenmerkt door bronchoconstrictie en hyperresponsiviteit van de luchtwegen1. Wereldwijd worden ongeveer 339,4 miljoen mensen gediagnosticeerd met astma2. De prevalentie van astma neemt wereldwijd toe, met 100 miljoen nieuwe gevallen verwacht in het komende decennium3. Inhalatiecorticosteroïden en langwerkende β2-agonisten beheersen de symptomen van alle patiënten niet effectief4. Daarom heeft het gebruik van alternatieve therapieën zoals acupunctuur voor de behandeling van astma meer aandachtgekregen 5. Een effectieve methode voor de behandeling van astma is naald GV14 (Dazhui), bilaterale BL12 (Fengmen) en bilaterale BL13 (Feishu)6. Acupunctuur vermindert aanzienlijk de niveaus van secretoire immunoglobuline A (SIgA) in het speeksel en neusafscheidingen van patiënten met allergisch astma en vermindert het aantal eosinofielen in het perifere bloed met een totale effectieve snelheid van 85%6. Acupunctuur bij BL13 en ST36 (Zusanli) bij muizen met chronisch astma verlaagt het niveau van IL-17 met 40% en vermindert de gladde spierdikte met 33% in vergelijking met die van de ovalbumine (OVA) groep, waardoor ontstekingsverschijnselen7,8worden verlicht . Het mechanisme van acupunctuurbehandeling voor astma is echter niet helemaal duidelijk.

Diermodellen zijn een belangrijk hulpmiddel voor astmaonderzoek9 omdat het diermodel kan worden gebruikt voor de continue meting van de ademhalingsfunctie om de effectiviteit van de astmabehandeling te beoordelen10. Ondertussen vereisen studies van de pathofysiologie van astma testmonsters, waaronder monsters van de luchtpijp, long en bronchoalveolaire lavage om veranderingen in de niveaus van belangrijke factoren te verifiëren11. Rattenmodellen van astma worden vaak gebruikt om astmapathofysiologie te beoordelen omdat ze langdurige luchtwegreacties produceren en onmiddellijke en late luchtwegreacties vertonen12. Door herhaalde experimentele stimulatie worden de ratten echter vaak prikkelbaar. Daarom is een geschikte methode nodig om ratten te repareren. Veelgebruikte methoden voor rattenfixatie zijn anesthesie en binding13. Hoewel de anesthesiemethode zorgt voor een betere blootstelling van de acupunten, kan het de zenuwgeleiding beïnvloeden en uiteindelijk de experimentele resultaten beïnvloeden14. De bindmethode induceert niet dezelfde fysiologische effecten als anesthesie, maar ingehouden ratten zullen skeletspierspanning ervaren. Ook kan de naald niet gemakkelijk de aangegeven positie bereiken15. Hier introduceren we een hoog platform dat kan worden gebruikt om ratten te repareren zonder ze te beperken en de acupunten op de rug volledig bloot te leggen. De ratten kunnen tijdens de toediening van acupunctuur op het hoge platform worden geplaatst. Het hoge platform is alleen geschikt voor de rat terwijl hij staat, en omdat hij op een bepaalde afstand van de grond wordt geplaatst, zullen de ratten niet bewegen vanwege hoogtevrees16.

Dit artikel beschrijft in detail de fabricage van het hoge platform, de vaststelling van een rattenmodel van astma, de werking van het needling van een rat op het hoge platform en de meting van de ademhalingsfunctie met behulp van een whole-body plethysmography (WBP) systeem.

Protocol

Alle dierproeven werden beoordeeld en goedgekeurd door de Commissie ethiek van dierproeven van de Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (ethisch klaringsnummer PZSHUTCM190308020). 1. Fabricage van het hoge platform Stel de lengte en breedte van het steunapparaat in op 86 cm x 17 cm (afbeelding 1). Bevestig het verbindingsapparaat verticaal aan het ondersteuningsapparaat. Het verbindingsapparaat m…

Representative Results

Met acupunctuur op de GV14, bilaterale BL12 en bilaterale BL13 punten behoudt de rat een gevoelige positie. De rat kan zijn kop alleen naar buiten draaien en niet naar binnen omdat één richting is geblokkeerd met een houten plank (figuur 5). Naarmate de methacholineconcentratie toenam, vertoont Penh een stijgende trend en neemt de groei geleidelijk toe. Bij concentraties van 3,125 mg/ml, 6,25 mg/ml, 12,5 mg/ml, 25 mg/ml en 50 mg/ml, Penh steeg met 18,40% ± 10,7…

Discussion

De GV14, bilaterale BL12 en bilaterale BL13 acupoints die in deze studie worden gebruikt, bevinden zich aan de achterkant, en dus is het hoge platform geschikt voor het fixeren van ratten. In andere studies moet een adequate fixatiemethode worden gekozen op basis van de positie van de acupunten15. Voor acupunten op de buik kan de rat naar beneden worden geplaatst in een zwarte kegel (vergelijkbaar met een gebakzak die door bakkers wordt gebruikt)17. Een ketting is bevestigd…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dit werk werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (nr. 81922076, 81973951, 81873373), Bouwproject van collaboratieve innovatie van Shanghai (nr. ZYJKFW201811010, ZYJKFW201701005).

Materials

0.3 mm x 13.0 mm acupuncture needle China Suzhou Medical Device Factory
Al(OH)3 American Thermo 77161
Compression nebulizer Jiangsu Lude Medical Electronics Co., Ltd. NB-212C
Fine Pointe V2.0 American Buxco
Laboratory gas drying unit American Drierite 26800
Methacholine American Sigma MKCF6054
Ovalbumin American Sigma A5503-25G
Phosphate Buffer solution (1x) Gelifesciences SH30256.01
Seal box IRIS Corporation of Japan
Whole-body plethysmography respiratory function measurement system American Buxco

Riferimenti

  1. Papi, A., Brightling, C., Pedersen, S. E., Reddel, H. K. Asthma. Lancet. 391 (10122), 783-800 (2018).
  2. . Global strategy for asthma management and prevention Available from: https://ginasthma.org/gina-reports/ (2019)
  3. Enilari, O., Sinha, S. The Global Impact of Asthma in Adult Populations. Annals of Global Health. 85 (1), (2019).
  4. . Global strategy for asthma management and prevention Available from: https://ginasthma.org/gina-reports/ (2020)
  5. Zhuang, Y., Xing, J. J., Li, J., Zeng, B. Y., Liang, F. R. History of acupuncture research. International Review of Neurobiology. 111, 1-23 (2013).
  6. Yang, Y. Q., et al. Considerations for use of acupuncture as supplemental therapy for patients with allergic asthma. Clinical Reviews in Allergy & Immunology. 44 (3), 254-261 (2013).
  7. Nurwati, I., et al. Reduction of interleukin-17 level by acupuncture at Feishu (BL13) is strengthened by acupuncture at Zusanli (ST36) in a mouse model of chronic asthma: An experimental study. Medical Acupuncture. 27 (4), 278-282 (2015).
  8. Nurwati, I., et al. Improvement in inflammation and airway remodelling after acupuncture at BL13 and ST36 in a mouse model of chronic asthma. Acupuncture in Medicine. 37 (4), 228-236 (2019).
  9. Reddy, A. T., Lakshmi, S. P., Reddy, R. C. Murine model of allergen induced asthma. Journal of Visualized Experiments. (63), e3771 (2012).
  10. Zhou, D. D., et al. Metallothionein-2 is associated with the amelioration of asthmatic pulmonary function by acupuncture through protein phosphorylation. Biomedicine & Pharmacotherapy. 123, 109785 (2020).
  11. Yin, L. M., et al. Transgelin-2 as a therapeutic target for asthmatic pulmonary resistance. Science Translational Medicine. 10 (427), (2018).
  12. Shin, Y. S., Takeda, K., Gelfand, E. W. Understanding asthma using animal models. Allergy Asthma & Immunology Research. 1 (1), 10-18 (2009).
  13. Cui, K. M., et al. Electro-acupuncture relieves chronic visceral hyperalgesia in rats. Neuroscience Letters. 376 (1), 20-23 (2005).
  14. Tobin, J. R., Martin, L. D., Breslow, M. J., Traystman, R. J. Selective anesthetic inhibition of brain nitric oxide synthase. Anesthesiology. 81 (5), 1264-1269 (1994).
  15. Dimitrov, N., Sivrev, D., Atanasova, D. Method of rat immobilization during experimental acupuncture. Scripta Scientifica Medica. 45, 105-108 (2013).
  16. Aguilar, R., et al. emotional reactivity and fear of heights: a factor analytic map from a large F(2) intercross of Roman rat strains. Brain Research Bulletin. 57 (2), 17-26 (2002).
  17. Lai, X., et al. Proteomic response to acupuncture treatment in spontaneously hypertensive rats. PloS One. 7 (9), 44216 (2012).
  18. Niu, C., et al. A novel uni-acupoint electroacupuncture stimulation method for pain relief. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2011, 209879 (2011).
  19. McFadden, E. R., Luparello, T., Lyons, H. A., Bleecker, E. The mechanism of action of suggestion in the induction of acute asthma attacks. Psychosomatic Medicine. 31 (2), 134-143 (1969).
  20. Savov, J. D., et al. Ozone-induced acute pulmonary injury in inbred mouse strains. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 31 (1), 69-77 (2004).
check_url/it/61762?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Zhou, D., Zhang, G., Zhao, Q., Cheng, M., Lu, J., Wang, Y., Xu, Y., Chen, Y., Yang, Y., Yin, L. Acupuncture in a Rat Model of Asthma. J. Vis. Exp. (162), e61762, doi:10.3791/61762 (2020).

View Video