שחזור מעגל הדם במודל השתלת לב של עכבר בטן
Summary
טכניקה חדשנית לשחזור מעגל הדם במודל הטרוטופי של השתלת לב עכבר בטן מודגמת.
Abstract
הטכניקה הכירורגית של השתלת לב בטן הטרוטופית בעכברים היא מודל סטנדרטי למחקר באימונולוגיה של השתלות. כאן, הטכניקה הוקמה לשחזור מעגל הדם שונה במודל השתלת לב בטן הטרוטופי מוצג. שיטה זו משתמשת vena cava נחותים intrathoracic (IIVC) במקום עורק הריאה של הלב התורם עבור anastomosis כדי הווריד הנבוב הנחות של המטופל. זה להקל ולשפר את שיעורי ההצלחה עבור השתלת לב הבטן בעכברים.
Introduction
הטכניקה הכירורגית של השתלת לב בטן הטרוטופית בעכברים מייצגת מודל סטנדרטי למחקר באימונולוגיה של השתלות1,2,3. עם זאת, זה מאוד מאתגר לבצע וזה מסבך הגבלה לשימוש הנרחב של מודל זה4,5.
בהשתלת לב עכבר מסורתית (THTx), העורקים התורמים ואבי העורקים הבטן של המטופל הם anastomosed בעוד עורק הריאה הוא anastomosed למקבל ורידים נחותים6,7,8.
בטכניקה זו של השתלת לב עכבר שונה, העורקים התורמים מווסתים לאבי העורקים הבטן של המטופל והתורם IIVC הוא anastomosed למקבל ורידיםנחותים (3,4,6) ( איור2 ואיור 3).
Protocol
Representative Results
Discussion
הטכניקה הכירורגית של השתלת לב בטן הטרוטופית בעכברים היא מאתגרת מאוד וזה מסבך הגבלה לשימוש הנרחב במודל זה.
אחד החסרונות של הטכניקה הקונבנציונלית הוא האורך המגביל של עורק הריאה של התורם. אורכו בדרך כלל כ-2 מ”מ, ואילו אורך ה-IIVC של הלב התורם המשמש במודל שלנו הוא בדרך כלל כ-1 ס”מ<strong…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
אנו מודים לד”ר יון שו על עזרתה כשחקנית קול, ד”ר ים ג’יאנחואה פנג על עזרתה בעריכת וידאו וד”ר אניקה קוקהאן על הערותיה ותמיכתה. עבודה זו נתמכה בחלקה על ידי קרן המחקר הגרמנית (DFG) לקידום שיתופי פעולה בינלאומיים (HO2581/4-1 ל- AH), והקרן הלאומית למדע של סין (NSFC; #81760291 ל- FJ).
Materials
| 30G-needles | Braun | 456300 | |
| acepromazine | CP Pharma | Tranquisol P | |
| BALB/c AnNCrl mice | Charles River. Germany | no catalog number | |
| Bepanthen eye ointment | Haus-Apotheke | PZN 01578675 | |
| Bonn Micro Forceps | FST | 11083-07 | |
| Box for insulation and oxygen supply device | RUSKINN | INVIV | |
| C57BL/6J mice | Charles River. Germany | no catalog number | |
| Carprofen | Zoetis | Rimadyl 50 mg/ml | |
| CATHETER-FEP 26G | TERUMO | Surflo-W | |
| Clip Applicator Forceps Style | FST | 18057-14 | |
| Curved forceps | WPI | 14114-G | |
| custodiol/HTK | Dr. Franz Köhler Chemie | no catalog numer | |
| Cutasept skin disinfection | VWR | BODL980365 | |
| electrosurgical pen | Bovie | CHANGE-A-TIP | |
| gauze pads, cotton swabs | Lohmann-Rauscher | 13353 | |
| Heating mat | THERMO MAT PRO 30W | HTP-30 | |
| Hemostatic sponge | CuraSpon | J1276A | |
| heparine-solution | Haus-Apotheke | PZN 03029820 | |
| Ice box | PETZ | No Catalog Number available | |
| Inhalation anesthesia device | GROPPLER | BKGM 0616 | |
| insulation and oxygen supply device | RUSKINN | INVIV | |
| isoflurane | CP Pharma | Isofluran CP 1 ml/ml | |
| ketamine | Zoetis | no catalog numer | |
| metamizole | WDT | no catalog numer | |
| Micro scissors | FST | 15000-00,15000-10 | |
| Micro Serrefine ( Clamp ) Angled / 16 mm | FST | 18055-06 | |
| Microscope | Leica | LEICAMZ6 | |
| Microscope light | SCHOTT | KL2500LED | |
| Saline solution (NaCl 0.9%) | Haus-Apotheke | PZN 06178437 | |
| Scissors | Peha Instruments | 991083/4 | |
| small Petri dish | Sarstedt | 833900 | |
| Straight forceps | WPI | 14113-G | |
| surgical tape | BSN | 4120 | |
| Suture Tying Forceps – 10 cm | FST | 18025-10 | |
| Sutures(10-0) | Medtronic | N2540 | |
| Sutures(4-0) | ETHILON | V4940H | |
| Sutures(7-0) | ETHILON | 1647H | |
| Syringe (0.3 mL) | BD | 324826 | |
| Syringe (1 mL) | BD | 320801 | |
| xylazine | Bayer | Rompun |
Riferimenti
- Corry, R., Winn, H., Russell, P. Primarily vascularized allografts of heart in mice. Transplantation. 16, 343-350 (1973).
- Habertheuer, A., et al. Donor tissue-specific exosome profiling enables noninvasive monitoring of acute rejection in mouse allogeneic heart transplantation. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (6), 2479-2489 (2018).
- Plenter, R. J., Zamora, M. R., Grazia, T. J. Four decades of vascularized heterotopic cardiac transplantation in the mouse. Journal of Investigative Surgery. 26, 223-228 (2013).
- Wu, K., et al. Novel technique for blood circuit reconstruction in mouse heart transplantation model. Microsurgery. 26, 594-598 (2006).
- Alamran, F. G., Shahkolahi, M. M. Total arterial anastomosis heterotopic heart transplantation model. Transplantation Proceedings. 45, 625-629 (2013).
- Melanie, L., et al., Moffatt-Bruce, S. D., et al. Potential of Heterotopic Cardiac Transplantation in Mice as a Model for Elucidating Mechanisms of Graft Rejection. Cardiac Transplantation. , (2012).
- Westhofen, S., et al. The heterotopic heart transplantation in mice as a small animal model to study mechanical unloading – Establishment of the procedure, perioperative management and postoperative scoring. PLoS One. 14 (4), 0214513 (2019).
- Wang, C., Wang, Z., Allen, R., Bishop, G. A., Sharland, A. F. A Modified Method for Heterotopic Mouse Heart Transplantion. Journal of Visualized Experiments. (88), e51423 (2014).
- Mokbel, M., et al. Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate Solution for Donor Heart Preservation Is Safe for Transplantation. Annals of Thoracic Surgery. 109 (3), 763-770 (2020).
- Song, S., et al. Modified Suture Technique in a Mouse Heart Transplant Model. Asian Journal of Surgery. 34 (2), 86-91 (2011).
- Martins, P. N. Assessment of graft function in rodent models of heart transplantation. Microsurgery. 28 (7), 565-570 (2008).
- Wu, K., et al. cold storage using a new histidine-tryptophan-ketoglutarate-based preservation solution in isogeneic cardiac mouse grafts. European Heart Journal. 32 (4), 509-516 (2011).
- Türk, T. R., et al. Reduction of chronic graft injury with a new HTK-based preservation solution in a murine heart transplantation model. Cryobiology. 64 (3), 273-278 (2012).
