Impalcatura composita collagene-chitosano caricata di doxiciclina per la guarigione accelerata delle ferite diabetiche

Summary

L'impalcatura DOX-CL preparata soddisfaceva i prerequisiti di una medicazione DW ideale in resistenza meccanica, porosità, assorbimento dell'acqua, tasso di degradazione, rilascio prolungato, proprietà antibatteriche, biocompatibilità e antinfiammatorie, che sono considerate essenziali per il recupero del tessuto danneggiato nei DW.

Abstract

Una delle principali complicanze del diabete mellito sono le ferite diabetiche (DW). La fase prolungata dell'infiammazione del diabete ostruisce le ulteriori fasi di una lesione che porta a una guarigione ritardata delle ferite. Abbiamo selezionato la doxciclina (DOX), come potenziale farmaco preferito, grazie alle sue proprietà antibatteriche insieme alle sue proprietà antinfiammatorie riportate. L'attuale studio mira a formulare impalcature dox caricate collagene-chitosano non retiche (NCL) e retille (CL) e valutare la loro capacità curativa in condizioni diabetiche. Il risultato della caratterizzazione delle impalcature rivela che l'impalcatura DOX-CL ha una porosità ideale, un basso tasso di gonfiore e degradazione e un rilascio prolungato di DOX rispetto all'impalcatura DOX-NCL. Gli studi in vitro rivelano che l'impalcatura DOX-CL era biocompatibile e ha migliorato la crescita cellulare rispetto ai gruppi di impalcatura e controllo CL. Gli studi antibatterici hanno dimostrato che l'impalcatura DOX-CL era più efficace dell'impalcatura CL contro i batteri più comuni trovati in DW. Utilizzando il modello di DW indotto dalla dieta streptozotocina e ad alto contenuto di grassi, è stato osservato un tasso significativamente (p≤0,05) più veloce di contrazione della ferita nel gruppo trattato con impalcature DOX-CL rispetto a quelli nei gruppi di impalcatura e controllo CL. L'uso dell'impalcatura DOX-CL può rivelarsi un approccio promettente per il trattamento locale per le DW.

Introduction

Il diabete mellito (DM) è una condizione in cui l'incapacità del corpo di fornire insulina o reagire ai suoi esiti nella digestione anomala di zuccheri semplici porta a un aumento della glicemia ¹. L'intreccio più consecutivo e schiacciante del DM è la ferita diabetica (DW). Circa il 25% dei pazienti con DM ha l'opportunità di costruire un DW nella loro vita ¹. La guarigione ostacolata della DW è accreditata a una triopatia di DM: immunopatia, vasculopatia e neuropatia. Ogni volta che la DW non viene trattata, può provocare lo sviluppo della cancrena, provocando quindi la rimozione dell'organo ^{interessa....}

Protocol

Tutte le procedure sugli animali eseguite sono state approvate dal comitato etico istituzionale per gli animali del JSS College of Pharmacy, Ooty, India.

1. Preparazione di impalcature porose caricate con DOX con metodo di liofilizzazione

1. Aggiungere 1,2 g di COL a 100 mL di acqua (ad esempio Millipore) e tenere da parte per il gonfiore.
2. Mescolare la dispersione gonfia del COL a 2000 giri/min durante la notte per garantire la completa dissoluzione del COL.
3. Preparare la soluzione CS sciogliendo circa 0,8 g di CS in 100 mL di acido acetico all'1%.
4. Mescolare la soluzione CS durante la notte a 2000 giri/mi....

Results

Caratterizzazione dell'impalcatura NCL e CL caricata da DOX
All'esame visivo, l'impalcatura NCL e CL è stata trovata di colore crema. Inoltre, entrambe le impalcature sembrano essere come una spugna, rigida e anelastica se esaminate fisicamente. Le immagini SEM delle impalcature NCL e CL sono mostrate nella figura 1. Dalla figura, era chiaro che c'era una diminuzione delle dimensioni dei pori dopo il collegamento incrociato formando collegamenti intermolecolari. Inoltre, .......

Discussion

L'obiettivo principale di questo studio era determinare l'effetto dell'impalcatura COL-CS caricata da DOX sulla guarigione della DW nei ratti. CL e NCL sono stati preparati e valutati in termini di morfologia, indice di gonfiore, cinetica di rilascio in vitro e biocompatibilità.

Caratterizzazione dell'impalcatura NCL e CL caricata da DOX
Le impalcature preparate sono state trovate porose con pori interconnessi. Questi pori interconnessi assicurano la natura porosa e spugnos.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
1-etil-(3-3-dimetilamminopropil) cloridrato di carbodiimmide (EDC)	Merck Millipore, Mumbai, India	E7750
2-(N-morfolino) acido solfonico (MES)	Merck Millipore, Mumbai, India	137074
3-(4,5 dimetiltiazolo-2 il) -2, 5-difenile tetrazolio bromuro (MTT)	Thermo Fisher, Mumbai, India	M6494
Congelatore verticale	Labline Instruments, Kochi, India
Sacco per dialisi	Merck Millipore, Mumbai, India	D6191-Larghezza media piana 25 mm (1,0 pollici), MWCO 12.000 Da
Doxiciclina	Sigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, India	D9891
Kit Elisa	R& D Systems	RMP900
Escherichia coli (E. coli)	National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, India	NCIM 2567
Ethanol	Merck Millipore, Mumbai, India	100983
Lyophilizer-SZ042	Strumenti da laboratorio Sub-Zero, Chennai, India
Agitatore meccanico-RQ-122/D	Strumenti di laboratorio Remi, Mumbai, India
Chitosano Sisco	Research Laboratories Pvt. Ltd., Mumbai, India	18824
Microtome-RM2135	Leica, Regno Unito
Cellule di fibroblasti embrionali di topo (3T3-L1)	Centro nazionale per le scienze cellulari, Pune, India
Lettore di piastre multiple -Inifinte M200 Pro	Tecan Strumenti, Svizzera
N-idrossi succinimide (NHS)	Sigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, India	130672
Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa)Collezione	nazionale di microrganismi industriali, Pune, India	NCIM 2036
Microscopia elettronica a scansione (SEM)-S-4800	Hitachi, India
Pellet di idrossido di sodio (NaOH)	Qualigen fine chemicals, Mumbai, India	Q27815
Staphylococcus aureus (S. aureus)National	Collection of Industrial Microorganisms, Pune, India	NCIM 5022
Staphylococcus epidermis (S. epidermis)Collezione	nazionale di microrganismi industriali, Pune, India	NCIM 5270
Streptozotocina (STZ)	Sisco Research Laboratories Pvt. Ltd., Mumbai, India	14653
Sigma chemicals Co. Ltd	per ratto di tipo 1	C7661
Ultravioletto... spettroscopia visibile-1700	Shimadzu