Modellazione dell'ictus nei topi: occlusione transitoria dell'arteria cerebrale media attraverso l'arteria carotide esterna

Summary

Diversi modelli di occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAo) sono utilizzati nella ricerca sperimentale sull'ictus. Qui, viene descritto un modello sperimentale di ictus di MCAo transitorio attraverso l'arteria carotide esterna (ECA), che mira a imitare l'ictus umano, in cui il trombo cerebrovascolare viene rimosso a causa della lisi spontanea del coagulo o della terapia.

Abstract

L'ictus è la terza causa più comune di mortalità e la principale causa di disabilità acquisita negli adulti nei paesi sviluppati. Ad oggi, le opzioni terapeutiche sono limitate a una piccola percentuale di pazienti con ictus entro le prime ore dopo l'ictus. Nuove strategie terapeutiche sono state ampiamente studiate, soprattutto per prolungare la finestra temporale terapeutica. Queste indagini attuali includono lo studio di importanti percorsi fisiopatologici dopo l'ictus, come l'infiammazione post-ictus, l'angiogenesi, la plasticità neuronale e la rigenerazione. Nell'ultimo decennio, c'è stata una crescente preoccupazione per la scarsa riproducibilità dei risultati sperimentali e dei risultati scientifici tra i gruppi di ricerca indipendenti. Per superare la cosiddetta "crisi della replicazione", sono urgentemente necessari modelli standardizzati dettagliati per tutte le procedure. Come sforzo all'interno del consorzio di ricerca "ImmunoStroke" (https://immunostroke.de/), viene proposto un modello murino standardizzato di occlusione transitoria dell'arteria cerebrale media (MCAo). Questo modello consente il completo ripristino del flusso sanguigno al momento della rimozione del filamento, simulando la lisi del coagulo terapeutica o spontanea che si verifica in gran parte degli ictus umani. La procedura chirurgica di questo modello di corsa "filamentosa" e gli strumenti per la sua analisi funzionale sono dimostrati nel video di accompagnamento.

Introduction

L'ictus è una delle cause più comuni di morte e disabilità in tutto il mondo. Sebbene ci siano principalmente due forme distinte di ictus, ischemico ed emorragico, l'80-85% di tutti i casi di ictus sono ischemici¹. Attualmente, sono disponibili solo due trattamenti per i pazienti con ictus ischemico: trattamento farmacologico con attivatore di plasminogeno tissutale ricombinante (rtPA) o trombectomia meccanica. Tuttavia, a causa della ristretta finestra temporale terapeutica e dei molteplici criteri di esclusione, solo un numero selezionato di pazienti può beneficiare di queste specifiche opzioni di trattamento. Negli ultimi due decenni, la ric....

Protocol

Gli esperimenti riportati in questo video sono stati condotti seguendo le linee guida nazionali per l'uso di animali da esperimento e i protocolli sono stati approvati dai comitati governativi tedeschi (Regierung von Oberbayern, Monaco di Baviera, Germania). I topi maschi C57Bl/6J di dieci settimane sono stati utilizzati e alloggiati a temperatura controllata (22 ± 2 °C), con un periodo di ciclo luce-buio di 12 ore e accesso a cibo e acqua pellettati ad libitum.

1. Preparazione del materiale e degli strumenti

1. Collegare la coperta termica per mantenere la temperatura dell'area operativa e la temperatura corporea del mouse ....

Results

Il modello qui descritto è una modifica del modello di corsa "filamento" comunemente usato, che consiste nell'introdurre un filamento rivestito di silicio attraverso l'ECA per bloccare transitoriamente l'origine dell'MCA (Figura 1). Dopo aver rimosso il filamento, solo il flusso sanguigno nell'ECA viene definitivamente interrotto, consentendo la completa ricanalizzazione del CCA e dell'ICA. Ciò consente un'adeguata riperfusione del cervello (Figura 2), simile al.......

Discussion

Il presente protocollo descrive un modello sperimentale di ictus basato sull'accordo di consenso di un consorzio di ricerca multicentrico tedesco ("ImmunoStroke") per stabilire un modello MCAo transitorio standardizzato. Il modello MCAo transitorio stabilito introducendo un filamento rivestito di silicio attraverso l'ECA all'origine dell'MCA è uno dei modelli di ictus più utilizzati per ottenere la riperfusione arteriosa dopo un periodo di occlusione delimitato. Pertanto, questa procedura può essere considerata un modell.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
45 gradi	rampa H& S Kunststofftechnik		altezza: 18 cm
5/0 minaccia	Pearsalls	10C103000
5 mL siringa	Braun
Acido acetico	Sigma Life Science	695092
Sistema di anestesia per isoflurano	Dräger
Bepanthen pomata	Bayer
C57Bl/6J topi	Charles Morsetto	000664
	FST	12500-12
Clip	FST	18055-04
Porta clip	FST	18057-14
Cotons	NOBA Verbondmitel Danz	974116
Cresyl violet	Sigma Life Science	C5042-10G
Cryostat	Thermo Scientific CryoStarNX70
Etanolo 70%	CLN Chemikalien Laborbedorf	521005
Etanolo 96%	CLN Chemikalien Laborbedorf	522078
Etanolo 99%	CLN Chemikalien Laborbedorf	ETO-5000-99-1
Filamenti	Doccol	602112PK5Re
Fine 45 pinze angolate	FST	11251-35
Pinze fini	FST	11252-23
Forbici fini	FST	14094-11
Colla	Orechseln	BSI-112
Colla indurente	Drechseln & Mehr	BSI-151
Coperta riscaldante	FHC DC Regolatore
di temperatura Isoflurano	Abbot	B506
Isopentano	Fluka	59070
Ketamina	Inresa Arzneimittel GmbH
Laser Doppler	Perimed	PF 5010 LDPM, Periflux System 5000
Sonda Laser Doppler	Perimed	91-00123
Soluzione salina tamponata con fosfato pH: 7,4	Apotheke Innestadt Uni München	P32799
Camera di recupero	Mediheat
Roti-Histokit mezzo di montaggio	Roth	6638.1
Soluzione salina	Braun	131321
Scalpel	Feather	02.001.30.011
Filamenti siliconati	Doccol	602112PK5Re
Stereomicropscope	Leica	M80
Superfrost Plus Slides	Thermo Scientific	J1800AMNZ
Vannas Spring Scissors	FST	15000-00
Xilacino	Albrecht