Prøvetaking av humant subkutant fettvev ved hjelp av en mini-fettsugingsteknikk

Summary

Manuskriptet og tilhørende video viser perkutan biopsiteknikk for å ta prøver av subkutant fettvev fra områdene rundt navlen. Denne metoden er en lavrisiko og effektiv måte å undersøke en rekke parametere (f.eks. Gen- eller proteinuttrykk, enzymaktivitet, lipidinnhold) i fettvev.

Abstract

Studier på fettvev er nyttige for å forstå metabolske og andre forhold. Humant subkutant fettvev er tilgjengelig. Med riktig opplæring og streng overholdelse av aseptisk teknikk kan subkutane fettprøver oppnås trygt og effektivt i en ikke-klinisk setting av forskere. Etter administrering av lokalbedøvelse lateralt til navlestrengen, føres en 14 G nål festet til en 5 eller 10 ml sprøyte gjennom huden inn i det subkutane vevet. Under sug flyttes sprøyten i en frem- og tilbakegående, skivebevegelse for å isolere fragmenter av fettvev. Å trekke ut stempelet er nok til å sikre at fettvevsfragmenter aspireres gjennom nålen inn i sprøyten. En enkelt biopsi kan samle ca 200 mg vev. Denne biopsiteknikken er veldig trygg for både deltakere og forskerpersonale. Etter biopsi, kan deltakerne gjenoppta de fleste daglige aktiviteter, selv om de bør unngå svømming og altfor anstrengende aktiviteter i 48 timer for å unngå overdreven blødning. Deltakerne kan trygt gjennomgå 2 biopsier i løpet av en enkelt dag, noe som betyr at teknikken kan brukes i før-etter akutte intervensjonsstudier.

Introduction

Fettvev kan gi nyttig informasjon om menneskers metabolske funksjon. Humant subkutant fettvev er lett tilgjengelig. En teknikk for subkutan fettvevsekstraksjon ble først beskrevet på midten av 80-tallet¹; Siden da har den første protokollen blitt forbedret for å øke utbyttet og forbedre studiedeltakerens toleranse. Subkutant fettvev kan fås fra mange steder, oftest fra glutei¹ og bukområdet². Prøver fra sistnevnte kan være mer ønskelige da de gir mer verdifull informasjon i metabolske sykdomsrelaterte sammenhenger³.

Subkutan fettvevsbiopsi ved hjelp av mini-fettsugingsmetoden kan utføres trygt og effektivt i en ikke-klinisk setting. Etter passende opplæring av en styresertifisert lege og ved hjelp av streng aseptisk teknikk, kan forskere rutinemessig utføre disse biopsiene med minimal risiko for både deltaker og etterforskere. Biopsiteamet må bestå av minst 2 personer: personen som skal utføre biopsien og en assistent.

Personen som er ansvarlig for biopsien har til oppgave å bekrefte deltakerens identitet, sjekke at deltakeren trygt kan gjennomgå prosedyren (se protokolltrinn 2.1-2.4 nedenfor), sikre at deltakeren er komfortabel gjennom hele prosedyren, sikre at steril teknikk opprettholdes gjennom hele prosedyren, utføre prosedyren og gi deltakeren muntlige og skriftlige etterbehandlingsprosedyrer. Assistentens rolle er å håndtere og raskt behandle fettvevet som er oppnådd for senere analyse og / eller lagring. Assistenten hjelper også ved å være de “ikke-sterile hendene” og sikre at deltakeren er rolig gjennom hele prosedyren. Hensikten med denne videoen og papiret er å beskrive den trinnvise biopsiprosedyren for å trygt oppnå subkutant fettvev fra bukområdet.

Protocol

MERK: University of Stirling NHS, invasiv eller klinisk forskningskomité godkjente biopsiprosedyren beskrevet nedenfor. Alle forskningsstudier som bruker denne prosedyren må godkjennes av den aktuelle uavhengige etiske komiteen. Biopsitakeren må ha gjennomført formell opplæring i den beskrevne teknikken i samsvar med institusjonens krav. Vanligvis innebærer dette å observere en demonstrasjon av den beskrevne fettvevsbiopsiteknikken av en styresertifisert lege, etterfulgt av overvåket praksis. Når praktikanten ha…

Representative Results

Den beskrevne fettvevsbiopsiprosedyren er en effektiv og lavrisikoteknikk for forskere å oppnå subkutane fettvevsprøver fra menneskelige frivillige. Vi utførte 39 subkutane fettvevsbiopsier ved hjelp av beskrevet prosedyre hos 11 friske, normalvektige kvinner (alder, 27,4 ± 3,3 år; kroppsmasseindeks (BMI), 22,6 ± 1,5 kg.m2). Alle deltakerne deltok på laboratoriet mellom kl. 07.00 og 10.00 etter en fasteperiode på 8-12 timer. Prøveutbyttet ved hjelp av denne fettvevsbiopsiprosedyren var 192,0 ± 97,1 …

Discussion

Den beskrevne protokollen og tilhørende video gir en trinnvis oversikt over en mini-fettsugingsteknikk for å oppnå subkutane fettvevsprøver fra mageområdet. Denne forskningsgruppen har utført totalt 124 biopsier i løpet av 19 måneder uten bivirkninger hos deltakerne. Prosedyren er trygg og forbundet med minimal risiko for deltakerne eller biopsiteamet, forutsatt at de beskrevne sikkerhetstiltakene følges. Aseptisk teknikk (inkludert åpning og utlevering av sterilt utstyr uten å forurense dem, riktig påføring…

Materials

Item: 14 G needle 14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm	B Braun	4665473	Per biopsy: 1
Item: 21 G needle 21 G x 1 1/2" 0.8 mm x 38 mm	Terumo	AN*2138R1	Per biopsy: 2
Item: 26 G  needle 26 G x 1/2" microlance needle 0.45 mm x 13 mm	BD	303800	Per biopsy: 2
Item: 5 mL syringe 5 mL luer	DB plastipak	302187	Per biopsy: 2
Item: Adhesive wound dressing Opsite Post-Op Dressing 9.5 x 8.5	Smith & Nephew	6600709	Per biopsy: 1
Item: Disposable sterile scalpel Disposable Scalpel Sterile Blade no. 10	Swann Morton	/0501	Per biopsy: 1
Item: Icepack BlueDot Reusable Hot/Cold Pack 26.5 cm x 13.0 cm	NuCare	F711	Per biopsy: 1
Item: Iodine based antiseptic Videne antiseptic solution	Ecolab Videne	3030440	Per biopsy: q.s
Item: Lidocaine 2% w/o epinephrine Lidocaine 2% injection 5 mL	B Braun	3558553	Per biopsy: 5 mL
Item: Non-sterile gloves Starguard sensitive powder free nitrile gloves	Starguard	SG-N-S	Per biopsy: pair
Item: Sodium chloride 0.9% Sodium chlride 0.9% w/v intravenous infusion BP	BBraun	S8004-5384	Per biopsy: q.s.
Item: Stabilization solution* RNAlater Stabilization Solution	ThermoFisher Scientific	AM7020	Per biopsy: q.s
Item: Sterile forceps Sterile forceps	Rocialle	RML109-006	Per biopsy: 1
Item: Sterile gauze swabs Non woven swabs sterile 7.5 x 7.5 cm	Prestige	1860	Per biopsy: 5
Item: Sterile gloves Prestige soft vinyl sterile powder free medical gloves	Prestige	S: P4301 M:P3302 L:P3301	Per biopsy: pair
Item: Sterile Microcentrifuge tubes 1.5 mL Sterile Microcentrifuge Tubes	StarLab	I1415-5510	Per biopsy: q.s
Item: Sterile sheet Paper plain white 90 x 90 cm	Rocialle	RML 126-216	Per biopsy: 1
Item: Weighing boat Diamond shape weigh boats	Heathrow Scientific	HS1427C	Per biopsy: 1
* denotes optional materials