هنا ، نقدم نموذج آفة الغضروف داخل المفصل الناجم عن التحميل الدوري لركبة الفئران ، الناتجة عن 60 ضغطا دوريا يزيد عن 20 نيوتن ، مما يؤدي إلى تلف غضروف اللقمة الفخذية في الفئران.
لا تزال الفيزيولوجيا المرضية لالتهاب المفاصل الأولي (OA) غير واضحة. ومع ذلك ، من المحتمل أن يرتبط تصنيف فرعي محدد ل OA في الفئات العمرية الأصغر نسبيا بتاريخ من تلف الغضروف المفصلي وقلع الأربطة. تلعب النماذج الحيوانية الجراحية لالتهاب المفاصل في الركبة دورا مهما في فهم بداية وتطور الزراعة العضوية بعد الصدمة والمساعدة في تطوير علاجات جديدة لهذا المرض. ومع ذلك ، فقد تم النظر مؤخرا في النماذج غير الجراحية لتجنب الالتهاب الرضحي الذي يمكن أن يؤثر على تقييم التدخل.
في هذه الدراسة ، تم تطوير نموذج فأر آفة الغضروف داخل المفصل الناجم عن التحميل الانضغاطي الدوري في الجسم الحي ، مما سمح للباحثين ب (1) تحديد الحجم الأمثل والسرعة ومدة الحمل التي يمكن أن تسبب تلف الغضروف البؤري. (2) تقييم التغيرات المرضية الزمانية المكانية بعد الصدمة في حيوية الخلايا الغضروفية ؛ و (3) تقييم التعبير النسيجي للجزيئات المدمرة أو الوقائية التي تشارك في آليات التكيف والإصلاح ضد الأحمال الانضغاطية المشتركة. يصف هذا التقرير البروتوكول التجريبي لهذه الآفة الغضروفية الجديدة في نموذج الفئران.
تقليديا ، يعتبر استئصال الرباط الصليبي الأمامي (ACL) أو زعزعة استقرار الغضروف المفصلي الإنسي هو الأمثل للتحقيق في هشاشة العظام بعد الصدمة (PTOA) في الحيوانات الصغيرة. في السنوات الأخيرة ، تم استخدام نماذج الضغط الدوري غير الغازية لدراسة PTOA. تم تصميم هذا النموذج في الأصل للتحقيق في استجابة العظام الملغاة للتحميل الميكانيكي1 ثم تم تعديله كنموذج حيواني غير جراحي لدراسات PTOA2،3،4،5،6. الأساس المنطقي هو تصادم الغضروف المفصلي عن طريق تطبيق قوة خارجية دورية ، مما يؤدي إلى سلسلة من الاستجابات الالتهابية. ومع ذلك ، تم تطبيق هذا النموذج فقط على الفئران ، ولم تتم مناقشة الحجم المناسب للتحميل على الحيوانات الكبيرة.
مشكلة أخرى في النموذج السابق هي أن بروتوكول الحجم الكبير تضمن العديد من الدورات ، مما تسبب في سماكة مفرطة للعظم تحت الغضروف ، وهو أحد الآثار الجانبية غير المرغوب فيها ، في عدة عينات7. لذلك ، تم تطوير طريقة جديدة للضغط الدوري مع الحجم المناسب للحيوانات الكبيرة وتأثير جانبي أقل للتحميل8. الهدف العام من المقالة الحالية هو وصف بروتوكول نموذج الضغط الدوري غير الغازي في الفئران ومراقبة النتائج التمثيلية لتنكس الغضروف. سيساعد البروتوكول الحالي القراء المهتمين بتطبيق نموذج الضغط الدوري غير الغازي على الفئران.
لأول مرة ، يوضح البروتوكول الحالي كيفية إنشاء نموذج لآفة الغضروف الناجم عن التحميل على اللقمة الفخذية الجانبية في الفئران ، على غرار نموذج الضرر داخل المفصل في القوارض الأصغر مثل الفأر2. ومع ذلك ، تسبب بروتوكول التحميل في الفئران في تكوين عظمي شديد وآفات الرباط الصليبي ، والت…
The authors have nothing to disclose.
تم دعم هذه الدراسة جزئيا من خلال منحة JSPS KAKENHI (الأرقام JP18H03129 و JP18K19739).
تلقى هذا البحث أيضا تمويلا من التحالف من أجل أبحاث وتدريب إعادة التأهيل التجديدي (AR3T) ، والذي يدعمه معهد يونيس كينيدي شرايفر الوطني لصحة الطفل والتنمية البشرية (NICHD) ، والمعهد الوطني للاضطرابات العصبية والسكتة الدماغية (NINDS) ، والمعهد الوطني للتصوير الطبي الحيوي والهندسة الحيوية (NIBIB) التابع للمعاهد الوطنية للصحة تحت رقم الجائزة P2CHD086843. المحتوى هو مسؤولية المؤلفين فقط ولا يمثل بالضرورة وجهات النظر الرسمية للمعاهد الوطنية للصحة.
Anesthetic Apparatus for Small Animals | SHINANO MFG CO.,LTD. | SN-487-0T | |
Autograph AG-X | Shimadzu Corp | N.A. | Precision Universal / Tensile Tester |
Fluoview FV10i microscope | Olympus Corp | N.A. | A fully automated confocal laser-scanning microscope |
ISOFLURANE Inhalation Solution | Pfizer Japan Inc. | (01)14987114133400 | |
LIVE/DEA Viability/Cytotoxicity Kit | Thermo Fisher Scientific Japan Inc | L3224 | A quick and easy two-color assay to determine viability of cells |
TRAPEZIUM X Software | Shimadzu Corp | N.A. | Data processing software for Autograph AG-X |