Il fluorometro a velocità di ripetizione rapida (FRRf) è un metodo utile per misurare la fotofisiologia del fotosistema II e la produttività primaria. Qui descriviamo un protocollo per misurare la fotofisiologia PSII dell'alga epizoica, Colacium sp. su substrato zooplancton utilizzando FRRf di tipo cuvetta.
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Articolo metodologico
Misurazione della fotofisiologia dello stadio collegato di Colacium sp. da un fluorometro a velocità di ripetizione rapida di tipo cuvetta
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il fluorometro a velocità di ripetizione rapida (FRRf) è un metodo utile per misurare la fotofisiologia del fotosistema II (PSII) e la produttività primaria. Sebbene FRRf possa misurare la sezione trasversale di assorbimento PSII (σ PSII), la massima efficienza fotochimica (Fv / Fm), l'efficienza fotochimica efficace (Fq ′ / Fm′) e la tempra non fotochimica (NPQNSV) per varie alghe eucariotiche e cianobatteri, quasi tutti gli studi FRRf fino ad oggi si sono concentrati sul fitoplancton. Qui, il protocollo descrive come misurare la fotofisiologia PSII di un'alga epizoica Colacium sp. Ehrenberg 1834 (Euglenophyta), nel suo stadio annesso (attaccato allo zooplancton), usando FRRf di tipo cuvetta. In primo luogo, abbiamo stimato gli effetti dello zooplancton substrato (Scapholeberis mucronata O.F. Müller 1776, Cladocera, Daphniidae) sulla fluorescenza basale e σ PSII, Fv/Fm, Fq′/Fm′ e NPQNSV del planctonico Colacium sp. Per convalidare questa metodologia, abbiamo registrato misurazioni fotofisiologiche di Colacium sp. allegato su S. mucronata e confrontato questi risultati con il suo stadio planctonico. I risultati rappresentativi hanno mostrato come il protocollo potrebbe determinare gli effetti del calcio (Ca) e del manganese (Mn) sulla fotofisiologia di Colacium sp. e identificare i vari effetti dell'arricchimento di Mn tra stadi attaccati e planctonici. Infine, discutiamo l'adattabilità di questo protocollo ad altre alghe perifite.
Introduzione
La fluorescenza variabile della clorofilla è uno strumento utile per misurare la fotofisiologia del fotosistema algale II (PSII). Le alghe rispondono a vari stress ambientali, come l'eccesso di luce e la carenza di nutrienti, alterando la loro fotofisiologia PSII. Il fluorometro a velocità di ripetizione rapida (FRRf) è un metodo comune per misurare la fotofisiologia PSII1,2 e stimare la produttività primaria1,3,4, che consente di monitorare la fotofisiologia del fitoplancton PSII e la produttività primaria su ampie s....
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Protocollo
1. Campionamento
- Raccogli l'acqua del lago dalla superficie con un secchio. Per colpire Colacium sp. attaccato a S. mucronata (Figura 1A-C) filtrare 0,5-10 L di acqua di lago utilizzando una rete a rete di nylon da 100 μm52.
NOTA: S. mucronata spesso si aggrega densamente in acque poco profonde, eutrofiche, fangose, come tra le aree di canna (phragmites). - Conservare i campioni concentrati in bottiglie di plastica da 500 ml con 350 ml di acqua di lago. Conservare in condizioni di oscurità.
- In laboratorio, versare l'acqua de....
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Risultati
Non vi è stato alcun effetto significativo della fluorescenza al basale (Figura 5) o della fluorescenza Chl-a (Figura 6) da parte di S. mucronata fino a 5 individui (inds.) mL−1. Tuttavia, Fv/Fm e NPQNSV sono stati significativamente colpiti quando S. mucronata era di 7,5 inds·mL−1. Pertanto, per misurare la fotofisiologia di Colacium sp. durante.......
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Discussione
Questo protocollo ha dimostrato per la prima volta che la fotofisiologia di Colacium sp. durante la fase attaccata in un ambiente naturale è paragonabile al suo stadio planctonico nel mezzo AF-6. Inoltre, il contenuto intestinale di S. mucronata affamato non ha influenzato la fluorescenza al basale e Chl-a quando la densità era ≤5 inds·mL−1 (Figura 5 e Figura 6). Questi risultati suggeriscono che questo protocollo può misura.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno divulgazioni da dichiarare.
Ringraziamenti
Il lavoro è stato sostenuto dal Collaborative Research Fund della Prefettura di Shiga dal titolo "Studio sulla qualità dell'acqua e sull'ambiente del fondo lago per la protezione della solidità dell'ambiente idrico" nell'ambito della sovvenzione giapponese per la rivitalizzazione regionale e il Fondo per la ricerca e lo sviluppo tecnologico dell'ambiente (n. 5-1607) del Ministero dell'Ambiente, Giappone. https://www.kantei.go.jp/jp/singi/tiiki/tiikisaisei/souseikoufukin.html. Gli autori desiderano ringraziare Enago (www.enago.jp) per la recensione in lingua inglese.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| filtro per siringa Acrodisc | Pall Corporation, Ann Arbor, MI, USA | 0.2 μ m dimensione dei pori | |
| Act2Run | CTG Ltd., West Molesey, Regno Unito | ||
| Biotina | Wako | 023-08711 | AF-6 medio |
| CaCl2· 2H2O | Wako | 031-25031 | AF-6 medio |
| CaCO3 | Wako | 036-00382 | AF-6 medio |
| Acido citrico | Wako | 036-05522 | AF-6 |
| medio CoCl2· 6H2O | Wako | 036-03682 | AF-6 medium |
| Clorella concentrata | Recenttec, Tokyo, Giappone | 20 mg C· mL− 1 ; negozio a 4 ° C | |
| FastOcean Act2 | CTG Ltd., West Molesey, Regno Unito | ||
| Fe-citrato | Wako | 093-00952 | AF-6 medio |
| FeCl3· 6H2O | Wako | 091-00872 | AF-6 medio |
| HCLP-880PF | Nippon Medical and Chemical Instruments Co., Ltd., Osaka, Giappone | Con lampadine a LED | |
| K2HPO4 | Wako | 160-04292 | AF-6 medio |
| KH2PO4 | Wako | 167-04241 | AF-6 medio |
| MgSO4· 7H2O | Wako | 137-00402 | AF-6 medio |
| MnCl3· 4H2O | Wako | 139-00722 | AF-6 medio |
| Na2EDTA | Wako | 343-01861 | AF-6 medio |
| Na2MoO4 | Wako | 196-02472 | AF-6 medio |
| NaNO3 | Wako | 191-02542 | AF-6 medio |
| NH4NO3 | Wako | 015-03231 | AF-6 medium |
| Plankton Counter | Matsunami Glass, Osaka, Japan | S6300 | |
| Pylex provetta | CTG Ltd., West Molesey, UK | Con bordo, 16 x 100 mm | |
| Vit. B1 | Wako | 203-00851 | AF-6 medio |
| Vit. B12 | Wako | 226-00343 | AF-6 medio |
| B6 | Wako | 165-05401 | AF-6 medio |
| ZnSO4· 7H2O | Wako | 264-00402 | AF-6 medio |
Riferimenti
- Kolber, Z., Falkowski, P. G. Use of active fluorescence to estimate phytoplankton photosynthesis in situ. Limnology and Oceanography. 38 (8), 1646-1665 (1993).
- Kolber, Z. S., Prášil, O., Falkowski, P. G.
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Ristampe e permessi
