אנו מציגים פרוטוקול לשימוש במערכת זלוף סנגווינית נורמותרמית ex vivo להעברת טיפולים לאלוגרפט לב שלם במודל השתלת לב הטרוטופית חזירית.
השתלת לב היא הטיפול הסטנדרטי ביותר לאי ספיקת לב סופנית. עם זאת, הוא נותר מוגבל על ידי מספר הלבבות התורמים הזמינים וסיבוכים כגון תפקוד לקוי של השתלה הראשונית ודחיית השתל. השימוש הקליני האחרון במכשיר זלוף ex vivo בהשתלת לב מציג הזדמנות ייחודית לטיפול באלוגרפטים לבביים באמצעות התערבויות טיפוליות כדי לשפר את התפקוד ולהימנע מתגובות מושתלים מזיקות. ביסוס מודל תרגומי של בעלי חיים גדולים להעברה טיפולית לכל האלוגרפט חיוני לבדיקת גישות טיפוליות חדשניות בהשתלת לב. מודל השתלת הלב ההטרוטופית החזירית וההטרוטופית בעמדה התוך-אבדומית משמש מודל מצוין להערכת ההשפעות של התערבויות חדשניות ואימונופתולוגיה של דחיית השתל. מודל זה מציע גם הישרדות לטווח ארוך עבור החזיר, בהתחשב בכך שהשתל אינו נדרש כדי לשמור על זרימת המקבל. מטרת פרוטוקול זה היא לספק גישה ניתנת לשחזור וחזקה להשגת העברת ex vivo של טיפול לכל אלוגרפט הלב לפני ההשתלה ולספק פרטים טכניים לביצוע השתלה הטרוטופית הישרדותית של הלב המחורר ex vivo .
אי ספיקת לב היא מצב המשפיע על כ -6 מיליון מבוגרים בארצות הברית וצפוי לגדול ל -8 מיליון מבוגרים עד שנת 20301. השתלת לב היא הטיפול הסטנדרטי ביותר לאי ספיקת לב סופנית. עם זאת, זה לא בלי המגבלות והסיבוכים שלה. הוא נותר מוגבל על ידי מספר הלבבות התורמים הזמינים, תפקוד לקוי של השתל הראשוני, דחיית הלב ותופעות הלוואי של דיכוי חיסוני ארוך טווח2. מגבלות אלה חשובות במיוחד אצל מושתלים צעירים שעלולים לחוות כישלון ב-allograft ודורשים השתלה חוזרת לאחר מכן כדי להשיג תוחלת חיים נורמלית.
התערבות אידיאלית כדי להתגבר על מגבלות אלה תטפל באלוגרפטים לבביים שלמים עם טיפולים לפני ההשתלה למושתל שיכולים לשפר את הכדאיות של allograft ולהעניק “הגנה לבבית”. התערבויות כאלה יינתנו באופן מניעתי כדי למזער את שכיחות העלבונות האיסכמיים, דחיית אלוגרפט, וסקולופתיה לבבית, ואפילו לתקן אלוגרפטים שוליים. מחקרים תרגומיים לפיתוח התערבויות מסוג זה דורשים מודל של בעלי חיים גדולים של השתלת לב כדי לאפשר מעקב ארוך טווח אחר השתלת הלב. מודל השתלת הלב החזירי וההטרוטופי במצב התוך-מוחי הוכח כאידיאלי למטרה זו. השתלת לב במצב זה מאפשרת לבחון את ההשפעות של טיפולים חדשניים ולהעריך את האימונופתולוגיה של דחיית השתל. בנוסף, המודל ההטרוטופי הוא יתרון על פני המודל האורתוטופי בשל הישרדות כוללת טובה יותר של המקבל, אין דרישה למעקף קרדיו-פולמונרי, ואין דרישה של השתל כדי לשמור על זרימת המקבל3.
אספקה יעילה של התערבויות טיפוליות ללב, כגון גן, תא או טיפול חיסוני, מהווה חסם משמעותי ליישום קליני 4,5. הטכנולוגיה שהוצגה על ידי מכשירי זלוף ex vivo מאפשרת להשתלים להיות מחלחלים ללא הרף, תוך שמירה עליהם במצב לא עובד אך פעיל מטבולית 6,7,8,9. זה מציע הזדמנות ייחודית לטפל בלב שלם עם טיפולים מתקדמים תוך מזעור תופעות הלוואי הפוטנציאליות של אספקה מערכתית 10,11,12,13. יתרון נוסף של שימוש במכשירי זלוף ex vivo לצורך אספקה טיפולית הוא שהם מאפשרים מתן תרופות למחזור הדם הכלילי לאורך תקופות ממושכות שאינן אפשריות בשיטות אחסון סטטיות מסורתיות של הצטננות. זה מאפשר אספקה גלובלית יותר של הטיפולים להשתל14. באמצעות הפרוטוקול שהוצג כאן, העברנו בהצלחה את הגן גחלילית לוציפראז להשתל לב חזירי שלם באמצעות וקטורים אדנו-ויראליים15. מטרת פרוטוקול זה היא לספק גישה ניתנת לשחזור וחזקה להשגת מסירה של טיפול לכל אלוגרפט הלב לפני ההשתלה.
מתן טיפולים במהלך השתלת ex vivo בהשתלת לב מציע אסטרטגיה לשינוי ה- allograft ואולי לשפר את תוצאות ההשתלה. הפרוטוקול המוצג כאן משלב את אחסון הזלוף הנורמותרמי החדשני ex vivo sanguinous מציע פוטנציאל מבטיח לבדיקת אספקה מבודדת של תאים, גנים או אימונותרפיות ל- allograft 11,12,13.</s…
The authors have nothing to disclose.
ברצוננו להודות ל-Duke Large Animal Surgical Core ול-Duke Perfusion Services על עזרתם במהלך הליכים אלה. אנו רוצים גם להודות לפול לזברג ו- TransMedics, Inc. על התמיכה.
0 Looped Maxon suture | Covidien | GMM-341L | Used to close fascia of the laparotomy incision |
0 Silk ties | Medtronic, Inc | S346 | |
18 G Angiocath | BD | 381144 | Used to de-air the left ventricle of the donor heart after implantation |
20 Fr LV vent | Medtronic, Inc | 12002 | |
2-0 Silk sutures | Ethicon, Inc. | SA11G | |
2-0 Silk ties | Ethicon, Inc. | SA65H | |
2-0 Vicryl suture | Ethicon, Inc. | J259H | |
24 Fr venous cannula | Medtronic, Inc | 68124 | |
3-0 Prolene sutures | Ethicon, Inc. | 8522 | |
4-0 Monocryl suture | Ethicon, Inc. | Y469G | |
4-0 Prolene sutures | Ethicon, Inc. | 8521 | |
Animal hair cutting clipper | Wahl | 8786-452 | |
Aortic clamp | V. Mueller | CH6201 | |
Army Navy retractor | V. Mueller | SU3660 | |
ATF 40, Cell saver disposable set | Fresenius Kabi | 9108494 | Cell saver device insert |
Balfour retractor | V. Mueller | SU3042 | Used as an abdominal wall retractor |
C.A.T.S cell saver | Fresenius Kabi | ES0019 | Cell saver device used to wash donor blood |
Cardiac defibrillator | Zoll | M Series | Cardiac defibrillator |
Castro needle holder | V. Mueller | CH8589 | |
CG4 iStat cartridges | Abbott | 03P85-25 | POC testing |
CG8 iStat cartridges | Abbott | 03P88-25 | POC testing |
DeBakey forceps | V. Mueller | CH5902 | |
Electrocautery disposable pencil | Covidien | E2450H | |
Gerald forceps | V. Mueller | NL1451 | |
Hemotherm 400CE Dual Reservoir Cooler/Heater | Cincinnati Sub-Zero | 86022 | Heater cooler used to regulate perfusion temperature on the ex vivo perfusion device |
iSTAT 1 | Abbott | 04P75-03 | POC testing device |
Kocher clamp | V. Mueller | SU2790 | |
Large clip applier | Sklar | 50-4300 | |
Large clips | Teleflex | 4200 | |
Large soft pledgets | Covidien | 8886867901 | |
Medium clip applier | Sklar | 50-4335 | |
Medium clips | Teleflex | 2200 | |
Metzenbaum scissor | V. Mueller | CH2006-001 | |
No. 10 scalpel blade | Swann-Mortan | 301 | Used for skin incision |
No. 11 scalpel blade | Kiato Plus | 18111 | Used for vascular incision |
OCS device with base | TransMedics, Inc. | Ex vivo perfusion device | |
OCS disposable | TransMedics, Inc. | Ex vivo perfusion device insert with perfusion kits | |
Pacing cable | Remington Medical | FL-601-97 | |
Pediatric cardioplegia catheter (4Fr) | Medtronic, Inc | 10218 | Used to deliver cardioplegia to the donor aortic root |
Pediatric Foley catheter | Teleflex | RSH170003080 | Placed pre-op to decompress the recipient's bladder |
Potts scissors | V. Mueller | CH13038 | |
Pressure bag x2 (1,000 mL) | Novaplus | V4010H | Used to deliver cardioplegia at a set pressure |
Satinsky clamp | V. Mueller | CH7305 | Vascular clamp used for creating anastomoses between donor heart and recipient vessels |
Scissors | Felco | FELCO 200A-50 | Used to perform sternotomy |
Small hard pledgets | Covidien | 8886867701 | |
Sternal retractor | V. Mueller | CH6950-007 | |
Temporary cardiac pacing wires | Ethicon, Inc. | TPW32 | |
Temporary dual chamber pacemaker | Medtronic, Inc | 5388 | Cardiac pacing device |
Tourniquet kit | Medtronic, Inc | 79005 | Rummel tourniquets |
Umbilical tape | Covidien | 8886861903 | |
Vessel loops | Covidien | 31145686 |