Summary

Monitoraggio della pressione intracranica nel modello di roditore emorragia intraventricolare non traumatico

Published: February 08, 2022
doi:

Summary

Il monitoraggio della pressione intracranica nei modelli di roditori di emorragia intraventricolare non traumatica non è comune nella letteratura corrente. Qui, dimostriamo una tecnica per misurare la pressione intracranica, la pressione arteriosa media e la pressione di perfusione cerebrale durante l’emorragia intraventricolare in un modello animale di ratto.

Abstract

I sopravvissuti all’emorragia intraventricolare sono spesso lasciati con una significativa compromissione della memoria a lungo termine; Pertanto, la ricerca che utilizza modelli animali di emorragia intraventricolare è essenziale. In questo studio, abbiamo cercato modi per misurare la pressione intracranica, la pressione arteriosa media e la pressione di perfusione cerebrale durante l’emorragia intraventricolare non traumatica nei ratti. Il progetto sperimentale includeva tre gruppi di Sprague Dawley: sham, emorragia intraventricolare standard da 200 μl e gruppi di controllo del veicolo. Con l’introduzione di un sensore di pressione intraparenchimale a fibre ottiche, sono state ottenute misurazioni precise della pressione intracranica in tutti i gruppi. Le pressioni di perfusione cerebrale sono state calcolate con la conoscenza della pressione intracranica e dei valori medi della pressione arteriosa. Come previsto, i gruppi di emorragia intraventricolare e di controllo del veicolo hanno entrambi sperimentato un aumento della pressione intracranica e un conseguente calo della pressione di perfusione cerebrale durante l’iniezione intraventricolare di sangue autologo e liquido cerebrospinale artificiale, rispettivamente. L’aggiunta di un sensore di pressione a fibre ottiche intraparenchimali è utile per monitorare precise variazioni della pressione intracranica.

Introduction

L’emorragia intraventricolare (IVH), un tipo di emorragia intracranica (ICH), è una malattia devastante che comporta mortalità e morbilità significative. IVH è caratterizzato come l’accumulo di prodotti sanguigni all’interno dei ventricoli intracranici. L’IVH isolata non è comune e si verifica tipicamente negli adulti1. Può essere associata a emorragia ipertensiva, rottura di aneurisma intracranico o un’altra malformazione vascolare, tumori o traumi1. IVH porta a lesioni cerebrali secondarie e allo sviluppo di idrocefalo2. I sopravvissuti all’IVH sono spesso lasciati con significativi disturbi funzionali, di memoria e cognitivi dopo la loro lesione. Questi deficit cognitivi e di memoria a lungo termine sono riportati nel 44% dei sopravvissuti all’ICH3. Nell’emorragia subaracnoidea (SAH), un altro tipo di ICH, è ben noto che circa la metà dei sopravvissuti avrà deficit di memoria, e per coloro che hanno IVH oltre a SAH, i risultati tendono ad essere significativamente peggiori 4,5,6.

I meccanismi sottostanti della disfunzione della memoria dopo IVH rimangono da chiarire. La ricerca in vivo che utilizza modelli animali IVH non traumatici con disfunzione funzionale e della memoria è essenziale per scoprire potenziali bersagli terapeutici per tali pazienti. I modelli animali con memoria più grave e disfunzione funzionale dopo IVH sarebbero i migliori per studiare questi cambiamenti. Il laboratorio dell’autore senior ha anche studiato specificamente il ruolo dell’alta pressione intracranica (ICP) nello sviluppo di deficit di memoria in modelli di ratto IVH. Pertanto, i metodi per misurare con precisione i PIC durante l’IVH erano importanti da indagare. Qui riportiamo i metodi per misurare con precisione gli ICP in un modello di ratto IVH. Sebbene il monitoraggio ICP sia stato precedentemente utilizzato in modelli animali traumatici di ICH e di emorragia subaracnoidea, il monitoraggio ICP in modelli spontanei di roditori IVH non è come comunemente riportato in letteratura 7,8. Quindi, il disegno sperimentale qui presentato includeva tre gruppi di ratti Sprague Dawley: sham, emorragia intraventricolare standard da 200 μl e controllo del veicolo. Per il gruppo IVH, è stato utilizzato un modello di iniezione di sangue intraventricolare autologo. Per gli animali di controllo del veicolo, è stata utilizzata l’iniezione intraventricolare della soluzione sterile di Ringer lattato. ICP, pressioni arteriose medie (MAP) e pressioni di perfusione cerebrale (CPP) sono state registrate intraoperatoriamente e i risultati sono riportati nel presente documento.

Protocol

Tutti i metodi di ricerca e la cura / manutenzione degli animali sono stati eseguiti in conformità con le linee guida istituzionali dell’Università della California, Davis. L’Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) dell’Università della California, Davis, ha approvato tutti i protocolli di utilizzo degli animali e le procedure sperimentali (protocollo IACUC #21874). 1. Ricovero per animali Ottenere ratti Sprague-Dawley di età 8-10 mesi. Prima di quals…

Representative Results

Pressioni di perfusione intracranica, arteriosa media e cerebraleSia i PIC che i MAP sono stati monitorati intraoperatoriamente in tutti gli animali (figura 1). I ratti avevano 8-10 mesi con un peso medio di 495 ± 17 g. Sono stati raccolti anche grafici ICP in tempo reale (Figura 2). Escludendo il gruppo fittizio, gli ICP sono aumentati significativamente durante l’iniezione intraventricolare nell’IVH e nei gruppi di controllo del …

Discussion

Questo studio ha studiato i meccanismi per misurare ICP, MAP e CPP in un modello animale di ratto IVH non traumatico. I risultati sono stati registrati dai seguenti gruppi: sham, VH 200 μL e animali di controllo del veicolo (iniezione intraventricolare di liquido cerebrospinale artificiale). Questo disegno sperimentale è stato scelto per studiare come le ICP possono essere monitorate durante l’iniezione IVH poiché abbiamo ipotizzato che il picco di ICP possa contribuire alla lesione cerebrale secondaria più significa…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questo lavoro è stato finanziato dalla sovvenzione NINDS: K08NS105914

Materials

0.25% bupivacaine Hospira, Inc. 409115901
1 mL syringe Covetrus 60734
10% providine iodine solution Aplicare MSD093947
20 mL syringe Covidien 8881520657
22 G needles Becton Dickinson 305155
28 G intraventricular needles P technologies 8IC313ISPCXC C313I/SPC 28-Gneedles to fit 22-G guide cannula with 6 mm projection
3-0 silk suture Henry Schein, Inc. SP116
3-way-stopcock Merti Medical Systems M3SNC
4% paraformaldehyde Fisher Chemical 30525-89-4
AnyMaze software Any-Maze behavioral tracking software Stoelting CO, USA
Artificial ointment Covetrus 48272
Blood collection vials with EDTA Becton Dickinson 367856
Bone wax CP Medical, Inc. CPB31A
Carprofen Zoetis, Inc. 54771-8507-1
Centrifuge Beckman BE-GS6R Model GS-6R
Cotton tip applicators Covetrus 71214
Drill Dremel 1600A011JA
Fiberoptic pressure sensors with readout units Opsens Medical OPP-M200-X-80SC- 2.0PTFE-XN-100PIT-P1 and LIS-P1-N-62SC Opp-M200 packaged pressure sensors with LifeSens system
Forceps 11923-13, 11064-07
Gauze Covetrus 71043
Guillotine World Precision Instruments 51330
Heating pad with rectal thermometer CWE, Inc. 08-13000 ,08-13014 TC1000 Temperature controller
Hemostats  13013-14,  13008-12
Isoflurane Covetrus 29405
Lactated ringers Baxter Healthcare Corp. Y345583
Laryngoscope American Diagnostic Corporation 4080
Metal clip Fine Scientic Tools 18056-14
Micro scissors Fine Scientic Tools 15007-08
Microscope Leica model L2
Needle driver 12003-15
Polyethylene tubing Thermo Fisher Scientific 14-170-12B PE-50 tubing
Rats Envigo Sprague Dawley rats 8–10 months old
Scalpel  10010-00
Scissors 14090-11
Stereotaxic instrument Kopf instruments Model 940 with ear bars
Syringe pump KD Scientific 780100 Model 100 series
Touhy Borst Abbott 23242
Ventilator Harvard rodent ventilator 55-0000 Model 683

Riferimenti

  1. Gates, P. C., Barnett, H. J. M., Vinters, H. V., Simonsen, R. L., Siu, K. Primary intraventricular hemorrhage in adults. Stroke. 17, 872-877 (1986).
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Citazione di questo articolo
Peterson, C., Hawk, C., Puglisi, C. H., Waldau, B. Intracranial Pressure Monitoring In Nontraumatic Intraventricular Hemorrhage Rodent Model. J. Vis. Exp. (180), e63309, doi:10.3791/63309 (2022).

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