यह काम 3 डी ब्रेन ट्यूमर मॉडल में कार्यान्वयन के लिए लचीले इंटरडिजिटेटेड इलेक्ट्रोड के विकास का वर्णन करता है, अर्थात्, इन विट्रो कल्चर, ओवो मॉडल में , और विवो म्यूरिन मॉडल में । प्रस्तावित विधि का उपयोग जटिलता के विभिन्न स्तरों पर ट्यूमर पर स्पंदित विद्युत क्षेत्रों के प्रभावों का मूल्यांकन करने के लिए किया जा सकता है।
ग्लियोब्लास्टोमा को इसकी उच्च स्तर की आक्रामकता के कारण मानक ऑन्कोलॉजी उपचारों के साथ मिटाना मुश्किल है। स्पंदित विद्युत क्षेत्रों (पीईएफ) पर आधारित बायोइलेक्ट्रिक उपचार उपचार दक्षता में सुधार के लिए आशाजनक हैं। हालांकि, वे कठोर इलेक्ट्रोड पर भरोसा करते हैं जो तीव्र और पुरानी क्षति का कारण बनते हैं, खासकर मस्तिष्क जैसे नरम ऊतकों में। इस काम में, लचीले इलेक्ट्रॉनिक्स का उपयोग ट्यूमर को पीईएफ देने के लिए किया गया था और फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी के साथ जैविक प्रतिक्रिया का मूल्यांकन किया गया था। एक पतली, पारदर्शी पैरिलीन-सी सब्सट्रेट पर इंटरडिजिटेटेड गोल्ड इलेक्ट्रोड को कंडक्टिंग पॉलिमर पेडोट: पीएसएस के साथ लेपित किया गया था, जिसके परिणामस्वरूप एक अनुरूप और बायोकम्पैटिबल डिवाइस था। ट्यूमर और उनके माइक्रोएन्वायरमेंट पर पीईएफ के प्रभावों की जांच विभिन्न जैविक मॉडल का उपयोग करके की गई थी। सबसे पहले, ग्लियोब्लास्टोमा कोशिकाओं के मोनोलेयर को विट्रो में घटनाओं की जांच के लिए इलेक्ट्रोड के शीर्ष पर सुसंस्कृत किया गया था। एक मध्यवर्ती चरण के रूप में, एक इनओवो मॉडल विकसित किया गया था जहां एक बटेर के भ्रूण झिल्ली में इंजीनियर ट्यूमर स्फेरॉइड को ग्राफ्ट किया गया था। प्रतिरक्षा प्रणाली की अनुपस्थिति के कारण, इससे अत्यधिक संवहनी ट्यूमर हो गए। विकास के इस प्रारंभिक चरण में, भ्रूण में कोई प्रतिरक्षा प्रणाली नहीं होती है, और ट्यूमर को विदेशी निकायों के रूप में मान्यता नहीं दी जाती है। इस प्रकार, वे मौजूदा भ्रूण संवहनी प्रणाली से अपने स्वयं के वाहिकाओं को विकसित करते हुए तेजी से विकसित हो सकते हैं, जो एक मूल्यवान 3 डी कैंसर मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है। अंत में, पीईएफ के लचीले इलेक्ट्रोड वितरण का मूल्यांकन एक कार्यात्मक प्रतिरक्षा प्रणाली के साथ एक पूर्ण जीव में किया गया था, जिसमें एक सिंजेनिक, ऑर्थोग्राफ्ट (इंट्राक्रैनील) माउस मॉडल का उपयोग किया गया था। लचीले कार्बनिक इलेक्ट्रोड उपकरणों के आरोपण से पहले ट्रांसजेनिक मल्टी-फ्लोरोसेंट चूहों के मस्तिष्क में ट्यूमर स्फेरॉइड को ग्राफ्ट किया गया था। एक सील कपाल खिड़की ने कई हफ्तों की अवधि में पीईएफ के साथ उपचार के दौरान ट्यूमर और इसके माइक्रोएन्वायरमेंट की मल्टीफोटॉन इमेजिंग को सक्षम किया।
ग्लियोब्लास्टोमा मल्टीफॉर्म (जीबीएम) एक अत्यधिक आक्रामक ट्यूमर है और इसलिए रिसेक्शन, रेडियोथेरेपी और कीमोथेरेपी जैसे मानक उपचारों के साथ उन्मूलन करना मुश्किल है। मल्टीमॉडल उपचार के बावजूद, रोग का निदान बहुत खराब रहता है और अधिकांश रोगी निदान 1,2 के 1 वर्ष के भीतर रोग की प्रगति का अनुभव करते हैं। हाल ही में, बायोइलेक्ट्रिक उपचार के विकास ने मौजूदा उपचारों में सुधार करने की बड़ी क्षमता दिखाई है। ये उपचार स्पंदित विद्युत क्षेत्रों (पीईएफ) के वितरण का उपयोग करते हैं, आमतौर पर एक ही उपचार सत्र में, सेलुलर झिल्ली अखंडता और ट्यूमर के माइक्रोएन्वायरमेंट को बाधित करने के लिए। यह कोशिका झिल्ली व्यवधान, जिसे इलेक्ट्रोपोरेशन के रूप में भी जाना जाता है, विद्युत क्षेत्र की तीव्रता और दालों की संख्या के आधार पर प्रतिवर्ती या अपरिवर्तनीय हो सकता है। अपरिवर्तनीय इलेक्ट्रोपोरेशन (आईआरई) को एक गैर-थर्मल ऊतक पृथक्करण तकनीक के रूप में लागू किया जाता है जिसमें विद्युत दालें सेलुलर झिल्ली को घातक नुकसान पहुंचाती हैं जिससे कोशिका मृत्युहो जाती है। प्रतिवर्ती इलेक्ट्रोपोरेशन इलेक्ट्रोकीमोथेरेपी (ईसीटी) में लागू किया जाता है, एक स्थापित तकनीक जिसमेंकैंसर कोशिकाओं में दवा अपटेक को बढ़ाने के लिए कीमोथेरेपी दवाओं के साथ संयोजन में पीईएफ का वितरण शामिल है। इसके अलावा, हाल के अध्ययनों ने कैंसर के उपचार के लिए उच्च दक्षता के साथ ईसीटी के विकल्प के रूप में कैल्शियम इलेक्ट्रोपोरेशन का प्रदर्शन किया, जो सस्ती भी है औरकम दुष्प्रभावों को प्रेरित करता है। इन आशाजनक प्रगति के बावजूद, पीईएफ को आम तौर पर कठोर, धातु इलेक्ट्रोड का उपयोग करके लागू किया जाता है जो नरम ऊतक 6 को नुकसान पहुंचाने के लिए जानेजाते हैं। मस्तिष्क विशेष रूप से ऐसे आक्रामक उपकरणों के प्रति संवेदनशील होता है जहां यांत्रिक बेमेल सूजन और एस्ट्रोग्लियल स्कारिंग 7 को प्रेरित करताहै।
इस संदर्भ में, ग्लियोब्लास्टोमा ट्यूमर के 3 डी मॉडल के साथ संयोजन में एक लचीली पीईएफ वितरण प्रणाली प्रस्तुत की जाती है, माइक्रोफैब्रिकेशन से एक मुराइन मॉडल तक। अनुरूप इलेक्ट्रोड मानक पतली-फिल्म माइक्रोफैब्रिकेशन प्रक्रियाओं के साथ बनाए जाते हैं, जिसमें पैरिलीन-सी, गोल्ड और पेडोट: पीएसएस 8,9 जैसे नरम और जैव-संगत सामग्री का उपयोग शामिल है। इलेक्ट्रोड उंगलियों10 के बीच इमेजिंग के लिए पर्याप्त पारदर्शिता बनाए रखते हुए एक बड़े सतह क्षेत्र को कवर करने के लिए एक इंटरडिजिटेटेड इलेक्ट्रोड डिज़ाइन का उपयोग किया जाता है। ट्यूमर मॉडल के लिए, आनुवंशिक रूप से एन्कोडेड फ्लोरेसेंस रिपोर्टर को व्यक्त करने वाले ग्लियोब्लास्टोमा कोशिकाओं के 3 डी स्फेरॉइड का उत्पादन तरल-ओवरले 96-वेल प्लेट विधि11 की भिन्नता का उपयोग करके किया जाता है। स्फेरॉइड को एक बटेर भ्रूण के कोरियोलैंटोइक झिल्ली में ग्राफ्ट किया जाता है, जिसके परिणामस्वरूप एक इनवो मॉडल होता है जिसका उपयोग एंजियोजेनेसिस या ड्रग टॉक्सिकोलॉजी12,13 का अध्ययन करने के लिए बड़े पैमाने पर किया जाता है। भ्रूण के विकास के इस चरण में प्रतिरक्षा प्रणाली की अनुपस्थिति में भ्रूण के वाहिका द्वारा ट्यूमर को ग्राफ्ट और संवहनी किया जा सकताहै। लचीले इलेक्ट्रोड को तब गोलाकार और इसके वाहिका पर पीईएफ वितरण के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए संवहनी ट्यूमर के शीर्ष पर रखा जाता है। अंत में, इन प्रभावों की जांच ट्यूमर माइक्रोएन्वायरमेंट और प्रतिरक्षा प्रणाली सहित एक पूर्ण जीवित जीव पर की जाती है, जो मुराइन मॉडल14 के मस्तिष्क पैरेन्काइमा में इंजीनियर स्फेरॉइड को प्रत्यारोपित करके होती है। लचीले इलेक्ट्रोड को सम्मिलन स्थल के शीर्ष पर रखा जाता है और क्रैनियोटॉमी को ग्लास विंडो के साथ सील कर दिया जाता है, जिससे कई हफ्तों में बार-बार दो-फोटॉन इमेजिंग की अनुमति मिलती है।
ये विधियां माइक्रोइलेक्ट्रॉनिक इंजीनियरिंग से लेकर ऑन्कोलॉजी अनुप्रयोगों तक विभिन्न डोमेन में रुचि रखने वाले लोगों के लिए उपयोगी होंगी। माइक्रोफैब्रिकेशन प्रोटोकॉल का उपयोग किसी भी एप्लिकेशन के लिए किया जा सकता है और पीईडीओटी: पीएसएस के साथ लेपित पतली-फिल्म धातु इलेक्ट्रोड की आवश्यकता होती है। इसके अलावा, एंटीट्यूमर विद्युत उपचार के मूल्यांकन के लिए विकसित जैविक मॉडल प्रत्यारोपित सामग्री के लिए सेलुलर, संवहनी और प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के भेदभाव की जांच के लिए सामान्य रुचि के होंगे।
इस काम में वर्णित दृष्टिकोण जैविक संगठन के विभिन्न स्तरों पर पीईएफ के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए एक एकीकृत पीईएफ वितरण प्रणाली के साथ मस्तिष्क ट्यूमर मॉडल को सक्षम बनाता है। माइक्रोफैब्रिकेशन प्रोटोकॉल में मानक पतली-फिल्म प्रक्रियाएं होती हैं, जो इलेक्ट्रोड डिजाइन में स्वतंत्रता की एक बड़ी डिग्री प्रदान करती हैं जिन्हें विशिष्ट अनुप्रयोग के लिए अनुकूलित किया जा सकता है। कभी-कभी, निर्माण के दौरान होने वाले इलेक्ट्रोड के झुकाव को कम करने के लिए, निर्माण के अंत में एक अतिरिक्त थर्मल एनीलिंग चरण उपयोगी हो सकता है।
फ्लोरोसेंट कैल्शियम संकेतक को व्यक्त करने वाली एक स्थिर ग्लियोब्लास्टोमा सेल लाइन का उपयोग डाई डिलीवरी और प्रतिधारण से जुड़ी सभी जटिलताओं से बचता है, खासकर 3 डी ट्यूमर में जो बहुत घनेहैं। दरअसल, मानक रासायनिक फ्लोरोसेंट कैल्शियम संकेतक17 की तुलना में लंबी अवधि में एक उच्च अभिव्यक्ति स्तर देखा जाता है। इस प्रोटोकॉल को विभिन्न सेल लाइनों पर लागू किया जा सकता है, क्योंकि इसका उपयोग आमतौर पर इमेजिंग तंत्रिका गतिविधि11 के लिए किया जाता है। यहां, मानव और मुराइन सेल लाइनों का उपयोग किया गया था (क्रमशः इम्यूनोडेफिशिएंट या इम्यूनोसक्षम चूहों में आरोपण के लिए यू 87 और जीएल 261)। दरअसल, हाल के अध्ययनों से पता चला है कि यू 87 सेल लाइन मूल कोशिकाओं से अलग है क्योंकि सेल संस्कृति के वर्षों में कई उत्परिवर्तन प्राप्त किए गए थे, जो प्रयोगात्मक पुनरुत्पादक18 को प्रभावित करते थे। 3 डी ट्यूमर की तैयारी के लिए उपयोग की जाने वाली विधि उच्च-थ्रूपुट, प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य है, और सेल लाइन, सीडिंग पर कोशिकाओं की संख्या और विकास के समय के आधार पर एक विशिष्ट आकार के स्फेरॉइड की पीढ़ी की अनुमति देतीहै। हालांकि, ये स्फेरॉइड घने होते हैं, जो ट्यूमर के मूल में इमेजिंग करते समय एक नुकसान प्रस्तुत करता है।
इन ओवो मॉडल मस्तिष्क में मौजूद अन्य सेल प्रकारों के साथ बातचीत के बिना, 3 डी ट्यूमर और उनके वाहिका पर पीईएफ के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए पहले दृष्टिकोण के रूप में उपयोगी है। यह मॉडल सस्ती, तेज, उच्च-थ्रूपुट है, और पशु मॉडल की तुलना में कम नैतिक मुद्दों को उठाता है। पूरे प्रयोग के दौरान भ्रूण की अखंडता को बनाए रखना महत्वपूर्ण है, क्योंकि यह इसके अस्तित्व और इमेजिंग की गुणवत्ता को प्रभावित कर सकता है। भ्रूण झिल्ली को नुकसान से बचने के लिए बटेर अंडे को खोलते समय विशेष सावधानी बरतनी चाहिए। भ्रूण को मारने वाले रक्तस्राव से बचने के लिए ग्राफ्ट और लचीले इलेक्ट्रोड के प्लेसमेंट को भी सावधानीपूर्वक किया जाना चाहिए। रक्त वाहिकाओं में फ्लोरोसेंट डाई का इंजेक्शन ट्यूमर कोशिकाओं के एक साथ विज़ुअलाइज़ेशन और फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी के साथ वैस्कुलराइजेशन की अनुमति देता है। भ्रूण के तरल में डाई रिसाव से बचने के लिए इंट्राओकुलर इंजेक्शन सावधानी से किया जाना चाहिए, जो पृष्ठभूमि में अवशिष्ट प्रतिदीप्ति का कारण बन सकता है जो इमेजिंग की गुणवत्ता को कम करता है। इस मॉडल का उपयोग दवा अपटेक का पालन करने के लिए भी किया जा सकता है, क्योंकि यह संचार प्रणाली तक पहुंच की अनुमति देता है। हालांकि, प्रयोग भ्रूण के 12-दिन के जीवित रहने के समय से सीमित हैं, इस प्रकार 7 दिनों के अवलोकन की अनुमति देते हैं, जो विवो मॉडल21 की तुलना में काफी कम है।
विवो ब्रेन ट्यूमर मॉडल की निगरानी 4 से 5 सप्ताह तक की जा सकती है, इससे पहले कि जानवर अचानक 20% वजन घटाने द्वारा निर्धारित एक नैतिक प्रयोगात्मक समापन बिंदु तक पहुंच जाएं। यह अच्छी तरह से सहन किया जाता है और जगह पर रहता है यदि इलेक्ट्रोड की कनेक्टिंग पूंछ बहुत लंबी नहीं है। अन्यथा, जानवर फ्लिपिंग कनेक्टर को खरोंचते हैं, जो अंततः फट सकता है, इसलिए उत्तेजक के बाद के कनेक्शन को रोकता है। यह 4 सप्ताह की अवधि फिर भी ग्लियोब्लास्टोमा विकास के विभिन्न चरणों को कवर करने के लिए मूल्यवान है। अलग-अलग समय अंतराल पर रुचि की एक ही मात्रा में ट्यूमर सेल घनत्व की तुलना करते समय, ट्यूमर विकास कैनेटीक्स का विकास देखा जा सकता है। विशेष रूप से, प्रतिरक्षा स्विच22 के समय ट्यूमर की वृद्धि देखी गई थी। एक उत्तेजक इलेक्ट्रोड की उपस्थिति में एक समान अध्ययन ट्यूमर प्रसार दर और प्रतिरक्षा उन्मूलन के लिए ट्यूमर संवेदनशीलता पर पीईएफ के प्रभाव पर सूचित करेगा। ओवो मॉडल की तुलना में, इन विवो मॉडल को ट्यूमर की प्रगति पर प्रतिरक्षा कोशिकाओं के प्रभाव और पीईएफ के चिकित्सीय प्रभाव में उनके योगदान का अध्ययन करने के लिए एक मूल्यवान प्रीक्लिनिकल मॉडल के रूप में देखा जा सकता है। इस प्रोटोकॉल को कपाल विंडो 14 रखने से पहले ट्यूमर पर एक लचीले इलेक्ट्रोड डिवाइस के अतिरिक्त पिछले लेख से अनुकूलितकिया गया है। ट्यूमर के तीव्र और पुराने बायोइलेक्ट्रिक उपचार दोनों को दो-फोटॉन माइक्रोस्कोपी के साथ प्रत्यक्ष और बाद के अवलोकनों की विशेषता हो सकती है, यह देखते हुए कि प्रारंभिक उत्तेजना से कोशिका मृत्यु को प्रेरित करने और प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के स्थायी विकृति को ट्रिगर करने की उम्मीद है।
लचीली जांच के कनेक्शन दो-फोटॉन माइक्रोस्कोप के तहत आसानी से सुलभ हैं। विद्युत उत्तेजना मापदंडों को इस प्रकार तंत्रिका ऊतक और / या लक्षित कोशिकाओं पर देखे गए प्रभाव के आधार पर वास्तविक समय में समायोजित किया जा सकता है, जैसे कि एक चिकित्सा चिकित्सक अपने रोगी की एमआरआई या सीटी छवियों को देखते समय पारंपरिक प्रक्रियाएं करेगा। एक अंतिम विचार ऊतक पुन: विकास को रोकने के लिए सुपरग्लू और सिलिकॉन गोंद के साथ मस्तिष्क पर इलेक्ट्रोड की सावधानीपूर्वक सीलिंग का महत्व है।
अंत में, यहां वर्णित प्रोटोकॉल ग्लियोब्लास्टोमा ट्यूमर मॉडल के लिए लचीले कार्बनिक बहुलक इलेक्ट्रोड के साथ पीईएफ थेरेपी के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए एक अभिनव मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है। दो मॉडल जटिलता के विभिन्न स्तरों को प्रदर्शित करते हैं जैसे कि कार्रवाई के तंत्र की बेहतर समझ के लिए सेलुलर, संवहनी या प्रतिरक्षा प्रभाव को अलग किया जा सकता है। अनुरूप, सतही इलेक्ट्रोड ट्यूमर माइक्रोएन्वायरमेंट के विघटन को सक्षम करते हुए आयट्रोजेनिक क्षति को कम करते हैं, जिससे इंट्रासेल्युलर कैल्शियम15 के वाहिकासंकीर्णन या विकृति को ट्रिगर किया जाता है।
The authors have nothing to disclose.
यहां रिपोर्ट किए गए काम को फ्रांसीसी राष्ट्रीय अनुसंधान एजेंसी (एएनआर-18-सीई 19-0029) द्वारा समर्थित किया गया था। लेखक एक स्थिर जीसीएएमपी 6 एफ सेल लाइन की पीढ़ी में उनके योगदान के लिए एसएम बर्डेट और इन ओवो मॉडल के साथ उनकी मदद के लिए डी ओ’कॉनर को गर्मजोशी से धन्यवाद देते हैं।
(3-Glycidyloxypropyl)trimethoxysilane | Sigma | 440167 | GOPS |
0.25% Trypsin-EDTA (1X) | Gibco | 25200-056 | |
4-Dodecylbenzenesulfonic acid | Sigma | 44198 | DBSA |
96-well plate | Falcon | 353075 | |
Acetone | Technic | 530 | |
Acrylic resin | Fischer scientific | NC1455685 | |
agarose | Sigma | A9539 | |
autoclave | Tuttnauer | 3150 EL | |
AZ 10XT | Microchemicals | Positive photoresist | |
AZ 826 MIF Developer | Merck | 10056124960 | Metal-ion-free developer for the negative photoresist |
AZ Developer | Merck | 10054224960 | Metal-ion-free developer for the positive photoresist |
AZ nLof 2070 | Microchemicals | Negative photoresist | |
Buprenorphine | Axience | ||
Carprofen | Rimadyl | ||
Centrifuge Sorvall Legend X1R | Thermo Scientific | 75004260 | |
CMOS camera Prime 95B | Photometrics | ||
CO2 incubator HERAcell 150i | Thermo scientific | ||
DAC board | National Instruments | USB 6259 | |
Déco spray Pébéo | Cultura | 3167860937307 | Black acrylic paint |
Dextran Texas Red 70.000 | Thermofisher | D1830 | |
Die bonding paste "Epinal" | Hitachi | EN-4900GC | Silver paste |
Dimethyl sulfoxide | Sigma | D2438 | |
Dispensing machine | Tianhao | TH-2004C | |
Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium + GlutaMAX™-I | Gibco | 10567-014 | |
Dulbecco's Modified Eagle's Medium | Sigma | D6429 | |
Egg incubator COUVAD'OR 160 | lafermedemanon.com | ||
Ethylene glycol | Carl Roth | 6881.1 | |
Fertilized eggs of Japanese quail | Japocaille | ||
Fetal Bovine Serum | VWR | S181BH | |
Flask | Greiner | 658170 | |
Fluorescence macroscope | Leica MZFLIII | ||
Gl261 | DSMZ | ACC 802 | |
Gold pellets – Dia 3 mm x 6 mm th | Neyco | ||
Handheld automated cell counter | Millipore | PHCC00000 | |
Heating and drying oven | Memmert | UF110 | |
Hexadimethrine Bromide Sequa-brene | Sigma | S2667 | |
hot plate Delta 6 HP 350 | Süss Microtec | ||
Illumination system pE-4000 | CoolLed | ||
Infrared tunable femtosecond laser (Maï-Taï) | Spectra Physics (USA) | ||
Ionomycin calcium salt | Sigma | I3909 | |
Kapton tape SCOTCH 92 33×19 | 3M | Polyimide protection tape | |
Lab made pulse generator | |||
Labcoter 2 Parylene Deposition system PDS 2010 | SCS | ||
Lenti-X 293 T cell line | Takara Bio | 63218 | HEK 293T-derived cell line optimized for lentivirus production |
Lenti-X GoStix Plus | Takara Bio | 631280 | Quantitative lentiviral titer test |
Mask aligner MJB4 | Süss Microtec | ||
Micro-90 Concentrated cleaning solution | International Products | M9050-12 | |
Microscope slides 76 x 52 x 1 mm | Marienfeld | 1100420 | |
Needles 30G | BD Microlance 3 | 304000 | |
PalmSens4 potentiostat | PalmSens | ||
parylene-c : dichloro-p-cyclophane | SCS | 300073 | |
PCB Processing Tanks | Mega Electronics | PA104 | |
PEDOT:PSS Clevios PH 1000 | Heraeus | ||
penicillin / streptomycin | Gibco | 15140-122 | |
Petri dish | Falcon | 351029 | |
pGP-CMV-GCaMP6f | Addgene | 40755 | plasmid |
Phosphate Buffer Saline solution | Thermofisher | D8537 | |
Plasma treatment system PE-100 | Plasma Etch | ||
PlasmaLab 80 Reactive Ion Etcher | Oxford Instruments | ||
Plastic mask | Selba | ||
Plastic weigh boat 64 x 51 x 19 mm | VWR | 10770-454 | |
Poly-dimethylsiloxane: SYLGARD 184 Silicone Elastomer Kit | Dow chemicals | 1673921 | |
Polyimide copper film 60 µm (Kapton) | Goodfellow | IM301522 | |
Propan-2-ol | Technic | 574 | |
Protolaser S | LPKF | ||
puromycin | Gibco | A11103 | |
Round cover glass 5 mm diameter | Fischer scientific | 50-949-439 | |
Scepter Sensors – 60 µm | Millipore | PHCC60050 | |
Silicone adhesive Kwik-Sil | World Precision Instruments | ||
spin coater | Süss Microtec | ||
Spin Coater | Laurell | WS-650 | |
Super glue | Office depot | ||
tetracycline-free fœtal bovine Serum | Takara Bio | 631105 | |
Thermal evaporator Auto 500 | Boc Edwards | ||
Two-photon microscope | Zeiss LSM 7MP | ||
U87-MG | ATCC | HTB-14 | Human glioblastoma cells |
Ultrasonic cleaner | VWR | ||
Vortex VTX-3000L | LMS | VTX100323410 | |
Xfect single shots reagent | Takara Bio | 631447 | Transfection reagent |