Utilizzo di un'iniezione cell-tracer per studiare l'origine delle cellule che formano neointima in un modello di parete laterale sacculare di ratto

Stefan Wanderer; Basil E. Grüter; Jeannine Kümin; Gwendoline Boillat; Sivani Sivanrupan; Kristina Catalano; Michael von Gunten; Hans Rudolf Widmer; Serge Marbacher; Lukas Andereggen

doi:10.3791/63580

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Articolo metodologico

Utilizzo di un'iniezione cell-tracer per studiare l'origine delle cellule che formano neointima in un modello di parete laterale sacculare di ratto

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DOI:

10.3791/63580

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16 marzo 2022

Stefan Wanderer^*¹^,² , Basil E. Grüter^*¹^,² , Jeannine Kümin¹^,² , Gwendoline Boillat¹^,² , Sivani Sivanrupan² , Kristina Catalano¹^,² , Michael von Gunten³ , Hans Rudolf Widmer⁴ , Serge Marbacher¹^,²^,⁵ , Lukas Andereggen¹^,²^,⁵

¹Department of Neurosurgery, Kantonsspital Aarau, ²Cerebrovascular Research Group, Department for BioMedical Research, University of Bern, ³Institute of Pathology Laenggasse, ⁴Department of Neurosurgery, Neurocenter and Regenerative Neuroscience Cluster, Inselspital, Bern University Hospital, University of Bern, ⁵Faculty of Medicine, University of Bern

^* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Abbiamo eseguito un'iniezione di tracciante cellulare lipofila a un punto per tracciare le cellule endoteliali, seguita da un'arteriotomia e sutura degli aneurismi della parete laterale sull'aorta addominale del ratto. La formazione di Neointima sembrava dipendente dall'arteria madre negli aneurismi decellularizzati ed è stata promossa dal reclutamento da cellule della parete dell'aneurisma in pareti vitali ricche di cellule.

Abstract

Il clipping microchirurgico crea una successiva barriera del flusso sanguigno negli aneurismi intracranici, mentre il trattamento endovascolare si basa sulla formazione di neointima e trombo. La fonte delle cellule endoteliali che coprono lo strato endoluminale del neointima rimane poco chiara. Pertanto, lo scopo del presente studio era quello di studiare l'origine delle cellule che formano neointima dopo l'iniezione di tracciante cellulare nel già consolidato modello di aneurisma microchirurgico della parete laterale del ratto di Helsinki.

Gli aneurismi laterali sono stati creati suturando sacche arteriose decellularizzate o vitali end-to-side all'aorta nei ratti Lewis maschi. Prima dell'arteriotomia con sutura dell'aneurisma, è stata eseguita un'iniezione di tracciante cellulare contenente colorante CM-Dil nell'aorta bloccata per etichettare le cellule endoteliali nel vaso adiacente e tracciare la loro proliferazione durante il follow-up (FU). Trattamento seguito da avvolgimento (n = 16) o stenting (n = 15). Al FU (7 giorni o 21 giorni), tutti i ratti sono stati sottoposti ad angiografia a fluorescenza, seguita da raccolta di aneurisma e valutazione macroscopica e istologica con conta cellulare immunoistologica per specifiche regioni di interesse.

Nessuno dei 31 aneurismi si era rotto al follow-up. Quattro animali sono morti prematuramente. La perfusione macroscopicamente residua è stata osservata nel 75,0% dei ratti a spirale e nel 7,0% dei ratti stentati. La quantità di cellule tracer-positive era significativamente elevata negli aneurismi stentati decellularizzati rispetto agli aneurismi a spirale rispetto al trombo il giorno 7 (p = 0,01) e neointima al giorno 21 (p = 0,04). Non sono state riscontrate differenze significative nel trombo o nella neointima negli aneurismi vitali.

Questi risultati confermano modelli di guarigione peggiori in spirale rispetto agli aneurismi stentati. La formazione di Neointima sembra particolarmente dipendente dall'arteria madre negli aneurismi decellularizzati, mentre è supportata dal reclutamento da cellule della parete dell'aneurisma in pareti vitali ricche di cellule. In termini di traduzione, il trattamento con stent potrebbe essere più appropriato per gli aneurismi altamente degenerati, mentre l'avvolgimento da solo potrebbe essere adeguato per gli aneurismi con pareti dei vasi per lo più sane.

Introduzione

L'emorragia subaracnoidea causata dalla rottura di un aneurisma intracranico (IA) è una condizione neurochirurgica devastante associata ad alta morbilità e mortalità 1,2,3,4. Oltre al clipping microchirurgico, che fornisce un contatto diretto tra endotelio ed endotelio, i dispositivi endovascolari hanno acquisito un'importanza crescente negli ultimi decenni per il trattamento delle IA rotte e scoperte incidentalmente. La risposta di guarigione nelle IA trattate endovascolarmente dipende principalmente dalla formazione di neointima e dall'org....