تقنيات التشريح وأخذ العينات النسيجية للقلب في النماذج الحيوانية الكبيرة لأمراض القلب والأوعية الدموية
Summary
نظرا للتشريح المعقد ، يمكن أن يكون من الصعب تنفيذ بروتوكول تشريح وحصاد قابل للتكرار باستمرار لعينات القلب. تعرض هذه المخطوطة العناصر الرئيسية لبعض بروتوكولات تشريح القلب القياسية، مع تسليط الضوء على كل من نهج الفحص الإجمالي ومواقع أخذ العينات المستخدمة عادة للفحص النسيجي المرضي.
Abstract
يعد الفحص الإجمالي القياسي وأخذ العينات عنصرين رئيسيين في إمكانية تكرار ونجاح الدراسات التجريبية لأمراض القلب والأوعية الدموية التي أجريت على الحيوانات الكبيرة. بالنظر إلى التشريح المعقد للقلب ، والاختلافات بين الأنواع ، وأنواع التفاعلات التعويضية والمرضية ، فإن البروتوكولات المتسقة يصعب تنفيذها. عادة ما يتم تكييف استخدام بروتوكولات التشريح المتعددة لتناسب تجربة القطاع الأولي ، ولا يزال التفضيل الشخصي مصدرا للتباين التجريبي وبين المراقبين. هنا ، الهدف هو تقديم السمات والمعالم التشريحية الرئيسية ، وبروتوكولات التشريح ، ومعايير أخذ العينات النسيجية للقلب في بعض الأنواع شائعة الاستخدام (بما في ذلك الكلاب والخنازير والمجترات والقطط) كنماذج لأمراض القلب والأوعية الدموية.
يتم عرض بروتوكولين قياسيين للفحص الإجمالي هنا. أولا ، طريقة التدفق الداخلي والخارجي ، والتي تتبع اتجاه تدفق الدم الفسيولوجي عبر القلب والأوعية الكبيرة (تستخدم بشكل متكرر في الكلاب والمجترات والخنازير) ، وثانيا ، تقنية التشريح المكونة من أربع غرف (تتمثل في القطط). يمكن تكييف كلتا التقنيتين مع أي نوع في ظروف تجريبية معينة. تشمل بروتوكولات أخذ العينات جميع مجالات الاهتمام (العقدة الجيبية الأذينية ، البطينين ، الحاجز بين البطينين ، الأذينين ، الصمامات ، والشريان الأورطي) ، وإذا تم تنفيذها بشكل صحيح ، فقم بتحسين كل من قابلية التكرار والموثوقية للدراسات التجريبية.
Introduction
نظرا للتشريح المعقد والصرامة المبكرة ، والتي يمكن أن تتداخل مع تقييم سمك جدار القلب ، فإن الفحص الإجمالي للقلب يمثل تحديا وعرضة للعديد من الأخطاء المتعلقة بالتقنية أو التفسير. يتم تضخيم ذلك من خلال الاختلافات المورفولوجية بين الأنواع وحقيقة أن العديد من أمراض القلب السريرية الرئيسية (بما في ذلك الحالات المبكرة من أمراض القلب التاجية والتليف والتهاب الشرايين والداء النشواني) لا ترتبط بأي تغييرات جسيمة ، كونها ، في جوهرها ، أمراض نسيجية. يمكن لبروتوكول التشريح الموحد وحصاد العينات النسيجية أن يحقق الاتساق بين المراقبين ، وفي الوقت نفسه ، قابلية المقارنة والتكرار للدراسات التجريبية لأمراض القلب والأوعية الدموية.
تم جمع العينات من كلبين (Canis lupus familiaris) (فرنسي يبلغ من العمر 3 سنوات ، ذكر البلدغ ، و 8 سنوات ، أنثى مختلطة السلالة) ، قطة (Felis catus) (ذكر قصير الشعر الأوروبي يبلغ من العمر 6 سنوات) ، خنزير محلي (Sus scrofa domesticus) (ذكر يبلغ من العمر 1 سنة ، ذكر أبيض كبير) ، وبقرة (Bos Taurus) (أنثى هولشتاين تبلغ من العمر 2 شهر). كل نوع من الأنواع المختارة له استخدام خاص كنموذج للقلب والأوعية الدموية لمرض مختلف. على سبيل المثال ، الكلاب هي نموذج مفضل لنمذجة عدم انتظام ضربات القلب. تفضل القطط لاعتلال عضلة القلب الضخامي (HCM) ، لأنها الأنواع ذات الانتشار الأعلى ل HCM ؛ تستخدم الخنازير كنموذج لاحتشاء عضلة القلب الحاد. وتستخدم المجترات كنموذج للتسمم بسبب تعرضها للسموم التي يمكن العثور عليها بسهولة في المروج11.
في هذه المخطوطة ، يتم تقديم بروتوكول واحد للنخر وبروتوكولين تشريح القلب ، مصممين لتحسين الفحص الإجمالي والنسيجي للقلب في أمراض القلب والأوعية الدموية التجريبية. تم تطوير البروتوكولات الموصوفة بناء على معلومات من الكتب المدرسية البيطرية1،2،4،5،6،7،8،9،10،11،12، وأدبيات المجلات3،13،14، والوثائق الرسمية 15، والندوات عبر الإنترنت 16 ، 17. تم حصاد العينات المستخدمة في هذه الدراسة من الجثث المقدمة إلى قسم علم الأمراض في USAMV Cluj-Napoca لتشخيص تشريح الجثة الروتيني.
Protocol
Representative Results
Discussion
عند تنفيذ البروتوكول الحالي ، يجب النظر بعناية في العديد من الخطوات الحاسمة لتحقيق نتائج متسقة. في الحيوانات الصغيرة ، تختلف قياسات القلب عن تلك الموجودة لدى البالغين (بما في ذلك سمك جدار البطين) ، وبشكل عام ، يمثل القلب نسبة أكبر من وزن الجسم11,12. يمكن قياس د?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
اي.
Materials
| 0.9% saline solution | B. BRAUN MELSUNGEN AG | W04479004 | For washing all the blood, and blood clots from the heart. |
| 10% neutral buffered formalin (NBF) | Q Path | 11699404 | Materials for collecting histopathology samples. |
| Bone cutting forceps | HELEN SRL | LS109HV | Sturdy instrument for cutting bone. |
| Cutting board | Ambition | 86304 | For an easier manipulation, and cutting the organs. |
| Decalcifying solution | Thermo Scientific TBD-2 | 6764004 | 1:1 mixture of 8% formic acid and hydrochloric acid. |
| Digital camera | Canon Inc. | PowerShot SX540 HS | For photographic, and videographic documentation. |
| Forceps | MKD-Medicale | 15-430 | Dissection instruments. |
| Histological cassettes | Q Path | 720-2215 | Materials for collecting histopathology samples. Dimensions: 3 × 2.5 × 0.4 cm |
| Knife | TEHNO FOOD COM SERV SRL | D2006/15 | Sharp blade for cutting soft tissue. |
| Latex gloves | MKD-Medicale | SANTEX-S | Protection equipment. |
| Mask | MKD-Medicale | 21221 | Protection equipment. |
| Petri dishes | MKD-Medicale | 0598-1V | Materials for collecting ancillary testing samples. |
| Plastic recipients | Corning Gosselin | TP200-02 | Materials for collecting histopathology samples. |
| Scale | ESPERANZA | MEEKS008 | For weighing the organs. |
| Scale | White Deals | 72 | For weighing the subjects. |
| Scalpel | MKD-Medicale | 10322E | Sharp blade for cutting soft tissue. |
| Scissors | MKD-Medicale | 13-260 | Dissection instruments. |
| Scrub | MKD-Medicale | 410100-52 | Protection equipment. |
| Syringes | MKD-Medicale | 10573EU | Materials for collecting ancillary testing samples. |
Riferimenti
- Ashworth, M. . Pathology of Heart Disease in the Fetus, Infant and Child: Autopsy, Surgical and Molecular Pathology. , (2019).
- Barone, R., Vigot, . Anatomie Comparée des Mammifères Domestiques: Angiologie. , (2011).
- Basso, C., et al. Guidelines for autopsy investigation of sudden cardiac death: 2017 update from the Association for European Cardiovascular Pathology. Virchows Archiv. 471 (6), 691-705 (2017).
- Bishop, S. P., Fox, P. R., Sisson, D., Moïse, N. S. Chapter 37 – Necropsy Techniques for the Heart and Great Vessels. Textbook of Canine and Feline Cardiology: Principles and Clinical Practice,.2nd ed. , 846-848 (1999).
- Joseph, D. R. The ratio between the heart-weight and body weight in various animals. Journal of Experimental Medicine. 10 (4), 521-522 (1908).
- Keenan, C. M., Vidal, J. D. Standard morphologic evaluation of the heart in the laboratory dog and monkey. Toxicologic Pathology. 34 (1), 67-74 (2006).
- Latimer, H. B. Variability in body and organ weights in the newborn dog and cat compared with that in the adult. The Anatomical Record. 157 (3), 449-456 (1967).
- Lee, J. C., Taylor, F. N., Downing, S. E. A comparison of ventricular weights and geometry in newborn, young, and adult mammals. Journal of Applied Physiology. 38 (1), 147-150 (1975).
- McDonough, S. P., Southard, T. . Necropsy Guide for Dogs, Cats, and Small Mammals. , 9 (2016).
- Prophet, E. B., Mills, B., Arrington, J. B., Sobin, L. H. . Laboratory Methods in Histotechnology. , 29-58 (1992).
- Robinson, W. F., Robinson, N. A., Grant Maxie, M., Saunders, W. B. Chapter 1 – Cardiovascular System. Jubb, Kennedy & Palmer’s Pathology of Domestic Animals, 6th ed. 3, 12-49 (2016).
- Tabaran, A. F. . Autopsie et Medecine Legale: Guide de Travaux Pratiques. , 21-86 (2020).
- . Toxpath.org Available from: https://www.toxpath.org/Trimming-N-Collection-Training.asp (2021)
