Optimisation de la stimulation auriculaire transœsophagienne pour évaluer la susceptibilité à la fibrillation auriculaire chez la souris
Summary
Le présent protocole décrit l’optimisation des paramètres expérimentaux lors de l’utilisation de la stimulation auriculaire transœsophagienne pour évaluer la susceptibilité à la fibrillation auriculaire chez la souris.
Abstract
Les modèles murins de facteurs de risque génétiques et acquis de fibrillation auriculaire (FA) se sont révélés utiles pour étudier les déterminants moléculaires de la FA. La stimulation électrique programmée peut être réalisée en utilisant la stimulation auriculaire transœsophagienne comme procédure de survie, permettant ainsi des tests en série sur le même animal. Cependant, de nombreux protocoles de stimulation existent, ce qui complique la reproductibilité. Le présent protocole vise à fournir une stratégie normalisée pour développer des paramètres expérimentaux spécifiques au modèle afin d’améliorer la reproductibilité entre les études. Des études préliminaires sont effectuées pour optimiser les méthodes expérimentales du modèle spécifique à l’étude, y compris l’âge au moment de l’étude, le sexe et les paramètres du protocole de stimulation (p. ex. mode de stimulation et définition de la susceptibilité à la FA). Il est important de noter que l’on prend soin d’éviter les énergies de stimulation élevées, car cela peut provoquer une stimulation du plexi ganglionnaire avec une activation parasympathique par inadvertance, se manifestant par un bloc auriculo-ventriculaire (AV) exagéré pendant la stimulation et souvent associé à une induction artificielle de la FA. Les animaux présentant cette complication doivent être exclus de l’analyse.
Introduction
La fibrillation auriculaire (FA) représente une dernière voie commune pour de multiples facteurs de risque acquis et génétiques. Pour les études portant sur les mécanismes physiopathologiques du substrat de la FA, les modèles murins sont avantageux compte tenu de la facilité de manipulation génétique et du fait que, en général, ils reproduisent la susceptibilité à la FA observée chez l’homme pour différents phénotypes cliniques 1,2,3. Cependant, les souris développent rarement une AF4 spontanée, ce qui nécessite l’utilisation d’études de stimulation auriculaire provocatrices.
La stimulation électrique programmée (PES) peut être effectuée pour évaluer l’électrophysiologie auriculaire murine et la susceptibilité à la FA en utilisant une stimulation intracardiaque5 ou transœsophagienne6. Si l’approche transœsophagienne est particulièrement avantageuse comme procédure de survie, son utilisation est compliquée par les nombreux protocoles expérimentaux publiés 7,8 et les sources de variabilité qui peuvent entraver la reproductibilité9. De plus, les comparaisons limitées des protocoles rapportés rendent difficile le choix d’un protocole de stimulation approprié.
Le protocole actuel vise à utiliser une stratégie systématique pour développer des méthodes de PES transœsophagiennes spécifiques au modèle pour évaluer la susceptibilité à la FA murine afin d’augmenter la reproductibilité. Il est important de noter que des études pilotes initiales sont réalisées pour optimiser le protocole de stimulation en tenant compte de l’âge, du sexe et de la variabilité du mode de stimulation, avec une stimulation parasympathique conçue pour minimiser la stimulation parasympathique accidentelle qui peut confondre les résultats9.
Protocol
Representative Results
Discussion
La stimulation auriculaire transœsophagienne permet non seulement des études en série chez le même animal, mais sa durée est généralement plus courte que les études intracardiaques (~20 min), minimisant ainsi l’utilisation d’anesthésiques et ses effets sur les paramètres électrophysiologiques.
Il est essentiel d’optimiser initialement les méthodes pour chaque modèle de souris. Le vieillissement augmente l’inducibilité de la FA chez les souris normales18…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
La figure 2 a été créée avec BioRender.com. Ce travail a été soutenu par des subventions du National Heart, Lung, and Blood Institute des National Institutes of Health (HL096844 et HL133127); l’American Heart Association (2160035, 18SFRN34230125 et 903918 [MBM]); et le National Center for Advancing Translational Sciences du National Institute of Health (UL1 TR000445).
Materials
| 27 G ECG electrodes | ADInstruments | MLA1204 | |
| 2-F octapolar electrode catheter | NuMED | CIBercath | |
| Activated carbon canister | VetEquip | 931401 | |
| Analysis software | ADInstruments | LabChart v8.1.13 | |
| Biological amplifier | ADInstruments | FE231 | |
| Data acquisition hardware | ADInstruments | PowerLab 26T | |
| Eye ointment | MWI Veterinary | NC1886507 | |
| Heating pad | Braintree Scientific | DPIP | |
| Isoflurane | Piramal | 66794-017-25 | |
| Stimulator | Bloom Associates | DTU-210 | |
| Stimulus Isolator | World Precision Instruments | Model A365 |
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