La legatura parziale del nervo sciatico induce dolore neuropatico cronico di lunga durata, caratterizzato da risposte esagerate agli stimoli termici e meccanici. Questo modello murino di dolore neuropatico è comunemente usato per studiare terapie innovative per la gestione del dolore. Questo articolo descrive in dettaglio la procedura chirurgica per migliorare la standardizzazione e la riproducibilità.
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Articolo metodologico
Legatura parziale del nervo sciatico: un modello murino di dolore neuropatico cronico per studiare l'effetto antinocicettivo di nuove terapie
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
La gestione del dolore cronico rimane impegnativa fino ad oggi e i trattamenti attuali sono associati a effetti avversi, tra cui tolleranza e dipendenza. Il dolore neuropatico cronico deriva da lesioni o malattie nel sistema somatosensoriale. Per studiare potenziali terapie con effetti collaterali ridotti, i modelli di dolore animale sono il gold standard negli studi preclinici. Pertanto, modelli ben caratterizzati e ben descritti sono cruciali per lo sviluppo e la convalida di terapie innovative.
La legatura parziale del nervo sciatico (pSNL) è una procedura che induce dolore neuropatico cronico nei topi, caratterizzata da ipersensibilità meccanica e termica, dolore continuo e cambiamenti nella temperatura degli arti, rendendo questo modello perfetto per studiare il dolore neuropatico in modo preclinico. pSNL è un modello vantaggioso per studiare il dolore neuropatico in quanto riproduce molti sintomi osservati negli esseri umani con dolore neuropatico. Inoltre, la procedura chirurgica è relativamente veloce e semplice da eseguire. Il pSNL unilaterale di un arto consente il confronto tra le zampe omolaterali e controlaterali, nonché la valutazione della sensibilizzazione centrale.
Per indurre ipersensibilità neuropatica cronica, viene utilizzato un filo di nylon 9-0 non assorbibile per legare il terzo dorsale del nervo sciatico. Questo articolo descrive la procedura chirurgica e caratterizza lo sviluppo del dolore neuropatico cronico attraverso più test comportamentali comunemente usati. Poiché una pletora di terapie innovative sono ora in fase di studio per il trattamento del dolore cronico, questo articolo fornisce concetti cruciali per la standardizzazione e una descrizione accurata degli interventi chirurgici necessari per indurre dolore neuropatico.
Introduzione
Il dolore cronico è un problema sanitario significativo in tutto il mondo ed è uno dei problemi di salute più costosi negli Stati Uniti. Il dolore cronico è meglio gestito quando entrambe le modalità farmacologiche e non farmacologiche sono utilizzate in modo multidisciplinare1. La gestione del dolore cronico è impegnativa e, in alcuni casi, non tratta adeguatamente il dolore2. Pertanto, sono necessari metodi nuovi e complementari per migliorare la gestione del dolore cronico e i modelli animali sono cruciali per studiare terapie innovative.
Il dolore neuropatico cronico deriva da lesioni o ma....
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Protocollo
Tutte le procedure sono state approvate dall'Institutional Animal Care and Use Committee dell'Università dell'Arizona e sono conformi alle linee guida per l'uso di animali da laboratorio del National Institutes of Health (pubblicazione NIH n. 80-23, 1966). I topi adulti C57Bl6/J privi di agenti patogeni (peso al test: 22-28 g) sono stati alloggiati in gabbie standard per topi vivarium (cinque topi per gabbia) in stanze climatizzate con un ciclo luce/buio di 12 ore e hanno avuto accesso a cibo e acqua ad libitum. Tutti gli esperimenti comportamentali sono stati condotti da sperimentatori ciechi alle condizioni di trattamento.
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Risultati
Il dolore neuropatico cronico è stato indotto attraverso la legatura parziale del nervo sciatico dei topi maschi C57Bl6/J (Figura 1A). La sensibilità meccanica è stata valutata utilizzando i filamenti di von Frey e il metodo "up-and-down". La sensibilità termica al calore è stata valutata utilizzando i test Hargreaves e hot plate. Tutti i dati sono stati analizzati con una ripetuta misura ANOVA bidirezionale con correzione Geisser-Greenhouse, per confrontare l'effetto della chirurgia pSNL su.......
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Discussione
Il trattamento del dolore cronico richiede spesso farmaci a lungo termine, rendendo difficile la gestione del dolore. Pertanto, i modelli preclinici sono uno strumento essenziale per valutare i potenziali benefici di terapie innovative basate su approcci farmacologici o non farmacologici. I numerosi modelli di dolore neuropatico cronico comportano sfide a causa della maggiore variabilità delle tecniche chirurgiche tra i diversi ricercatori, portando a una ridotta riproducibilità. Pertanto, è essenziale caratterizzare i p.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno alcun conflitto di interessi da segnalare. Nessuno degli autori del manoscritto ha ricevuto alcun compenso o rimborso o onorario in alcun altro modo. Gli autori non sono affiliati con alcun fornitore o azienda farmaceutica associata a questo studio.
Ringraziamenti
Questa ricerca è stata sostenuta dal National Center for Complementary and Integrative Health [R01AT009716, 2017] (M.M.I.), dal Comprehensive Chronic Pain and Addiction Center-University of Arizona (M.M.I.) e dal Medical Scientist Training Program (MSTP) presso l'Università dell'Arizona, College of Medicine, Tucson.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| 5/0, FS-2, 30" Sutura sintetica assorbibile intrecciata all'acido poliglicolico PGA non tinto | CP Medical | 421A | https://cpmedical.com/suturesearch/product/421a-visorb-50-fs-2-30/ |
| 6/0, P-1, 18" Monofilamento di polipropilene blu Sutura non assorbibile | CP Medical | 8697P | https://cpmedical.com/suturesearch/product/8697p-polypro-60-p-1-18/ |
| 9/0 (0,3 metrico) Monofilamento di nylon nero Sutura | Crestpoint Ophthalmics | MANI 1407 | https://crestpointophthalmics.com/mani-1407-suture-trape-spatula-nylon-black-mono-box-of-12.html |
| Allodinia Software | National Instruments, LabView 2015 | Quantificazione delle soglie medie di prelievo (dati di Von Frey) | |
| C57Bl6/J mice | Il laboratorio Jackson, Bar Harbor, ME | 000664 https://www.jax.org/strain/000664 | |
| Porta aghi Castroviejo | Strumenti di scienza fine | 12565-14 | https://www.finescience.com/en-US/Products/Wound-Closure/Needle-Holders/Castroviejo-Needle-Holder/12565-14 |
| Test della piastra calda fredda | Bioseb | BIO-CHP | https://www.bioseb.com/en/pain-thermal-allodynia-hyperalgesia/563-cold-hot-plate-test.html |
| Supporto in rete metallica rialzata per Von Frey | Bioseb | BIO-STD2-EVF | https://www.bioseb.com/en/pain-mechanical-allodynia-hyperalgesia/1689-elevated-metal-mesh-stand-30-cm-height-to-fit-up-to-2-pvf-cages.html |
| Pinze Graefe extra fini | Fine Science Tools | 11152-10 | https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-curved-medium-point-general-purpose-forceps/16100110 |
| Porta-aghi Fine Castroviejo | Simovision/Geuder | 17565 | https://simovision.com/assets/Uploads/Brochure-Geuder-Ophthalmic-Surgical-Instruments-EN2.pdf |
| Forbici fini (11,5 cm) | Fine Science Tools | 14558-11 | https://www.finescience.com/en-US/Products/Scissors/Standard-Scissors/Fine-Scissors-Tungsten-Carbide-ToughCut%C2%AE/14558-11 |
| Forbici fini (9 cm) | Strumenti per le scienze | 14558-09 | https://www.finescience.com/en-US/Products/Scissors/Standard-Scissors/Fine-Scissors-Tungsten-Carbide-ToughCut%C2%AE/14558-09 |
| Pinze per iride | Strumenti per le scienze | 11064-07 | https://www.finescience.com/en-US/Products/Forceps-Hemostats/Fine-Forceps/Iris-Forceps/11064-07 |
| Micro Adson pinze | Fine Science Tools | 392487 | https://www.fishersci.com/shop/products/micro-adson-tissue-forceps-1x2-teeth-german-steel/13820072#?keyword=adson%20forceps |
| Gabbie modulari per ratti e topi | Bioseb | BIO-PVF | https://www.bioseb.com/en/pain-mechanical-allodynia-hyperalgesia/1206-modular-holder-cages-for-rats-and-mice.html |
| Moretti/Effetre #240 Bacchette in vetro blu cobalto chiaro 4 mm | Ebay | N/A | https://www.ebay.com/itm/402389491328?hash=item5db0485e80:g:agYAAOS w9CtfnIVJ& amdata=enc %3AAQAHAAAAwCoqvgWRo NTe5Vq8PWOgfE4ygWeW4tL k81J1AFu%2Fkcbsk6pxYtJi6 digE5TL9SzlgMzYUMNDr%2B dku2%2B%2FEvB1qXqFmebE 020SGs9LPDXLL5w21un7jrM0 9xfWYv 9xfWYv1qXqFmebE5w21un7jrM0br/ 9xfWYvWYv1qXqFmebEbr/ 020SGs9LPDXLL5w21un7jrM0br/ 9xfWYvWYvIzBYQYh6FRWyUJngC uuA9Bkjb9lxtZoYlg5y6PyFR2P 34xFk5xaNC5ib65M1%2Fr%2F 4w2Iw45QqsSyXH2cuUKRom0 AGBoBaIr%2BbJw1VnlMjGuc9dtx 4fbPbqoBNSWjj3RbZPOPTYS8Q %3D%3D%7Ctkp% 3ABk9SR4q6- 6LfYA |
| Test Plantare per Stimolazione Termica - Apparato Hargreaves | Ugo Basile | 37570 | https://ugobasile.com/products/categories/pain-and-inflammation/plantar-test-for-thermal-stimulation |
| Valutatori Sensoriali Touch-Test, Set di 20 Monofilamenti | North Coast Medical | NC12775-99 | https://www.ncmedical.com/products/touch-test-sensory-evaluators_1278.html |
| Pinze da legatura | Duckworth & Kent | 2-504ER8 | https://duckworth-and-kent.com/product/tying-forceps-9/ |
Riferimenti
- Hassett, A. L., Gevirtz, R. N. Nonpharmacologic treatment for fibromyalgia: patient education, cognitive-behavioral therapy, relaxation techniques, and complementary and alternative medicine. Rheumatic Disease Clinics of North America. 35 (2), 393-407 (2009).
- Hylands-White, N., Duarte, R. V., Raphael, J. H.
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Ristampe e permessi
