Questo protocollo dimostra i dettagli passo-passo su come estrarre il primo molare mandibolare nel topo. Fornisce un metodo alternativo per i ricercatori che si concentrano sulla guarigione e la rigenerazione della mandibola.
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Articolo metodologico
L'istituzione di un modello murino di guarigione dell'orbita di estrazione molare mandibolare
In questo articolo
Sommario
Abstract
Questo studio introduce lo sviluppo di un modello di estrazione molare nella mandibola murina per fornire un modello praticabile per lo studio della rigenerazione ossea alveolare e dell'ossificazione intramembranosa. I topi C57/J6 sono stati utilizzati per estrarre il primo molare mandibolare per stabilire questo modello. Sono stati eutanasizzati e le mandibole bilaterali raccolte, rispettivamente a 1 settimana e 4 settimane dopo l'intervento. La successiva raccolta stereoscopica seriale, la valutazione istologica e la colorazione con immunofluorescenza sono state eseguite per dimostrare il successo della chirurgia. Subito dopo l'intervento chirurgico, le immagini stereoscopiche mostravano una presa di estrazione vuota. L'ematossilina e l'eosina (H & E) a 1 settimana e la colorazione Masson a 4 settimane dopo l'intervento chirurgico hanno mostrato che l'area della radice originale era parzialmente e completamente riempita con trabecole ossee, rispettivamente. La colorazione con immunofluorescenza ha mostrato che, rispetto al lato omeostasi, l'espressione di Sp7 è aumentata a 1 settimana dopo l'intervento, suggerendo un'osteogenesi vigorosa nella fossa alveolare. Tutti questi risultati hanno dimostrato un modello praticabile di guarigione dell'alveolo di estrazione del dente murino. I prossimi studi che rivelano i meccanismi di guarigione dei difetti dell'osso mascellare o della guarigione dell'alveolo potrebbero adottare questo metodo.
Introduzione
La guarigione dell'alveolo dopo l'estrazione del dente è uno scenario clinico comune, che può causare complicazioni sconvenienti come emorragia dell'orbita, presa secca o persino osteomielite della mascella in caso di guarigione indesiderata 1,2,3. Queste comorbidità possono compromettere la qualità della vita dei pazienti e, peggio ancora, sfidare in modo vitale la riabilitazione protesica a causa della massiccia perdita ossea4. Sebbene le fasi di guarigione dell'alveolo siano state chiarite, sono inadeguate per dirigere l'assistenza clinica post-chir....
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Protocollo
Tutte le procedure animali in questo studio sono state esaminate e approvate dal Comitato etico della West China School of Stomatology, Sichuan University (WCHSIRB-D-2017-041). Per il presente studio sono stati utilizzati topi adulti C57BL/6, ottenuti da una fonte commerciale (vedi Tabella dei materiali).
1. Preparazione prechirurgica
- Preparazione dello strumento
- Preparare vari aghi di siringhe monouso (26G, 25G, 23G; vedi Tabella dei materiali) da utilizzare come ascensori. Inflettere la testa dell'ago di circa 20°-40°, come mostrato nella Figura 1
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Risultati
Per chiarire l'uso pratico di questo metodo, il primo molare mandibolare destro di due topi C57BL / 6 sani (3 mesi, entrambi femmine) è stato estratto e seguito per 1 settimana e 4 settimane, rispettivamente. Le mandibole sinistre non danneggiate sono state utilizzate come controlli sani. La figura 1A mostra le caratteristiche specifiche dell'apparecchio chirurgico, tra cui aghi da 26-23 G e una pinzetta oftalmica dentata. L'ago da 26 G viene rimosso e piegato. L'ago da 25 G è piegato a circ.......
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Discussione
Il modello di guarigione della presa murina è un metodo importante per svelare i meccanismi sottostanti nella guarigione e nella rigenerazione ossea, risolvendo in definitiva le sfide cliniche. Gli studi esistenti hanno dimostrato la possibilità del modello di estrazione degli incisivi e del modello di estrazione molare mascellare, mentre gli studi non hanno utilizzato il modello mandibolare del primo molare13,17,18. Tuttavia, g.......
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Dichiarazioni
Tutti i dati e le immagini originali sono inclusi in questo documento. Gli autori non dichiarano alcun conflitto di interessi.
Ringraziamenti
Questo lavoro è supportato dalla National Natural Science Foundation of China 81825005 (L.Y.), 82201045 (F.Y.) e 82100982 (F.L.) e dal Sichuan Province Science and Technology Program 2021JDRC0144 (F.L.), 2022JDRC0130 (F.Y.).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| 23/25/26 G ago | Chengdu Xinjin Shifeng Apparecchio medico & Strumenti Co. LTD. | SB1-074(IV) | |
| C57/B6J | Gempharmatech Experimental Animals Company, Chengdu, Cina | DAPI C57/B6J | |
| Beyotime | Cat#C1005 | ||
| Cassette di inclusione | CITOTEST Scientific | 80106-1100-16 | |
| Kit per macchie di ematossilina ed eosina | Biosharp | BL700B | |
| Isoflurano | RWD Life Science Co., Ltd | R510-22-10 | |
| Masson' s Kit Macchia Tricromica | Solarbio | G1340 | |
| Microtomo | Leica | RM2235 | |
| Pentobarbital Sodium | Huaxia Chemical Reagent Co., Ltd | 2018042001 | |
| Coniglio policlonale | anti-Sp7 | Abcam Cat # ab22552 | |
| Pinzette | Chengdu Xinjin Shifeng Apparecchio medico & Strumenti Co. LTD. | SB2-115 |
Riferimenti
- Mamoun, J. Dry socket etiology, diagnosis, and clinical treatment techniques. Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons. 44 (2), 52-58 (2018).
- Laraki, M., Chbicheb, S., El Wady, W. A....
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Ristampe e permessi
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