Apresentamos aqui um protocolo de avaliação de um coração implantado heterotopicamente após preservação ex situ normotérmica no modelo de ratos.
O transplante cardíaco é a terapia mais eficaz para a insuficiência cardíaca terminal. Apesar das melhorias nas abordagens terapêuticas e intervenções, o número de pacientes com insuficiência cardíaca à espera de transplante ainda está aumentando. A técnica de preservação ex situ normotérmica foi estabelecida como um método comparável à técnica convencional de armazenamento estático refrigerado. A principal vantagem dessa técnica é que os corações doados podem ser preservados por até 12 h em uma condição fisiológica. Além disso, essa técnica permite a ressuscitação dos corações doados após a morte circulatória e aplica as intervenções farmacológicas necessárias para melhorar a função do doador após o implante. Numerosos modelos animais foram estabelecidos para melhorar as técnicas normotérmicas de preservação ex situ e eliminar as complicações relacionadas à preservação. Embora os modelos animais de grande porte sejam fáceis de manusear em comparação com os modelos de animais pequenos, é caro e desafiador. Apresentamos um modelo de preservação do coração de doador ex situ normotérmico seguido de transplante abdominal heterotópico. Este modelo é relativamente barato e pode ser realizado por um único experimentador.
O transplante cardíaco continua sendo a única terapia viável para insuficiência cardíaca refratária 1,2,3,4. Apesar do aumento constante do número de pacientes com necessidade de transplante cardíaco, não tem sido observado aumento proporcional na disponibilidade de órgãos doados5. Para abordar essa questão, novas abordagens para a preservação do coração dos doadores têm sido desenvolvidas com o objetivo de melhorar os desafios e aumentar a disponibilidade de doadores 6,7,8,9.
A perfusão cardíaca ex situ normotérmica (PSNE) utilizando máquinas do sistema de cuidados de órgãos (SOO) surgiu como uma intervenção clínica 1,3. Essa técnica tem sido considerada uma alternativa adequada ao método convencional de armazenamento estático refrigerado (SCS) 2,9. A PNSNE reduz efetivamente a duração da isquemia fria, diminui a demanda metabólica e facilita o suprimento nutricional e a oxigenação ideais durante o transporte de órgãos doados10,11. Apesar do claro potencial desse método para melhorar a preservação de órgãos de doadores, sua aplicação clínica e investigação adicional têm sido limitadas pelos altos custos. Portanto, modelos animais pré-clínicos de PNEE são cruciais para identificar os principais desafios técnicos associados a essa técnica12,13. Suínos e ratos são os modelos animais preferidos para estudos pré-clínicos devido àsua tolerância isquêmica9. Embora o modelo suíno seja ideal para pesquisa básica e translacional, ele é limitado por seu alto custo e pela mão de obra intensiva necessária para o cuidado e manutenção. Em contraste, os modelos de ratos são mais baratos e fáceis de manusear14.
Neste estudo, apresentamos um modelo simplificado de PNEAN em ratos, seguido de transplante cardíaco heterotópico, para avaliar o impacto da técnica de preservação na condição do enxerto pós-implante. Esse modelo é simples, econômico e pode ser executado por um único experimentador. A Figura 1 mostra os esquemas do procedimento.
Nosso foco no estabelecimento desse modelo foi replicar o transplante cardíaco humano normotérmico. Os modelos não ejetantes são a técnica comumente preferida para preservar o coração doador em ambiente ex situ16. Embora os modelos de ejeção ofereçam muitas vantagens na avaliação da função cardíaca durante a perfusão ex situ 17, eles não são adequados para modelos de transplante heterotópico. No transplante heterotópico, o coração do …
The authors have nothing to disclose.
Este trabalho foi apoiado por uma bolsa B2021-0991 do Chonnam National University Hospital Biomedical Research Institute e NRF-2020R1F1A1073921 da Fundação Nacional de Pesquisa da Coreia
AES active evacuation system | Smiths medical | PC-6769-51A | Utilize CO2 and excess isoflurane |
Anesthesia machine | Smiths medical | PC-8801-01A | Mixes isoflurane and oxyegn and delivers to animal |
B20 patient monitor | GE medical systems | B20 | to observe mean aortic pressure and temperature |
Homeothermic Monitoring System | Harvard apparatus | 55-7020 | To monitor and maintain animal's temperature |
Micro-1 Rat oxygenator | Dongguan Kewei medical instruments | Micro-MO | For gas exchange in the langendorff circuit |
Micropuncture introducer Set | COOK medical | G48007 | for delivering cardioplegic solution to the arch through the abdominal aorta |
Microscope | Amscope | MU1403 | For zooming surgical field (Recipient) |
Surgical loupe | SurgiTel | L2S09 | For zooming surgical field (Donor) |
Syringe pump | AMP all | SP-8800 | To deliver cardioplegic solution |
Transonic flow sensor | Transonic | ME3PXL-M5 | Perfusion circuit flow sensor |
Transonic tubing flow module | Transonic | TS410 | flow acquiring system |
Watson – Marlow pumps | Harvard apparatus | 010.6131.DAO | Peristaltic pump used for recirculate perfusate |
WBC-1510A | JEIO TECH | E03056D | Heating bath |
Sprague-Dawley rats | Samtako Bio Korea Co., Ltd., Osan City Korea | ||
Medications | |||
BioHAnce Gel Eye Drops | SENTRIX Animal care | wet ointments for eye | |
Cefazolin | JW pharmaceutical | For prophilaxis | |
Custodiol | DR, FRANZ KOHLER CHEMIE GMBH | For heart harvesting | |
Diclofenac | Myungmoon Pharm. Co. Ltd | For pain control | |
Heparin | JW pharmaceutical | Anticoagulant | |
Insulin | JW pharmaceutical | hormon therapy | |
Saline | JW pharmaceutical | For hydration therapy |