एक खरगोश महाधमनी वाल्व स्टेनोसिस मॉडल प्रत्यक्ष गुब्बारे की चोट से प्रेरित
Summary
महाधमनी वाल्व स्टेनोसिस (एवीएस) के अंतर्निहित पैथोलॉजिकल तंत्र को समझने और चिकित्सीय हस्तक्षेप की प्रभावकारिता का मूल्यांकन करने के लिए एक उपयुक्त पशु मॉडल की आवश्यकता है। वर्तमान प्रोटोकॉल विवो में सीधे गुब्बारे की चोट के माध्यम से एवीएस खरगोश मॉडल विकसित करने के लिए एक नई प्रक्रिया का वर्णन करता है।
Abstract
रोगग्रस्त मानव महाधमनी वाल्व के विश्वसनीय स्रोतों तक पहुंच की कमी के कारण पशु मॉडल महाधमनी वाल्व स्टेनोसिस (एवीएस) के अंतर्निहित पैथोलॉजिकल तंत्र को समझने के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण के रूप में उभर रहे हैं। विभिन्न पशु मॉडलों में, एवीएस खरगोश मॉडल बड़े जानवरों के अध्ययन में सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले हैं। हालांकि, पारंपरिक एवीएस खरगोश मॉडल को महाधमनी वाल्व में महत्वपूर्ण स्टेनोसिस को प्रेरित करने के लिए आहार अनुपूरक और आनुवंशिक हेरफेर की दीर्घकालिक अवधि की आवश्यकता होती है, जो प्रयोगात्मक अध्ययनों में उनके उपयोग को सीमित करती है। इन सीमाओं को संबोधित करने के लिए, एक नया एवीएस खरगोश मॉडल प्रस्तावित है, जिसमें महाधमनी वाल्व को सीधे गुब्बारे की चोट से स्टेनोसिस प्रेरित होता है। वर्तमान प्रोटोकॉल न्यूजीलैंड सफेद (एनजेडडब्ल्यू) खरगोशों में एवीएस को प्रेरित करने के लिए एक सफल तकनीक का वर्णन करता है, जिसमें तैयारी, शल्य चिकित्सा प्रक्रिया और पोस्ट-ऑपरेटिव देखभाल के लिए चरण-दर-चरण प्रक्रियाएं हैं। यह सरल और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य मॉडल एवीएस की दीक्षा और प्रगति का अध्ययन करने के लिए एक आशाजनक दृष्टिकोण प्रदान करता है और रोग के अंतर्निहित रोग तंत्र की जांच के लिए एक मूल्यवान उपकरण प्रदान करता है।
Introduction
यह तेजी से मान्यता प्राप्त है कि उचित पशु मॉडल का उपयोग महाधमनी स्टेनोसिस (एएस) की प्रगति से जुड़े रोगग्रस्त मानव महाधमनी वाल्व वाल्व के विश्वसनीय स्रोतों तक पहुंच की कमी के कारण महाधमनी वाल्व स्टेनोसिस (एवीएस) के अंतर्निहित रोग तंत्र की बेहतर समझ में योगदान कर सकता है। एवीएस का अध्ययन करने के लिए विभिन्न पशु मॉडलों में, खरगोश सबसे अधिक इस्तेमाल किए जाने वाले बड़े-पशु एवीएस मॉडल में से एक हैं, और एवीएस खरगोश मॉडल को कोलेस्ट्रॉल / विटामिन डी 2 पूरक या आनुवंशिक हेरफेर 1,2,3,4 के माध्यम से प्रेरित किया जाता है।
यद्यपि खरगोश एवीएस मॉडल ने एवीएस के विकास और प्रगति में महत्वपूर्ण अंतर्दृष्टि प्रदान की है, फिर भी एवीएस को लगातार और पुन: प्रेरित करना चुनौतीपूर्ण बना हुआ है, जैसा कि हमारे प्रारंभिक प्रयोगों में देखा गया है।
आहार-प्रेरित और आनुवंशिक रूप से अतिसंवेदनशील पशु मॉडल के अलावा, चूहोंमें प्रत्यक्ष यांत्रिक चोट के माध्यम से एवीएस का एक नया मॉडल स्थापित किया गया है। यांत्रिक चोट मॉडल सफलतापूर्वक महाधमनी स्टेनोसिस को प्रेरित करता है और जंगली प्रकार के चूहों में एक सरल और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य एवीएस मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है। हमारे ज्ञान के अनुसार, खरगोश मॉडल में महाधमनी वाल्व पर यांत्रिक चोट के प्रभावों की जांच करने वाला कोई पूर्व अध्ययन नहीं हुआ है। इस प्रकार, यह अध्ययन महाधमनी वाल्व को सीधे गुब्बारे की चोट के माध्यम से पुरुष न्यूजीलैंड सफेद खरगोशों में एवीएस को प्रेरित करने के लिए एक नई प्रक्रिया प्रदान करता है, जो वाल्वुलर महाधमनी स्टेनोसिस की स्थिति की सटीक नकल कर सकता है। इस प्रोटोकॉल में तैयारी, शल्य चिकित्सा प्रक्रिया और पोस्ट-ऑपरेटिव देखभाल के चरण-दर-चरण विवरण शामिल हैं, जो प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य एवीएस खरगोश मॉडल को प्रेरित करने के लिए उपयोगी हैं।
Protocol
Representative Results
Discussion
पशु एवीएस मॉडल का उपयोग आमतौर पर एवीएस के रोग संबंधी पहलुओं का अध्ययन करने के लिए किया जाता है, जिसमें एवीएस की दीक्षा और प्रगति शामिल है। यह प्रोटोकॉल महाधमनी वाल्व को सीधे गुब्बारे की चोट से प्रेरित ए…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम को कोरियाई सरकार (एमएसआईटी) (नंबर 2020आर1ए4ए3079570), शिक्षा मंत्रालय (नंबर 2021आर1आई1ए1ए01051425) और व्यापार, उद्योग और ऊर्जा मंत्रालय, कोरिया गणराज्य द्वारा वित्त पोषित औद्योगिक रणनीतिक प्रौद्योगिकी विकास कार्यक्रम (नंबर 20014873) द्वारा वित्त पोषित नेशनल रिसर्च फाउंडेशन ऑफ कोरिया (एनआरएफ) अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था।
Materials
| 3-0 Silk suture | AILEE | SK312 | |
| 4% paraformaldehyde(PFA) | Intron | IBS-BP031-2 | |
| Alizarin red Solution | Millpore | TMS-008-C | |
| ASAHI SION BLUE | ASAHI | Guide wire | |
| Back Table Cover | Yuhan kimberly | 80101-30 | |
| Balloon In-deflation Device | Demax Medical | DID30s | |
| Bionet Veterinary monitor | BIONET | BM3 VET | |
| C-Arm | SIEMENS Healthcare GmbH | Cios alpha | |
| Certified Rabbit Diet | Purina | 5322 | 4.7% Hydrogenated Coconut Oil, 0.5% Cholesterol, & 1% Molasse |
| Curadle Smart Incubator | Autoelex | CS-CV206 | Intensive Care Unit (ICU) |
| Ergocalciferol | Sigma-aldrich | E5750 | Vitamin D2 |
| Fechtner conjunctiva forceps titanium | WORLD PRECISSION Instrument | WP1820 | |
| Forceps | HEBU | HB203 | |
| Gentamicin | Shin Poong | ||
| Glycopyrrolate | SamChunDang | ||
| Greenflex NS | DAI HAN PHARM | Normal saline 500 mL | |
| Hematoxylin solution | Sigma-aldrich | HT1079-1 SET | |
| Heparin | JW pharmaceutical | 25,000 U | |
| Infusion set for single use | SWOON MEDICAL | ||
| Iodine | Green pharmaceutical | ||
| Iodixanol | GE Healthcare | Visipaque | Inflation solution (contrast agent) |
| IV catheter 22 G | BD | 382423 | |
| IV catheter 24 G | BD | 382412 | |
| Ketoprofen | SamChunDang | ||
| Luer-Lok syringe 10 mL | Becton Dickinson Medical | ||
| Luer-Lok syringe 3 mL | Becton Dickinson Medical | ||
| Microscope | OLYMPUS | SZ61 | |
| Microtome | ThermoFisher Scientific | HM 325 | |
| MT stain kit | Sigma-aldrich | HT15-1kt | |
| Needel holder | Solco | 009-1304 | |
| Needle Holder with Lock and Suture | JEUNGDO BIO & PLANT | H-1222-18 | |
| Paraffin | LK LABKOREA | H06-660-107 | |
| PBS | Gibco | 10010-023 | |
| Potassium chloride 40 | Daihan Pharm | KCl | |
| Prelude Ideal Hydrophilic Sheath | MERIT MEDICAL | PID4F11018SS | Sheath 4F |
| PTA Balloon Dilatation catheter | Boston Scientific | H749-3903280208-0 | Balloon catheter 8.0 mm |
| Rompun | Elanco | Xylaxine | |
| sterile Gauze | DAE HAN Medical | 10 cm x 20 cm | |
| Surgical Gloves | Ansell | Ansell | |
| Surgical Gown | Yuhan kimberly | 90002-02 | |
| Surgical Scissors | Nopa, Germany | AC020/16 | |
| Surgical Tape | 3M micopore | 1530-1 | |
| Syringe 1 mL | Shin Chang Medical | ||
| Syringe 10 mL | Shin Chang Medical | ||
| Tissue cassette | Scilav korea | Cas3003 | |
| Transducer gel | SUNGHEUNG | SH102 | |
| Tridol | Yuhan Corp. | Tramadol HCl | |
| Ultrasound system | Philps | Affiniti 50 | |
| Von Kossa stain kit | Abcam | ab105689 | |
| Zoletil 50 | Virbac korea | Tiletamine & zolazepam |
Riferimenti
- Aliev, G., Burnstock, G. Watanabe rabbits with heritable hypercholesterolaemia: A model of atherosclerosis. Histology and Histopathology. 13 (3), 797-817 (1998).
- Cimini, M., Boughner, D. R., Ronald, J. A., Aldington, L., Rogers, K. A. Development of aortic valve sclerosis in a rabbit model of atherosclerosis: An immunohistochemical and histological study. Journal of Heart Valve Disease. 14 (3), 365-375 (2005).
- Drolet, M. C., Couet, J., Arsenault, M. Development of aortic valve sclerosis or stenosis in rabbits: role of cholesterol and calcium. Journal of Heart Valve Disease. 17 (4), 381-387 (2008).
- Sider, K. L., Blaser, M. C., Simmons, C. A. Animal models of calcific aortic valve disease. International Journal of Inflammation. 2011, 364310 (2011).
- Honda, S., et al. A novel mouse model of aortic valve stenosis induced by direct wire injury. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 34 (2), 270-278 (2014).
- Niepmann, S. T., et al. Graded murine wire-induced aortic valve stenosis model mimics human functional and morphological disease phenotype. Clinical Research in Cardiology. 108 (8), 847-856 (2019).
- Robbins, N., Thompson, A., Mann, A., Blomkalns, A. L. Isolation and excision of murine aorta; A versatile technique in the study of cardiovascular disease. Journal of Visualized Experiments. (93), e52172 (2014).
- Wirrig, E. E., Gomez, M. V., Hinton, R. B., Yutzey, K. E. COX2 inhibition reduces aortic valve calcification in vivo. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 35 (4), 938-947 (2015).
- Jung, S. H., et al. Spatiotemporal dynamics of macrophage heterogeneity and a potential function of Trem2(hi) macrophages in infarcted hearts. Nature Communications. 13 (1), 4580 (2022).
- Freeman, R. V., Otto, C. M. Spectrum of calcific aortic valve disease: Pathogenesis, disease progression, and treatment strategies. Circulation. 111 (24), 3316-3326 (2005).
- Lindman, B. R., et al. Calcific aortic stenosis. Nature Reviews Disease Primers. 2, 16006 (2016).
- Cuniberti, L. A., et al. Development of mild aortic valve stenosis in a rabbit model of hypertension. Journal of the American College of Cardiology. 47 (11), 2303-2309 (2006).
- Marechaux, S., et al. Identification of tissue factor in experimental aortic valve sclerosis. Cardiovascular Pathology. 18 (2), 67-76 (2009).
- Hara, T., et al. Progression of calcific aortic valve sclerosis in WHHLMI rabbits. Atherosclerosis. 273, 8-14 (2018).
