Se necesita un modelo animal apropiado para comprender los mecanismos patológicos subyacentes a la estenosis de la válvula aórtica (EAV) y para evaluar la eficacia de las intervenciones terapéuticas. El presente protocolo describe un nuevo procedimiento para desarrollar el modelo de conejo AVS a través de una lesión directa con balón in vivo.
Los modelos animales están emergiendo como una herramienta importante para comprender los mecanismos patológicos subyacentes a la estenosis de la válvula aórtica (EAV) debido a la falta de acceso a fuentes confiables de válvulas aórticas humanas enfermas. Entre los diversos modelos animales, los modelos de conejo AVS son uno de los más utilizados en estudios con animales grandes. Sin embargo, los modelos tradicionales de conejo AVS requieren un período prolongado de suplementación dietética y manipulación genética para inducir una estenosis significativa en la válvula aórtica, lo que limita su uso en estudios experimentales. Para abordar estas limitaciones, se propone un nuevo modelo de conejo AVS, en el que la estenosis es inducida por una lesión directa con balón en la válvula aórtica. El presente protocolo describe una técnica exitosa para la inducción de AVS en conejos blancos de Nueva Zelanda (NZW), con procedimientos paso a paso para la preparación, el procedimiento quirúrgico y el cuidado postoperatorio. Este modelo simple y reproducible ofrece un enfoque prometedor para estudiar el inicio y la progresión de la AVS y proporciona una herramienta valiosa para investigar los mecanismos patológicos subyacentes de la enfermedad.
Cada vez se reconoce más que el uso de modelos animales apropiados puede contribuir a una mejor comprensión de los mecanismos patológicos subyacentes a la estenosis de la válvula aórtica (EAV) debido a la falta de acceso a fuentes fiables de válvulas aórticas humanas enfermas asociadas con la progresión de la estenosis aórtica (EA). Entre los diversos modelos animales para el estudio de la AVS, los conejos son uno de los modelos AVS de animales grandes más utilizados, y el modelo de conejo AVS se induce a través de la suplementación con colesterol/vitamina D2 o la manipulación genética 1,2,3,4.
Aunque los modelos de AVS de conejo han proporcionado información significativa sobre el desarrollo y la progresión de AVS, sigue siendo un desafío inducir AVS de manera consistente y reproducible, como se vio en nuestros experimentos preliminares.
Además de los modelos animales inducidos por la dieta y genéticamente susceptibles, se ha establecido un nuevo modelo de AVS a través de la lesión mecánica directa en ratones 5,6. El modelo de lesión mecánica induce con éxito la estenosis aórtica y representa un modelo AVS simple y reproducible en ratones de tipo salvaje. Hasta donde sabemos, no ha habido estudios previos que examinen los efectos de una lesión mecánica en la válvula aórtica en modelos de conejos. Por lo tanto, este estudio proporciona un nuevo procedimiento para inducir AVS en conejos blancos machos de Nueva Zelanda a través de una lesión directa con balón en la válvula aórtica, que puede imitar con precisión la condición de estenosis aórtica valvular. Este protocolo incluye descripciones paso a paso de la preparación, el procedimiento quirúrgico y los cuidados postoperatorios, que son útiles para inducir modelos reproducibles de conejos AVS.
Los modelos animales de AVS se utilizan comúnmente para estudiar los aspectos patológicos de AVS, incluido el inicio y la progresión de AVS. Este protocolo introduce un nuevo modelo de AVS de conejo inducido por una lesión directa con balón en la válvula aórtica. En este estudio, el modelo de lesión valvular aórtica mostró un engrosamiento y calcificación significativo de las valvas. En comparación con el modelo AVS leve inducido por la suplementación dietética, la válvula aórtica en el modelo de lesión …
The authors have nothing to disclose.
Este trabajo contó con el apoyo de una subvención de la Fundación Nacional de Investigación de Corea (NRF) financiada por el gobierno coreano (MSIT) (n.º 2020R1A4A3079570), el Ministerio de Educación (n.º 2021R1I1A1A01051425) y el Programa de Desarrollo Tecnológico Estratégico Industrial (n.º 20014873) financiado por el Ministerio de Comercio, Industria y Energía de la República de Corea.
3-0 Silk suture | AILEE | SK312 | |
4% paraformaldehyde(PFA) | Intron | IBS-BP031-2 | |
Alizarin red Solution | Millpore | TMS-008-C | |
ASAHI SION BLUE | ASAHI | Guide wire | |
Back Table Cover | Yuhan kimberly | 80101-30 | |
Balloon In-deflation Device | Demax Medical | DID30s | |
Bionet Veterinary monitor | BIONET | BM3 VET | |
C-Arm | SIEMENS Healthcare GmbH | Cios alpha | |
Certified Rabbit Diet | Purina | 5322 | 4.7% Hydrogenated Coconut Oil, 0.5% Cholesterol, & 1% Molasse |
Curadle Smart Incubator | Autoelex | CS-CV206 | Intensive Care Unit (ICU) |
Ergocalciferol | Sigma-aldrich | E5750 | Vitamin D2 |
Fechtner conjunctiva forceps titanium | WORLD PRECISSION Instrument | WP1820 | |
Forceps | HEBU | HB203 | |
Gentamicin | Shin Poong | ||
Glycopyrrolate | SamChunDang | ||
Greenflex NS | DAI HAN PHARM | Normal saline 500 mL | |
Hematoxylin solution | Sigma-aldrich | HT1079-1 SET | |
Heparin | JW pharmaceutical | 25,000 U | |
Infusion set for single use | SWOON MEDICAL | ||
Iodine | Green pharmaceutical | ||
Iodixanol | GE Healthcare | Visipaque | Inflation solution (contrast agent) |
IV catheter 22 G | BD | 382423 | |
IV catheter 24 G | BD | 382412 | |
Ketoprofen | SamChunDang | ||
Luer-Lok syringe 10 mL | Becton Dickinson Medical | ||
Luer-Lok syringe 3 mL | Becton Dickinson Medical | ||
Microscope | OLYMPUS | SZ61 | |
Microtome | ThermoFisher Scientific | HM 325 | |
MT stain kit | Sigma-aldrich | HT15-1kt | |
Needel holder | Solco | 009-1304 | |
Needle Holder with Lock and Suture | JEUNGDO BIO & PLANT | H-1222-18 | |
Paraffin | LK LABKOREA | H06-660-107 | |
PBS | Gibco | 10010-023 | |
Potassium chloride 40 | Daihan Pharm | KCl | |
Prelude Ideal Hydrophilic Sheath | MERIT MEDICAL | PID4F11018SS | Sheath 4F |
PTA Balloon Dilatation catheter | Boston Scientific | H749-3903280208-0 | Balloon catheter 8.0 mm |
Rompun | Elanco | Xylaxine | |
sterile Gauze | DAE HAN Medical | 10 cm x 20 cm | |
Surgical Gloves | Ansell | Ansell | |
Surgical Gown | Yuhan kimberly | 90002-02 | |
Surgical Scissors | Nopa, Germany | AC020/16 | |
Surgical Tape | 3M micopore | 1530-1 | |
Syringe 1 mL | Shin Chang Medical | ||
Syringe 10 mL | Shin Chang Medical | ||
Tissue cassette | Scilav korea | Cas3003 | |
Transducer gel | SUNGHEUNG | SH102 | |
Tridol | Yuhan Corp. | Tramadol HCl | |
Ultrasound system | Philps | Affiniti 50 | |
Von Kossa stain kit | Abcam | ab105689 | |
Zoletil 50 | Virbac korea | Tiletamine & zolazepam |