Journal
/
/
Het extraheren van gemodificeerde microtubuli uit zoogdiercellen om microtubuli-eiwitcomplexen te bestuderen door cryo-elektronenmicroscopie
JoVE Journal
Biochemistry
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochemistry
Extracting Modified Microtubules from Mammalian Cells to Study Microtubule-Protein Complexes by Cryo-Electron Microscopy
DOI:

08:02 min

March 03, 2023

, , ,

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:43Cell Culture and Harvesting
  • 01:30Microtubule Extraction
  • 04:13Cryo-Electron Microscopy (EM) Grid Preparation
  • 06:16Results: Analyzing Microtubule-Protein Complexes
  • 07:34Conclusion

Summary

Automatic Translation

Hier beschrijven we een protocol om endogene tubuline te extraheren uit zoogdiercellen, die specifieke microtubuli-modificerende enzymen kunnen missen of bevatten, om microtubuli te verkrijgen die zijn verrijkt voor een specifieke modificatie. Vervolgens beschrijven we hoe de geëxtraheerde microtubuli kunnen worden versierd met gezuiverde microtubule-bindende eiwitten om rasters voor cryo-elektronenmicroscopie voor te bereiden.

Related Videos

Read Article