JoVE Journal > Neuroscience
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Risultati
Discussion
Divulgazioni
Acknowledgements
Materials
Riferimenti
Traduzione automatica
Neuroscienze

Ex vivo OCT-baseret multimodal billeddannelse af menneskelige donorøjne til forskning i aldersrelateret makuladegeneration

Published: May 26, 2023
doi:
10.3791/65240
, , , , , , ,
1Department of Ophthalmology and Visual Sciences,University of Alabama at Birmingham Heersink School of Medicine, 2Department of Ophthalmology,University Hospital of Zurich, 3Vitreous Retina Macula Consultants of New York, 4Department of Ophthalmology,New York University Grossman School of Medicine, 5Advancing Sight Network, 6Department of Ophthalmology,University Hospital Bonn

Summary

Laboratorieanalyser kan udnytte prognostisk værdi fra den langsgående optiske kohærenstomografi (OCT) -baserede multimodale billeddannelse af aldersrelateret makuladegeneration (AMD). Menneskelige donorøjne med og uden AMD er afbildet ved hjælp af OCT, farve, nær-infrarød reflektansscanning, laseroftalmoskopi og autofluorescens ved to excitationsbølgelængder før vævssektionering.

Abstract

En progressionssekvens for aldersrelateret makuladegeneration (AMD) lært af optisk kohærenstomografi (OCT) -baseret multimodal (MMI) klinisk billeddannelse kunne tilføje prognostisk værdi til laboratoriefund. I dette arbejde blev ex vivo OCT og MMI anvendt på humane donorøjne før retinal vævssektionering. Øjnene blev genvundet fra ikke-diabetiske hvide donorer i alderen ≥80 år med en død-til-bevaringstid (DtoP) på ≤6 timer. Globerne blev genfundet på stedet, scoret med en 18 mm trephin for at lette hornhindefjernelsen og nedsænket i bufret 4% paraformaldehyd. Farvefundusbilleder blev erhvervet efter fjernelse af forreste segment med et dissekeromfang og et spejlreflekskamera ved hjælp af trans-, epi- og flashbelysning ved tre forstørrelser. Globerne blev placeret i en buffer i et specialdesignet kammer med en 60 dioptrilinse. De blev afbildet med spektraldomæne OCT (30 ° makulaterning, 30 μm afstand, gennemsnit = 25), nær-infrarød reflektans, 488 nm autofluorescens og 787 nm autofluorescens. AMD-øjnene viste en ændring i retinale pigmentepitel (RPE) med drusen eller subretinale drusenoidaflejringer (SDD’er), med eller uden neovaskularisering og uden tegn på andre årsager. Mellem juni 2016 og september 2017 blev 94 højre øjne og 90 venstre øjne genoprettet (DtoP: 3,9 ± 1,0 timer). Af de 184 øjne havde 40,2% AMD, herunder tidlig mellemliggende (22,8%), atrofisk (7,6%) og neovaskulær (9,8%) AMD, og 39,7% havde unremarkable makulaer. Drusen, SDD’er, hyperreflekterende foci, atrofi og fibrovaskulære ar blev identificeret ved hjælp af OCT. Artefakter omfattede vævsopacificering, løsrivelser (bacillær, retinal, RPE, choroidal), foveal cystisk forandring, en bølgende RPE og mekanisk skade. For at styre kryo-sektioneringen blev OCT-volumener brugt til at finde fovea og optisk nervehoved landemærker og specifikke patologier. Ex vivo-mængderne blev registreret med in vivo-volumenerne ved at vælge referencefunktionen til øjensporing. Ex vivo-synligheden af den patologi, der ses in vivo , afhænger af bevaringskvaliteten. Inden for 16 måneder blev 75 hurtige DtoP-donorøjne på alle stadier af AMD genoprettet og iscenesat ved hjælp af kliniske MMI-metoder.

Introduction

Femten års styring af neovaskulær aldersrelateret makuladegeneration (AMD) med anti-VEGF-terapi under vejledning af optisk kohærenstomografi (OCT) har givet ny indsigt i progressionssekvensen og mikroarkitekturen af denne udbredte årsag til synstab. En vigtig anerkendelse er, at AMD er en tredimensionel sygdom, der involverer neurosensorisk nethinden, retinal pigmentepitel (RPE) og choroid. Som et resultat af OCT-billeddannelse af forsøgspatienter og medøjne hos behandlede klinikpatienter anerkendes patologiens træk ud over dem, der ses af farvefundusfotografering, en klinisk standard i årtier, nu. Disse omfatter intraretinal neovaskularisering (type 3 makula neovaskularisering1, tidligere angiomatøs proliferation), subretinale drusenoidaflejringer (SDD’er, også kaldet retikulær pseudodrusen)2, flere veje til RPE-skæbne3,4 og intenst gliotiske Müller-celler i atrofi 5,6.

Modelsystemer, der mangler makulaer (celler og dyr), genskaber nogle skiver af denne komplekse sygdom 7,8,9. Yderligere succes med at forbedre AMD-byrden kunne komme fra opdagelsen og udforskningen af primær patologi i menneskelige øjne, forståelse af makulaens unikke cellulære sammensætning efterfulgt af oversættelse til modelsystemer. Denne rapport skildrer et tre årtiers samarbejde mellem et akademisk forskningslaboratorium og en øjenbank. Målet med vævskarakteriseringsmetoderne beskrevet heri er todelt: 1) at informere udviklende diagnostisk teknologi ved at demonstrere grundlaget for fundusudseende og billeddannende signalkilder med mikroskopi og 2) at klassificere AMD-prøver til målrettede (immunhistokemiske) og ikke-målrettede molekylære opdagelsesteknikker (billeddannelsesmassespektrometri, IMS og rumlig transkriptomik), der bevarer fovea kun kegle og stavrig para- og perifovea. Sådanne undersøgelser kunne fremskynde oversættelsen til klinisk OLT, for hvilken en progressionssekvens og langsgående opfølgning er mulig gennem øjensporing. Denne teknologi, der er designet til at overvåge behandlingseffekter, registrerer scanninger fra et klinikbesøg til det næste ved hjælp af retinale kar. Sammenkædning af øjensporet OLT med laboratorieresultater opnået med destruktive teknikker kunne give et nyt niveau af prognostisk værdi til molekylære fund.

I 1993 fangede forskningslaboratoriet farvefotografier af postmortem fundus på film10. Denne indsats blev inspireret af den fantastiske fotomikroskopi og histologi af den menneskelige perifere nethinde af Foos og kolleger 11,12,13 og de omfattende AMD kliniske korrelationer af Sarks et al.14,15. Fra 2009 blev ex vivo multimodal imaging (MMI) forankret på spektraldomæne OCT vedtaget. Denne overgang var inspireret af andres lignende indsats 16,17 og især af erkendelsen af, at så meget af den ultrastruktur, der blev beskrevet af Sarks, var tilgængelig i tre dimensioner over tid i klinikken 18,19. Målet var at erhverve øjne med vedhæftede makulaer inden for en rimelig tidsramme for veldrevne undersøgelser af fænotyper på celleniveau i nethinden, RPE og choroid. Hensigten var at bevæge sig ud over “per øje” statistik til “per læsionstype”, en standard påvirket af de “sårbare plaque” -begreber fra hjerte-kar-sygdom20,21.

Protokollen i denne rapport afspejler erfaringer med næsten 400 par donorøjne, der er tiltrådt i flere strømme. I 2011-2014 blev Project MACULA-webstedet for AMD-histopatologi oprettet, som omfatter lagtykkelser og kommentarer fra 142 arkiverede prøver. Disse øjne blev bevaret fra 1996-2012 i et glutaraldehyd-paraformaldehydfikseringsmiddel til epoxyharpikshistologi med høj opløsning og elektronmikroskopi. Alle fundi var blevet fotograferet i farver, da de blev modtaget og blev genafbildet af OCT lige før histologi. En øjenholder oprindeligt designet til synsnerveundersøgelser22 blev brugt til at rumme en 8 mm diameter fuld tykkelse vævsstans centreret på fovea. OCT B-scanninger gennem fovealcentret og et sted 2 mm overlegent, svarende til histologi på samme niveauer, blev uploadet til hjemmesiden plus et farvefundusfotografi. Valget af OLT-flyene blev dikteret af AMD-patologiens fremtrædende plads under fovea23 og fremtrædende SDD’er i stangrige områder, der var bedre end fovea24,25.

Fra 2013 var øjne afbildet med OCT-forankret MMI i løbet af livet tilgængelige for direkte kliniskopatologiske korrelationer. De fleste (7 ud af 10 donorer) involverede patienter i en nethinden henvisningspraksis (forfatter: K.B.F.), som tilbød et avanceret direktivregister for patienter, der var interesserede i at donere deres øjne efter døden til forskningsformål. Øjnene blev genfundet og konserveret af den lokale øjenbank, overført til laboratoriet og forberedt på samme måde som Project MACULA øjnene. Pre-mortem kliniske OCT-volumener blev problemfrit aflæst i laboratoriet, hvilket tilpassede de patologiske træk, der blev set i løbet af livet, med de funktioner, der ses under mikroskopet26.

Fra 2014 begyndte prospektiv øjenindsamling med screening for AMD i donorøjne uden klinisk historie, men bevaret inden for en defineret tidsgrænse (6 timer). Til dette formål blev øjenholderen modificeret til at rumme en hel klode. Dette reducerede risikoen for løsrivelse omkring de afskårne kanter på den tidligere anvendte 8 mm stans. Øjnene blev bevaret i 4% bufret paraformaldehyd til immunhistokemi og overført til 1% den næste dag til langtidsopbevaring. I 2016-2017 (før pandemien) blev 184 øjne fra 90 donorer genoprettet. Statistikken og billederne i denne rapport er genereret fra denne serie. Under pandemitiden (lockdowns og eftervirkninger i 2020) fortsatte potentielle samlinger til transkriptomik og IMS-samarbejde i et reduceret tempo, hovedsageligt ved hjælp af 2014-metoderne.

Andre metoder til donor øjenvurdering er tilgængelige. Minnesota Grading System (MGS)27,28 er baseret på AREDS kliniske system til farvefundusfotografering 29. Begrænsningerne ved denne metode indbefatter kombinationen af atrofisk og neovaskulær AMD i et trin af “sen AMD”. Endvidere indebærer MGS fjernelse af den neurosensoriske nethinden før fotodokumentationen af RPE-choroid. Dette trin løsner SDD’er i varierende grad30,31 og fjerner den rumlige korrespondance mellem den ydre nethinden og dens støttesystem. Således kan bestræbelser på at forbinde metabolisk efterspørgsel og signalering fra nethinden til patologi i RPE-choroid hæmmes. Utah-systemet implementerede MMI ved hjælp af ex vivo farvefotografering og OCT til at kategorisere øjne bestemt til dissektion i regioner til RNA- og proteinekstraktioner32. Selvom det foretrækkes frem for hele øjenkopekstraktioner, repræsenterer området med en diameter på 3 mm med den højeste risiko for AMD-progression33,34 kun 25% af et fovea-centreret slag med en diameter på 6 mm. Således er teknikker, der kan lokalisere fund i forhold til fovea, såsom seriel sektionering for immunhistokemi, fordelagtige.

Protocol

Det institutionelle bedømmelsesudvalg ved University of Alabama i Birmingham godkendte laboratorieundersøgelserne, som overholdt god laboratoriepraksis og biosikkerhedsniveau 2/2+. Alle amerikanske øjenbanker overholder 2006 Uniform Anatomical Gifts Act og US Food and Drug Administration. De fleste amerikanske øjenbanker, herunder Advancing Sight Network, overholder de medicinske standarder fra Eye Bank Association of America. Materialetabellen viser forsyninger og udstyr….

Representative Results

Tabel 1 viser, at i løbet af 2016-2017 blev 184 øjne fra 94 hvide ikke-diabetiske donorer >80 år fundet. Den gennemsnitlige tid til død til bevaring var 3,9 timer (interval: 2,0-6,4 timer). Af de 184 undersøgte øjne havde 75 (40,2%) visse AMD. Følgende kategorier blev identificeret: Unremarkable (39,7%), Questionable (11,4%), Early-Intermediate AMD (22,8%), Atrofisk (7,6%), Neovaskulær (9,8%), Andet (8,7%) og Ukendt/Ikke registreret/Ikke graduerbar (<1%). Figur 2, fi…

Discussion

Ved hjælp af en befolkningsbaseret screeningstilgang i en 16 måneders periode i præ-COVID-æraen var det muligt at skaffe 75 donorøjne med AMD. Alle blev genoprettet med en kort DtoP og iscenesat ved hjælp af OCT-forankret MMI. Alderskriteriet (>80 år) ligger uden for det typiske aldersinterval for vævsudtagning beregnet til transplanterelige hornhinder. På trods af den fremskredne alder resulterede vores kriterier i øjne på alle stadier af AMD. Mange RPE-fænotyper er fælles for alle AMD-stadier, og nogle er …

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Vi takker Heidelberg Engineering for instrumenteringen og designet af den originale øjenholder, Richard F. Spaide MD for introduktionen til OCT-baseret multimodal billeddannelse, Christopher Girkin MD for at lette adgangen til kliniske billeddannelsesenheder og David Fisher for figur 1. Genopretningen af de menneskelige donorøjne til forskning blev støttet af National Institutes of Health (NIH) tilskud R01EY06019 (CAC), P30 EY003039 (Pittler), R01EY015520 (Smith), R01EY027948 (CAC, TA) R01EY030192 (Li), R01EY031209 (Stambolian) og U54EY032442 (Spraggins), IZKF Würzburg (N-304, T.A.), EyeSight Foundation of Alabama, International Retinal Research Foundation (CAC), Arnold og Mabel Beckman Initiative for Macular Research (CAC) og forskning til forebyggelse af blindhed AMD Catalyst (Schey).

Materials

Beakers, 250 mL Fisher # 02-540K
Bottles, 1 L, Pyrex  Fisher # 10-462-719 storage for preservative
Bunsen burner or heat source Eisco # 17-12-818 To melt wax
Camera, digital Nikon D7200 D7200
Computer and storage Apple iMac Pro; 14 TB external hard drive Image storage
Container, insulated Fisher # 02-591-45 For wet ice
Containers, 2 per donor, 40 mL Fisher Sameco Bio-Tite  40 mL # 13-711-86 For preservative
Crucible, quartz 30 mL Fisher # 08-072D Hold globe for photography
Cylinder, graduate, 250 mL Fisher # 08-549G
Disinfectant cleaning supplies   https://www.cardinalhealth.com/en/product-solutions/medical/infection-control/antiseptics.html
Eye holder with lens and mounting bracket contact J. Messinger jeffreymessinger@uabmc.edu custom modification of Heidelberg Engineering original design
Face Protection Masks Fisher # 19-910-667
Forceps, Harmon Fix Roboz  # RS-8247
Forceps, Micro Adson Roboz  # RS-5232
Forceps, Tissue Roboz # RS-5172
Glass petri dish, Kimax Fisher # 23064
Gloves Diamond Grip Fisher # MF-300
Gowns GenPro Fisher # 19-166-116
Image editing software Adobe Photoshop 2021, Creative Suite
KimWipes Fisher # 06-666
Lamps, 3 goosenecks Schott Imaging # A20800
Microscope, stereo Nikon SMZ 1000 for dissection
Microscope, stereo Olympus  SZX9 color fundus photography
Paraformaldehyde, 20%  EMS # 15713-S for preservative; dilute for storage
pH meter Fisher  # 01-913-806
Phosphate buffer, Sorenson’s, 0.2 M pH 7.2  EMS # 11600-10
Ring flash B & H Photo Video Sigma EM-140 DG 
Ruby bead, 1 mm diameter Meller Optics # MRB10MD
Safety Glasses 3M Fisher # 19-070-940
Scanning laser ophthalmoscope Heidelberg Engineering HRA2
Scissors, curved spring Roboz # RS-5681
Sharps container Fisher # 1482763
Shutter cord, remote Nikon MC-DC2
Spectral Domain OCT device Heidelberg Engineering Spectralis HRA&OCT https://www.heidelbergengineering.com/media/e-learning/Totara-US/files/pdf-tutorials/2238-003_Spectralis-Training-Guide.pdf
Stainless steel ball bearing, 25.4 mm diameter McMaster-Carr # 9529K31
Tissue marking dye, black Cancer Diagnostics Inc # 0727-1
Tissue slicer blades Thomas Scientific # 6767C18
Trephine, 18-mm diameter Stratis Healthcare # 6718L
TV monitor (HDMI) and cord for digital camera B&H Photo Video BH # COHD18G6PROB for live viewing and remote camera display features
Wax, pink dental EMS  # 72670
Wooden applicators Puritan # 807-12
DOWNLOAD MATERIALS LIST

Riferimenti

  1. Spaide, R. F., et al. Consensus nomenclature for reporting neovascular age-related macular degeneration data: Consensus on neovascular age-related macular degeneration nomenclature study group. Ophthalmology. 127 (5), 616-636 (2020).
  2. Spaide, R. F., Ooto, S., Curcio, C. A. Subretinal drusenoid deposits a.k.a. pseudodrusen. Survey of Ophthalmology. 63 (6), 782-815 (2018).
  3. Curcio, C. A., Zanzottera, E. C., Ach, T., Balaratnasingam, C., Freund, K. B. Activated retinal pigment epithelium, an optical coherence tomography biomarker for progression in age-related macular degeneration. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 58 (6), 211-226 (2017).
  4. Cao, D., et al. Hyperreflective foci, OCT progression indicators in age-related macular degeneration, include transdifferentiated retinal pigment epithelium. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 62 (10), 34 (2021).
  5. Zanzottera, E. C., et al. Visualizing retinal pigment epithelium phenotypes in the transition to geographic atrophy in age-related macular degeneration. Retina. 36, S12-S25 (2016).
  6. Edwards, M. M., et al. Subretinal glial membranes in eyes with geographic atrophy. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 58 (3), 1352-1367 (2017).
  7. Zhang, Z., Shen, M. M., Fu, Y. Combination of AIBP, apoA-I, and aflibercept overcomes anti-VEGF resistance in neovascular AMD by inhibiting arteriolar choroidal neovascularization. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 63 (12), 2 (2022).
  8. Jiang, M., et al. Microtubule motors transport phagosomes in the RPE, and lack of KLC1 leads to AMD-like pathogenesis. Journal of Cell Biology. 210 (4), 595-611 (2015).
  9. Collin, G. B., et al. Disruption of murine Adamtsl4 results in zonular fiber detachment from the lens and in retinal pigment epithelium dedifferentiation. Human Molecular Genetics. 24 (24), 6958-6974 (2015).
  10. Curcio, C. A., Medeiros, N. E., Millican, C. L. The Alabama Age-related Macular Degeneration Grading System for donor eyes. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 39 (7), 1085-1096 (1998).
  11. Bastek, J. V., Siegel, E. B., Straatsma, B. R., Foos, R. Y. Chorioretinal juncture. Pigmentary patterns of the peripheral fundus. Ophthalmology. 89 (12), 1455-1463 (1982).
  12. Lewis, H., Straatsma, B. R., Foos, R. Y., Lightfoot, D. O. Reticular degeneration of the pigment epithelium. Ophthalmology. 92 (11), 1485-1495 (1985).
  13. Lewis, H., Straatsma, B. R., Foos, R. Y. Chorioretinal juncture. Multiple extramacular drusen. Ophthalmology. 93 (8), 1098-1112 (1986).
  14. Sarks, J. P., Sarks, S. H., Killingsworth, M. C. Evolution of geographic atrophy of the retinal pigment epithelium. Eye. 2 (5), 552-577 (1988).
  15. Sarks, J. P., Sarks, S. H., Killingsworth, M. C. Evolution of soft drusen in age-related macular degeneration. Eye. 8 (3), 269-283 (1994).
  16. Ghazi, N. G., Dibernardo, C., Ying, H. S., Mori, K., Gehlbach, P. L. Optical coherence tomography of enucleated human eye specimens with histological correlation: Origin of the outer "red line&#34. American Journal of Ophthalmology. 141 (4), 719-726 (2006).
  17. Brown, N. H., et al. Developing SDOCT to assess donor human eyes prior to tissue sectioning for research. Graefe’s Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 247 (8), 1069-1080 (2009).
  18. Helb, H. M., et al. Clinical evaluation of simultaneous confocal scanning laser ophthalmoscopy imaging combined with high-resolution, spectral-domain optical coherence tomography. Acta Ophthalmologica. 88 (8), 842-849 (2010).
  19. Spaide, R. F., Curcio, C. A. Drusen characterization with multimodal imaging. Retina. 30 (9), 1441-1454 (2010).
  20. Naghavi, M., et al. From vulnerable plaque to vulnerable patient: a call for new definitions and risk assessment strategies: Part 1. Circulation. 108 (14), 1664-1672 (2003).
  21. Garcia-Garcia, H. M., Gonzalo, N., Regar, E., Serruys, P. W. Virtual histology and optical coherence tomography: from research to a broad clinical application. Heart. 95 (16), 1362-1374 (2009).
  22. Strouthidis, N. G., et al. Comparison of clinical and spectral domain optical coherence tomography optic disc margin anatomy. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 50 (10), 4709-4718 (2009).
  23. Sarks, S. H. Ageing and degeneration in the macular region: A clinico-pathological study. British Journal of Ophthalmology. 60 (5), 324-341 (1976).
  24. Sura, A. A., et al. Measuring the contributions of basal laminar deposit and Bruch’s membrane in age-related macular degeneration. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 61 (13), 19 (2020).
  25. Chen, L., Messinger, J. D., Kar, D., Duncan, J. L., Curcio, C. A. Biometrics, impact, and significance of basal linear deposit and subretinal drusenoid deposit in age-related macular degeneration. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 62 (1), 33 (2021).
  26. Litts, K. M., et al. Clinicopathological correlation of outer retinal tubulation in age-related macular degeneration. JAMA Ophthalmology. 133 (5), 609-612 (2015).
  27. Olsen, T. W., Feng, X. The Minnesota grading system of eye bank eyes for age-related macular degeneration. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 45 (12), 4484-4490 (2004).
  28. Mano, F., Sprehe, N., Olsen, T. W. Association of drusen phenotype in age-related macular degeneration from human eye-bank eyes to disease stage and cause of death. Ophthalmology Retina. 5 (8), 743-749 (2021).
  29. Age-related eye disease study research group. The Age-Related Eye Disease Study system for classifying age-related macular degeneration from stereoscopic color fundus photographs: The Age-Related Eye Disease Study Report Number 6. American Journal of Ophthalmology. 132 (5), 668-681 (2001).
  30. Arnold, J. J., Sarks, S. H., Killingsworth, M. C., Sarks, J. P. Reticular pseudodrusen. A risk factor in age-related maculopathy. Retina. 15 (3), 183-191 (1995).
  31. Olsen, T. W., Bottini, A. R., Mendoza, P., Grossniklausk, H. E. The age-related macular degeneration complex: linking epidemiology and histopathology using the Minnesota grading system (the inaugural Frederick C. Blodi Lecture). Transactions of the American Ophthalmological Society. 113, (2015).
  32. Owen, L. A., et al. The Utah protocol for postmortem eye phenotyping and molecular biochemical analysis. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 60 (4), 1204-1212 (2019).
  33. Wang, J. J., et al. Ten-year incidence and progression of age-related maculopathy: The Blue Mountains Eye Study. Ophthalmology. 114 (1), 92-98 (2007).
  34. Joachim, N., Mitchell, P., Burlutsky, G., Kifley, A., Wang, J. J. The incidence and progression of age-related macular degeneration over 15 years: The Blue Mountains Eye Study. Ophthalmology. 122 (12), 2482-2489 (2015).
  35. Pang, C., Messinger, J. D., Zanzottera, E. C., Freund, K. B., Curcio, C. A. The onion sign in neovascular age-related macular degeneration represents cholesterol crystals. Ophthalmology. 122 (11), 2316-2326 (2015).
  36. Keilhauer, C. N., Delori, F. C. Near-infrared autofluorescence imaging of the fundus: Visualization of ocular melanin. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 47 (8), 3556-3564 (2006).
  37. Curcio, C. A., Saunders, P. L., Younger, P. W., Malek, G. Peripapillary chorioretinal atrophy: Bruch’s membrane changes and photoreceptor loss. Ophthalmology. 107 (2), 334-343 (2000).
  38. Curcio, C. A. Imaging maculopathy in the post-mortem human retina. Vision Research. 45 (28), 3496-3503 (2005).
  39. Brinkmann, M., et al. Histology and clinical lifecycle of acquired vitelliform lesion, a pathway to advanced age-related macular degeneration. American Journal of Ophthalmology. 240, 99-114 (2022).
  40. Ramtohul, P., et al. Bacillary layer detachment: Multimodal imaging and histologic evidence of a novel optical coherence tomography terminology. Literature review and proposed theory. Retina. 41 (11), 2193-2207 (2021).
  41. Wilson, J. D., Foster, T. H. Mie theory interpretations of light scattering from intact cells. Optics Letters. 30 (18), 2442-2444 (2005).
  42. Ghazi, N. G., Green, W. R. Pathology and pathogenesis of retinal detachment. Eye. 16 (4), 411-421 (2002).
  43. Berlin, A., et al. Correlation of optical coherence tomography angiography of type 3 macular neovascularization with corresponding histology. JAMA Ophthalmology. 140 (6), 628-633 (2022).
  44. Berlin, A., et al. Histology of type 3 macular neovascularization and microvascular anomalies in anti-VEGF treated age-related macular degeneration. Ophthalmology Science. 3 (3), 100280 (2023).
  45. Schaal, K. B., et al. Outer retinal tubulation in advanced age-related macular degeneration: optical coherence tomographic findings correspond to histology. Retina. 35 (7), 1339-1350 (2015).
  46. Chen, L., et al. Histology and clinical imaging lifecycle of black pigment in fibrosis secondary to neovascular age-related macular degeneration. Experimental Eye Research. 214, 108882 (2022).
  47. Balaratnasingam, C., et al. Histologic and optical coherence tomographic correlations in drusenoid pigment epithelium detachment in age-related macular degeneration. Ophthalmology. 124 (1), 644-656 (2017).
  48. Curcio, C. A., et al. Subretinal drusenoid deposits in non-neovascular age-related macular degeneration: Morphology, prevalence, topography, and biogenesis model. Retina. 33 (2), 265-276 (2013).
  49. Owsley, C., et al. Biologically guided optimization of test target location for rod-mediated dark adaptation in age-related macular degeneration: ALSTAR2 baseline. Ophthalmology Science. 3 (2), 100274 (2023).
  50. Anderson, D. M. G., et al. The molecular landscape of the human retina and supporting tissues by high resolution imaging mass spectrometry. Journal of the American Society for Mass Spectrometry. 31 (12), 2426-2436 (2020).
  51. Lee, J., Yoo, M., Choi, J. Recent advances in spatially resolved transcriptomics: challenges and opportunities. BMB Reports. 55 (3), 113-124 (2022).
  52. Diabetes. Alabama Public Health Available from: https://www.alabamapublichealth.gov/healthrankings/diabetes.html (2022)
  53. Francis, J. H., et al. Swept-source optical coherence tomography features of choroidal nevi. American Journal of Ophthalmology. 159 (1), 169-176 (2015).
  54. Inoue, M., Dansingani, K. K., Freund, K. B. Progression of age-related macular degeneration overlying a large choroidal vessel. Retina Cases Brief Reports. 10 (1), 22-25 (2016).
  55. Jaffe, G. J., et al. Imaging features associated with progression to geographic atrophy in age-related macular degeneration: CAM Report 5. Ophthalmology Retina. 5 (9), 855-867 (2021).

Tags

Ex Vivo OCTMultimodal ImagingHuman Donor EyesAge-related Macular DegenerationAMDClinical ImagingOptical Coherence TomographyOCTNeurodegenerative DiseaseNeovascular ComplicationsSingle-cell RNA SequencingEye-tracked OCTCell And Animal ModelsPhotoreceptorsClinical OCT ImagingProgression SequencePrognostic ValueLaboratory FindingsDonor AgeDeath-to-preservation TimeColor Fundus Imaging
check_url/it/65240?article_type=t

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Citazione di questo articolo
Messinger, J. D., Brinkmann, M., Kimble, J. A., Berlin, A., Freund, K. B., Grossman, G. H., Ach, T., Curcio, C. A. Ex Vivo OCT-Based Multimodal Imaging of Human Donor Eyes for Research into Age-Related Macular Degeneration. J. Vis. Exp. (195), e65240, doi:10.3791/65240 (2023).
Scarica citazione
Ristampe e autorizzazioni

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image