हेडस्पेस गैस क्रोमैटोग्राफी-टेंडम क्वाड्रोपोल मास स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा पशु-व्युत्पन्न चिकित्सा में ट्राइमेथिलमाइन का पता लगाने के लिए एक बेहतर तकनीक
Summary
यहां, पशु-व्युत्पन्न दवाओं में ट्राइमेथिलमाइन (टीएमए) के निर्धारण के लिए उपयुक्त एक हेडस्पेस गैस क्रोमैटोग्राफी-टेंडम क्वाड्रोपोल मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एचएस-जीसी-एमएस / एमएस) विधि का वर्णन किया गया है। प्रोटोकॉल में नमूना प्रथागत, हेडस्पेस उपचार, विश्लेषण की स्थिति, पद्धतिगत सत्यापन और पशु-व्युत्पन्न दवाओं में टीएमए का निर्धारण शामिल है।
Abstract
पशु-व्युत्पन्न दवाओं में विशिष्ट विशेषताएं और महत्वपूर्ण उपचारात्मक प्रभाव होते हैं, लेकिन उनमें से अधिकांश में एक स्पष्ट मछली की गंध होती है, जिसके परिणामस्वरूप नैदानिक रोगियों का खराब अनुपालन होता है। ट्राइमेथिलमाइन (टीएमए) पशु-व्युत्पन्न चिकित्सा में प्रमुख मछली गंध घटकों में से एक है। लाइ के जुड़ने के बाद तेजी से एसिड-बेस प्रतिक्रिया के कारण हेडस्पेस शीशी में बढ़े दबाव के कारण मौजूदा पहचान विधि का उपयोग करके टीएमए को सटीक रूप से पहचानना मुश्किल है, जिसके कारण टीएमए हेडस्पेस शीशी से बच जाता है, जिससे पशु-व्युत्पन्न दवा की मछली की गंध की अनुसंधान प्रगति रुक जाती है। इस अध्ययन में, हमने एक नियंत्रित पहचान विधि का प्रस्ताव दिया जिसने एसिड और लाइ के बीच एक अलगाव परत के रूप में एक पैराफिन परत पेश की। थर्मोस्टैटिक भट्ठी हीटिंग के माध्यम से पैराफिन परत को धीरे-धीरे तरलीकृत करके टीएमए उत्पादन की दर को प्रभावी ढंग से नियंत्रित किया जा सकता है। इस विधि ने संतोषजनक रैखिकता, सटीक प्रयोग, और अच्छी प्रजनन क्षमता और उच्च संवेदनशीलता के साथ वसूली दिखाई। इसने पशु-व्युत्पन्न दवा के डिओडोराइजेशन के लिए तकनीकी सहायता प्रदान की।
Introduction
जानवरों के अंगों और / या उनके उप-उत्पादों (यहां पशु-व्युत्पन्न दवाओं के रूप में संदर्भित) से प्राप्त उत्पादों का उपयोग करके मानव रोगों का इलाज करना अधिक ध्यान आकर्षित कर रहा है। वे कैंसर, हृदय रोग, यकृत सिरोसिस, मास्टिटिस और अन्य बीमारियों के इलाज में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं, एक मजबूत प्रभाव, छोटी खुराक और महत्वपूर्ण और विशिष्ट नैदानिक प्रभावकारिता के फायदे के साथ। हालांकि, पशु-व्युत्पन्न दवाओं में आम तौर पर एक प्रमुख मछली की गंध होती है, जो रोगियों के अनुपालन को बहुत प्रभावित करती है, और विशेष रूपसे बच्चों के लिए प्रतिकूल होती है। मछली की गंध मुख्य रूप से दवा में निहित प्रोटीन, अमीनो एसिड, वसा और अन्य पदार्थों से आती है, जो फैटी एसिड ऑक्सीकरण, अमीनो एसिड क्षरण और मछली की गंध के साथ विभिन्न प्रकार के पदार्थों का उत्पादन करने के अन्य तरीकोंके माध्यम से विघटित होती है। उनमें से, ट्राइमेथिलैमाइन (टीएमए) एक मछली की गंध के साथ एक वाष्पशील गैस है जो सड़ने या सड़े हुए पशु-व्युत्पन्नखाद्य पदार्थों में व्यापक रूप से मौजूद है।
अब तक, गैस क्रोमैटोग्राफी (जीसी), तरल क्रोमैटोग्राफी (एलसी), आयन क्रोमैटोग्राफी, स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री, तरल क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एलसी-एमएस), और सेंसर विधियों का उपयोग आमतौर पर पर्यावरण, भोजन और मूत्र 6,7,8,9 में टीएमए का पता लगाने के लिए किया जाता है। जीसी कॉलम और इंजेक्शन सिस्टम के कम संदूषण के साथ-साथ उच्च संवेदनशीलता, प्रजनन क्षमता और कम पहचान सीमा (0.1-1 मिलीग्राम / किग्रा) को देखते हुए, भोजन औरजैविक विश्लेषण के लिए हेडस्पेस गैस क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एचएस-जीसी-एमएस) विधि को प्राथमिकता दी गई थी। वर्तमान में, केवल चीन ने भोजन में टीएमए के लिए एक राष्ट्रीय मानक स्थापित किया है, और एचएस-जीसी-एमएस जीबी 5009.179-2016 मानक10 में पहली विधि है। इसलिए, पशु-व्युत्पन्न चिकित्सा में टीएमए का पता लगाने के लिए उपरोक्त एचएस-जीसी-एमएस विधि का चयन किया गया था। प्रारंभिक चरण में, हमारे शोध समूह ने पाया कि भोजन में टीएमए के लिए एचएस-जीसी-एमएस पहचान मानक कई पशु-व्युत्पन्न दवाओं में मछली की गंध का पता लगा सकता है। अध्ययन 11,12 के परिणामों के साथ संयुक्त, यह साबित किया जा सकता है कि टीएमए पशु-व्युत्पन्न दवाओं में मछली की गंध का सामान्य प्रमुख पदार्थ है। हालांकि, यह पाया गया कि प्रयोगात्मक परिणामों की प्रजनन क्षमता खराब थी, और टीएमए पलायन और खराब स्थिरता जैसी समस्याएं थीं, जिन्हें कार्यप्रणाली द्वारा सत्यापित नहीं किया जा सकता था। यह इस तथ्य के कारण हो सकता है कि लाइ को हेडस्पेस शीशी में इंजेक्ट किया गया था और तेजी से एसिड-बेस प्रतिक्रिया के कारण शीशी में दबाव बढ़ गया, इस प्रकार टीएमए इंजेक्शन छिद्र से बच गया, जिससे टीएमए की स्थिर और सटीक पहचान नहीं हो सकी। इसलिए, इस अध्ययन ने इन समस्याओं को हल करने के लिए एक बेहतर हेडस्पेस गैस क्रोमैटोग्राफी-टेंडम क्वाड्रोपोल मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एचएस-जीसी-एमएस / एमएस) पहचान विधि का प्रस्ताव दिया।
प्रोटोकॉल ठोस पैराफिन, एक अच्छी ठोस-तरल चरण परिवर्तन सामग्री की मदद से प्रथागत में एसिड-बेस अभिकारकों को अलग करके नमूना प्रथागत में सुधार करता है। चूंकि पैराफिन धीरे-धीरे थर्मोस्टेटिक भट्ठी के तापमान में वृद्धि के साथ तरलीकृत हो गया, टीएमए को धीरे-धीरे सील हेडस्पेस शीशी में भी जारी किया गया, जिससे हिंसक और तेजी से एसिड-बेस प्रतिक्रिया के कारण दबाव में वृद्धि से बचा जा सके और स्थिर और सटीक टीएमए का पता लगाया जा सके। इसके अलावा, जीसी-एमएस /एमएस में मल्टीपल रिएक्शन मॉनिटरिंग (एमआरएम) मोड के साथ संयुक्त हेडस्पेस इंजेक्शन ने मैट्रिक्स रासायनिक हस्तक्षेप को प्रभावी ढंग से दबा दिया और परिणामों की विश्वसनीयता सुनिश्चित की। पद्धतिगत सत्यापन के परिणामों ने साबित कर दिया कि बेहतर पहचान विधि की रैखिकता, सटीक परीक्षण और वसूली दर अच्छी प्रजनन क्षमता और उच्च संवेदनशीलता के साथ आवश्यकताओं को पूरा कर सकती है।
Protocol
Representative Results
Discussion
पशु-व्युत्पन्न दवाएं पूरे शरीर, अंगों या ऊतकों, शारीरिक या रोग संबंधी उत्पादों, उत्सर्जन या स्राव, और जानवरों के संसाधित उत्पादों से आती हैं। टीएमए पशु-व्युत्पन्न दवाओं में मछली की गंध का एक महत्वपूर्?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह काम चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (82173991), और सिचुआन विज्ञान और प्रौद्योगिकी कार्यक्रम (2022वाईएफएस0442) से अनुदान द्वारा समर्थित था।
Materials
| Centrifuge | Beckman Coulter Trading (China) Co. | SSC-2-0213 | |
| Chinese herbal medicine grinder | Zhejiang Yongkang Xi'an Hardware and Pharmaceutical Factory | HX-200K | |
| Convection oven | Sanyo Electric Co., Ltd | MOV-112F | |
| Decapper for 20 mm Aluminum caps | ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc | V1750004 | |
| Electronic balance | Shimadzu Corporation Japan | AUW220D | |
| Gas chromatography mass spectrometry | Shimadzu Corporation Japan | TQ-8050 NX | |
| Headspace Vial | ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc | 25760200 | |
| Homogenizer | Shanghai biaomo Factory | FJ200-SH | |
| Preassembled Cap | ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc | L4150050 | |
| Sample sieve | Zhenxing Sieve Factory | / | |
| SH-Volatile Amine | Chengdu Meimelte Technology Co., Ltd | 227-3626-01 | |
| Sodium hydroxide | Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd | 2022101401 | |
| Solid paraffin wax | Shanghai Hualing Kangfu apparatus factory | 20221112 | |
| Trichloroacetic acid | Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd | 2022102001 | |
| Trimethylamine hydrochloride | Chengdu Aifa Biotechnology Co., Ltd | AF22022108 | |
| Ultra-pure water system | Sichuan Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd | UPR-11-5T |
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