Efeito Analgésico de Tuina em Modelos de Rato com Compressão da Dor do Gânglio da Raiz Dorsal

Summary

Este artigo apresenta uma manipulação para o tratamento da compressão crônica do gânglio da raiz dorsal em ratos utilizando a terapia com Tuina, juntamente com um método para avaliar sua eficácia baseado no comportamento da dor e nos resultados histopatológicos.

Abstract

A dor neuropática é uma condição prevalente que afeta de 6,9% a 10% da população e resulta de lesão nervosa devido a várias etiologias, como hérnia de disco lombar, estenose do canal vertebral e estenose do forame intervertebral. Embora Tuina, uma terapia manual tradicional chinesa, tenha mostrado efeitos analgésicos na prática clínica para o tratamento da dor neuropática, seus mecanismos neurobiológicos subjacentes permanecem obscuros. Modelos animais são essenciais para elucidar os princípios básicos de Tuina. Neste estudo, propomos um protocolo de Tuina padronizado para ratos com compressão do gânglio da raiz dorsal (DRG), que envolve induzir a compressão DRG através da inserção de uma haste de aço inoxidável no forame intervertebral, realizar a manipulação de Tuina com parâmetros específicos de localização, intensidade e frequência em um ambiente controlado, e avaliar os resultados comportamentais e histopatológicos do tratamento com Tuina. Este artigo também discute as potenciais implicações clínicas e limitações do estudo e sugere direções para futuras pesquisas sobre Tuina.

Introduction

Em situações clínicas, é comum observar dor patológica neurológica causada pela compressão da raiz nervosa devido a vários motivos. A forma mais típica dessa dor neuropática é a hérnia discal lombar (DHL), que muitas vezes é persistente, recorrente e de difícil cura. Aproximadamente 9% da população mundial é afetada pela LDH, levando a encargos sociais e econômicos significativos¹. A incidência desse tipo de dor neuropática vem aumentando a cada ano, com tendência a pacientes mais jovens, devido às mudanças na produção humana e no estilo de vida². Apesar do uso de analgésicos não esteroides, os sintomas dos pacientes não podem ser completamente aliviados. Como resultado, terapias alternativas, como Tuina, para o tratamento da dor causada pela LDH têm ganhado cada vez mais atenção.

A terapia com Tuina, uma forma de tratamento conservador da LDH, é amplamente recomendada em várias diretrizes de prática clínica em todo o mundo para prevenir e tratar a dor lombar ^3,4. Pesquisas mostraram que Tuina pode reduzir significativamente fatores inflamatórios, como níveis séricos de IL-6 e fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) em pacientes com LDH, melhorando a dor e o comprometimento da função lombar⁵. No entanto, o mecanismo específico por trás dos efeitos de alívio da dor da terapia Tuina permanece obscuro.

Modelos animais são uma ferramenta valiosa para o estudo da dor neuropática causada pela LDH⁶. Eles permitem medidas comportamentais para avaliar a eficácia da terapia com Tuina e fornecem amostras da fisiologia patológica da LDH. Por exemplo, amostras dos gânglios da raiz dorsal na coxa podem ser colhidas para verificar alterações nas células ganglionares da raiz dorsal. A compressão crônica do modelo do gânglio da raiz dorsal (CCD) é comumente utilizada para avaliar a fisiologia patológica da LDH, pois causa danos à morfologia das células ganglionares da raiz dorsal que são consistentes com as alterações patológicas observadas em casos clínicos de compressão nervosa causada por hérnia de^disco7.

Muitos estudiosos têm realizado diversos experimentos em animais sobre analgesia por acupressão 8,9,10. No entanto, ao implementar operações de acupressão em modelos animais, eles muitas vezes imitam a acupressão humana. O efeito terapêutico da acupressão é afetado por fatores como tamanho, frequência e direção da força aplicada^11,12,13. Se o experimento não tiver um padrão unificado de acupressão, como força, frequência e duração da operação, isso pode causar algum desvio nos resultados experimentais. Este artigo apresenta um conjunto de planos de tratamento com acupressão baseados nas características de ratos CCD e promove o desenvolvimento de operações padronizadas de acupressão em modelos animais.

Protocol

Este trabalho foi realizado no Laboratório de Dor do Instituto de Neurobiologia da Universidade de Fudan. Os experimentos foram aprovados e seguiram rigorosamente as diretrizes de proteção de animais de laboratório estabelecidas pela Associação Internacional para o Estudo da Dor (LASP) para todos os procedimentos cirúrgicos e manuseio dos animais. Foram utilizados ratos Sprague-Dawley (SD) grau limpo, constituídos por 32 machos entre 40-50 dias de idade, com peso médio de 220 ± 1,38 g. Estes ratos foram obtidos…

Representative Results

A terapia com Tuina pode ajudar a diminuir os limiares de estimulação mecânica e térmica de ratos causados pela modelagem de CCDApós 17 dias de terapia com Tuina, foi observada uma diferença significativa nos limiares de PWT entre os ratos CCD que receberam terapia com Tuina e o grupo CCD não tratado (P = 0,021, <0,05) (Figura 6 e Tabela 1). Os ratos do grupo CCD que receberam terapia com Tuina apresentaram mel…

Discussion

Nosso grupo de pesquisa tem realizado estudos relevantes sobre os parâmetros de manipulação de Tuina em estágio inicial. Primeiro, é importante definir a intensidade da força para a manipulação de Tuina. Na clínica Tuina, os profissionais ajustam a intensidade da força de acordo com sua experiência e os sentimentos subjetivos dos pacientes, alcançando o melhor efeito Tuina através da comunicação. No entanto, isso não é viável em experimentos com animais. Em experimentos com animais, um “limiar de respos…

Materials

"L" stainless steel rod (4 mm long and 0.4 mm in diameter)	hand-made	/	For CCD models making
ALMEMO admeasuring apparatus	ahlborn	2450-1	Mechanical Withdrawal Threshold test
Constant temperature slicer CM-1900	Leica	1491950C1US	For specimen production
Disinfectant (iodine) 100 mL/bottle	LIRCON/Shandong Lilkang	/	For disinfection
Disposable sterile syringe 5 mL	Shanghai Misha Wa Medical Industry	/	For injection
Electron microscope CX-31	Olympus, Japan	BJ002318	For specimen observation
Finger pressure recordings	Suzhou Changxian Optoelectronic Technology	CX1003w	For Tuina manipulation
Foam board (35 cm x 20 cm)	hand-made	/	It is our homemade apparatus for fixing rats
MERSILK W2512	Johnson & Johnson	/	For tissue suture
Neutral balsam	Sinopharm Chemical Reagent	10004160	For specimen production
paraformaldehyde	China National Chemical Reagent	/	For specimen production
Pentobarbital sodium	Sigma-Aldrich	P3761	For anesthesia of rat
Plantar Test Apparatus (Hargreaves Method) for Mice and Rats	IITC Life Science	/	Paw Withdrawal Latency
Precision electronic scale for experiment JY3002	Shanghai Precision Scientific Instrument	/	Weighing of rat
Rat hair clipper	Philips	HP6341/00	Shaving of rat fur
Restrainer for rats	Tongji University (self-made)	/	It is a homemade apparatus made by Tongji University, which can effectively immobilize the rats and fully expose their hind limbs.
Tissue-Tek O.C.T. Compound	SAKURA	4583	For specimen production
Uratan	China National Chemical Reagent	/	For anesthesia of rat
X-ray detector XR-600	Dongguan Kaso Electronic Technology	/	Examination of CCD models
xylene	Shanghai Sinopharm Group	100092	For specimen production