Verbesserte Fixierung der Aufhängung mit Rattenjacke in Rattenakupunkturexperimenten

Summary

Hier stellen wir eine verbesserte Suspensionsfixierungsmethode vor, bei der ein Rattenmantel verwendet wird, um Ratten während Akupunkturexperimenten effektiv zu immobilisieren. Des Weiteren wird der Aufbau und die Anwendung dieses Fixationsapparates sowie Anweisungen und Auswertungen für den Einsatz in der Elektroakupunkturtherapie erläutert.

Abstract

In der experimentellen Grundlagenforschung werden Ratten häufig als Versuchstiere verwendet. Allerdings fällt es ihnen schwer, eine feste Haltung einzunehmen. Bei Elektroakupunkturverfahren ist die richtige Immobilisierung von Ratten unerlässlich. Derzeit werden verschiedene Methoden der Rattenfixierung verwendet, darunter die Anästhesiefixierung, die Hochplattformfixierung, die Bindungsfixierung und die Fixierung mit einem selbstgemachten Rattenmantel. Diese Methoden haben jedoch ihre Grenzen, die die Effizienz und Funktionsfähigkeit des Experiments bis zu einem gewissen Grad beeinträchtigen können. Dieses Protokoll führt eine Methode zum Aufhängen und Fixieren von Ratten mit Rattenkleidung ein. Erstens werden Ratten mit Rattenjacken bekleidet, die zu ihrer Körperform passen, und machen sich ihre Vorliebe für Dunkelheit und Wühlen zunutze. Die Vernadelung kann dann durchgeführt werden, nachdem die Ratten Rattenkleidung getragen haben. In der Schwebe sind die Ratten relativ ruhig, da sich ihre Gliedmaßen nicht bewegen können. Diese Fixierungsmethode bietet nicht nur wirtschaftliche und benutzerfreundliche Vorteile, sondern sorgt auch für eine stabile und zuverlässige Fixierung der Ratten in einer angenehm entspannten Position. Es minimiert auch effektiv den Zeitaufwand, den Experimentierraum und die Personalressourcen. Darüber hinaus ermöglicht diese Methode die Exposition der meisten Akupunkturpunkte, die für die Akupunktur bei Ratten verwendet werden. Dieser Artikel konzentriert sich in erster Linie auf die Zusammensetzung des Geräts, das einen speziell entwickelten Rattenmantel, ein erhöhtes Befestigungsgestell und deren Verbindungsstrukturen umfasst. Darüber hinaus wird ein anschauliches Beispiel vorgestellt, um die Anwendung der auf Rattenkleidung basierenden Suspensionsfixationsmethode bei Elektroakupunkturverfahren bei Ratten zu demonstrieren.

Introduction

Akupunktur ist eine traditionelle Therapie, die durch Nadeln an bestimmten Akupunkturpunkten oder anderen Positionen zur Vorbeugung und Behandlung von Krankheiten gekennzeichnet ist. Die Elektroakupunktur kombiniert filiforme Nadeln mit elektrischer Stimulation¹, was eine präzise Kontrolle über die Menge der Stimulation durch Anpassung relevanter Parameter ermöglicht und die Standardisierung der Akupunkturbehandlung² fördert. In den letzten Jahren hat sich die Forschung zu den Mechanismen der Elektroakupunktur weiter ausgebaut und vertieft^3,4, was zu einer jährlichen Zunahme von Studien geführt hat^, die sich auf die Mechanismen der Elektroakupunktur konzentrieren⁵.

In der Grundlagenforschung zur Elektroakupunktur sind Ratten die am häufigsten verwendeten Tiere. Während der Elektroakupunkturbehandlung muss der Empfänger ruhig bleiben, um einen reibungslosen Ablauf zu gewährleisten. Anders als in klinischen Studien mit menschlichen Probanden können Kleintiere, die im Tierversuch verwendet werden, während 15-30 Minuten langwieriger Elektroakupunkturverfahren den Befehlen nicht bewusst folgen. Dies stellt die Forscher vor die größte Herausforderung, eine stabile und zuverlässige Fixierung zu erreichen. Eine falsche Fixierung kann bei Tieren zu negativen Emotionen wie Angstzuständen, Depressionen und Ängsten führen⁶, was nicht nur das Verletzungsrisiko für Ratten und die Wahrscheinlichkeit, gebissen zu werden, für das Versuchspersonal erhöht, sondern auch die Stabilität und Überzeugungskraft der Forschungsergebnisse beeinträchtigt.

In früheren Studien haben Forscher vor Akupunktur- oder Elektroakupunkturoperationen häufig die Anästhesiefixierung⁷, die Hochplattformfixierung⁸, die Bindungsfixierung ^6,9 oder die Rattenfellfixierung¹⁰ verwendet. Angesichts der Auswirkungen der Anästhesie auf den Körper¹¹ und die Gehirnfunktion¹² und in Anbetracht der Tatsache, dass die Akupunktur in klinischen Fällen bei bewussten Patienten durchgeführt wird, kann die Anästhesie die Forschungsergebnisse jedoch bis zu einem gewissen Grad beeinflussen. Daher ist die komfortable Fixierung von Ratten im Wachzustand im Vergleich zur Anästhesiefixierung eine bessere Option.

Im nicht-anästhesierten Zustand besitzen jedoch auch verschiedene Fixationsmethoden ihre jeweiligen Grenzen, einschließlich einer eingeschränkten Akupunkturexposition aufgrund der Abdeckung des Rattenfells bei Ratten¹⁰, der Notwendigkeit von mindestens zwei Individuen zur Durchführung der Operation¹³, einer nicht einstellbaren Fixateurgröße¹⁴ oder des gestressten Zustands von Ratten in einer erzwungenen Position⁶. Um diese technischen Probleme zu lösen, haben wir einen Rattenmantel und ein Fixierungsgestell entwickelt, das für die Akupunkturmanipulation in den meisten Teilen des Rattenkörpers geeignet ist. Dies kann Forschern helfen, Akupunkturverfahren mit Ratten effizient durchzuführen.

Die Logik für dieses Protokoll ist folgende: Erstens nutzt die geschlossene Kopfbedeckung an der Jacke der Ratte die natürliche Neigung der Ratten zu Dunkelheit und Wühlen und schränkt so ihren Aktivitätsradius ein. Zweitens sorgen die Bindungsseile in der Nähe der Gelenke der Gliedmaßen der Ratten für eine physische Kompressionsfesselung und schränken ihre Bewegungen ein. Ratten sind jedoch auch dann noch in der Lage, zu springen und sich horizontal zu bewegen, wenn sie die Jacke tragen. Da Ratten den Boden nicht ohne einen festen Kraftpunkt berühren können, wenn sie aufgehängt sind, haben wir den Rattenmantel mit einer Aufhängungsvorrichtung versehen, die ihre Bewegungen weiter einschränkt und den Halt der Nadel gewährleistet. Die Zusammensetzung der Fixiervorrichtung ist in Abbildung 1 dargestellt.

Abbildung 1: Schematische Darstellung des Rattenmantels und der Aufhängungsfixierung. (A) Das allgemeine Erscheinungsbild der Rattenjacke in einer flachen Ansicht. (B) Dreidimensionale Ansicht des Rattenmantels. (C) Speziell zugeschnittene Rattenjacke mit einem Einschnitt in der Nähe der Akupunkturpunkte an Kopf und hinterer Taille. (D) Illustration mehrerer Ratten, die gleichzeitig auf dem erhöhten Gestell aufgehängt sind. 1: Gesamtansicht des Stoffes; 2: Ausgang der Vordergliedmaßen; 3: Auslass der hinteren Gliedmaßen; 4: Seil binden; 5: Hohlraum, der sich nach dem Nähen gebildet hat; 6: Inzision zur Freilegung von Kopfakupunkturpunkten; 7: Inzision zur Freilegung von Rücken- und Taillenakupunkturpunkten. 8: Position der Naht. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.

Protocol

Alle Verfahren, die in dieser Studie an den Ratten durchgeführt wurden, entsprachen dem National Standard for Laboratory Animal Welfare and Ethics Review Guidelines (2018), der offiziell von der Volksrepublik China verabschiedet wurde, und dem Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren von National Academies Press15. Dieses Protokoll besteht aus drei Hauptschritten. Zum einen werden die Rattenjacken auf die individuellen Körperformen von Ratten mit unterschiedlichem Gewicht zugesch…

Representative Results

In diesem Experiment wurden insgesamt 12 Ratten für die Elektroakupunkturbehandlung ausgewählt und ihre Reaktionen unter der Fixierungsmethode beobachtet (wie in Tabelle 2 gezeigt). Von den 12 Ratten zeigte nur 1 Ratte während der 15-minütigen Retentionszeit der Elektroakupunkturnadel einen intensiven Kampf. Infolge ihrer kräftigen Bewegungen löste sich die Nadel auf halbem Weg, was 8,33 % der Gesamtzahl der Ratten ausmachte. Dieses Ergebnis deutet darauf hin, dass die verwendete Fixationsmethode i…

Discussion

Es hat sich gezeigt, dass Elektroakupunktur gute therapeutische Wirkungen bei verschiedenen Krankheiten wie kognitiven Beeinträchtigungen 16,17^, Herzmuskelverletzungen¹⁸ und entzündlichen Schmerzen¹⁹ hat. Um den Wirkmechanismus zu verstehen, wurden Tierversuche vor allem mit Ratten durchgeführt. Die Fixierung der Tiere während der Eingriffe ist entscheidend für genaue Ergebnisse. Während in vielen Studien Elek…

Materials

75% alcohol	Shandong Lircon medical technology co., ltd	2002-0059	Disinfection
acupuncture needles	Beijing Luo ya shan chuan medical equipment co., Ltd.		needling
Adult Sprague-Dawley (SD) rats	Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd.	SCXK 2020-0001	The recipient  subjected to fixation
an elevated fixation rack	Taizhou shiai instruments and equipments for scientific and teaching research  Co., ltd	/	Fix rats
Hans electronic acupuncture apparatus	Beijing Huayun Ante Science and Technology Co. Ltd.	HANS-200A	electroacupuncture
Medical cotton ball	Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd.	20172142357	Disinfection
Pet electric clipper	Fenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance Factory	/	Shave the hair of rats
Tweezers	Qingdao Schultz Biotechnology Co., ltd		Pinch cotton balls