Forbedret fjæringsfiksering ved hjelp av rottejakke i rotteakupunktureksperimenter

Summary

Her presenterer vi en forbedret suspensjonsfikseringsmetode ved hjelp av en rottejakke for effektivt å immobilisere rotter under akupunktureksperimenter. Videre belyses strukturen og anvendelsen av dette fikseringsapparatet, samt instruksjoner og evaluering for bruk i elektroakupunkturbehandling.

Abstract

I grunnleggende eksperimentell akupunkturforskning brukes rotter ofte som laboratoriedyr. Det er imidlertid vanskelig for dem å opprettholde en fast holdning. Under elektroakupunkturprosedyrer er riktig immobilisering av rotter viktig. Ulike metoder for rottefiksering brukes for tiden, inkludert anestesifiksering, fiksering av høy plattform, bindingsfiksering og fiksering med et selvfremstillet rottebelegg. Disse metodene har imidlertid sine begrensninger, noe som til en viss grad kan påvirke eksperimentets effektivitet og brukbarhet. Denne protokollen introduserer en metode for å suspendere og fikse rotter ved hjelp av rotteklær. For det første er rotter kledd med rottejakker som matcher kroppsfasongen, og utnytter deres preferanse for mørke og graving. Nåleoperasjonen kan deretter utføres etter at rottene har brukt rotteklær. Når de er suspendert, er rottene relativt stille, da deres lemmer ikke kan bevege seg. Denne fikseringsmetoden gir ikke bare økonomiske og brukervennlige fordeler, men sikrer også en stabil og pålitelig fiksering av rottene i en komfortabelt avslappet stilling. Det minimerer også effektivt tidsforbruk, eksperimentell plass og arbeidskraftressurser. I tillegg tillater denne metoden eksponering av de fleste akupunkturer som brukes til akupunktur hos rotter. Denne artikkelen konsentrerer seg primært om enhetens sammensetning, som omfatter en spesialdesignet rottejakke, et forhøyet fikseringsstativ og deres tilkoblingsstrukturer. I tillegg vil et illustrerende eksempel bli presentert for å demonstrere anvendelsen av rotteklærbasert suspensjonsfikseringsmetode i rotteelektroakupunkturprosedyrer.

Introduction

Akupunktur er en tradisjonell terapi preget av nåling på bestemte akupunkter eller andre stillinger for å forebygge og behandle sykdommer. Elektroakupunktur kombinerer filiforme nåler med elektrisk stimulering¹, noe som muliggjør presis kontroll over mengden stimulering ved å justere relevante parametere, fremme standardisering av akupunkturbehandling². I de senere år har forskning på mekanismene for elektroakupunktur fortsatt å utvide og utdype^3,4, noe som har ført til en årlig økning i studier som fokuserer på mekanismene for elektroakupunktur⁵.

I grunnforskning på elektroakupunktur er rotter de mest brukte dyrene. Under elektroakupunkturbehandling må mottakeren forbli stille for å sikre en jevn prosedyre. I motsetning til i kliniske forsøk med mennesker, kan små dyr som brukes i dyreforsøk ikke følge kommandoer bevisst under 15-30 min lange elektroakupunkturprosedyrer. Dette gir forskere en primær utfordring med å oppnå stabil og pålitelig fiksering. Feil fiksering kan føre til negative følelser som angst, depresjon og frykt hos dyr⁶, noe som ikke bare øker risikoen for skade for rotter og sjansen for å bli bitt for eksperimentelt personell, men også påvirker stabiliteten og overtalelsesevnen til forskningsresultater.

I tidligere studier har forskere ofte brukt anestesifiksering⁷, høy plattformfiksering⁸, bindingsfiksering ^6,9 eller rottebeleggfiksering¹⁰ før akupunktur eller elektroakupunkturoperasjoner. Men gitt effekten av anestesi på kroppen¹¹ og hjernefunksjon¹², og med tanke på at akupunktur utføres på bevisste pasienter i kliniske tilfeller, kan anestesi til en viss grad påvirke forskningsresultatene. Derfor, sammenlignet med anestesifiksering, er komfortabel fiksering av rotter i våken tilstand et bedre alternativ.

I ikke-bedøvet tilstand har imidlertid forskjellige fikseringsmetoder også sine respektive begrensninger, inkludert begrenset akupunkteksponering på grunn av dekning av rottebelegget på rotter 10, nødvendigheten av minst to personer til å utføre operasjonen¹³, ikke-justerbar fikseringsstørrelse¹⁴ eller den stressede tilstanden til rotter i en tvungen stilling⁶. For å løse disse tekniske problemene designet vi en rottejakke og et festestativ som er egnet for akupunkturmanipulering i de fleste deler av rottekroppen. Dette kan hjelpe forskere effektivt å utføre akupunkturprosedyrer med rotter.

Begrunnelsen for denne protokollen er som følger: For det første utnytter det lukkede hodeplagget på rottejakken rottenes naturlige tilbøyelighet til mørke og graving, og begrenser dermed deres aktivitetsområde. For det andre gir bindingstauene nær leddene i rotternes lemmer fysisk kompresjonsbegrensning, og pålegger visse begrensninger på bevegelsene deres. Imidlertid er rotter fortsatt i stand til å hoppe og bevege seg horisontalt selv mens de har på seg jakken. Til slutt, siden rotter ikke kan berøre bakken uten et fast kraftpunkt når de er suspendert, la vi til en opphengsfikseringsenhet til rottejakken, noe som ytterligere begrenset bevegelsene deres og sikret nåleretensjon. Sammensetningen av fikseringsanordningen er vist i figur 1.

Figur 1: Skjematisk diagram over rottejakke og fjæringsfiksering. (A) Det generelle utseendet til rottejakken i flat visning. (B) Tredimensjonalt bilde av rottejakken. (C) Spesialtilpasset rottejakke med snitt nær akupunktene på hodet og baksiden. (D) Illustrasjon av flere rotter som henger samtidig på den forhøyede stativet. 1: Stoff samlet visning; 2: Forbenet utløp; 3: Bakre lem utløp; 4: Binde tau; 5: Hulrom dannet etter suturering; 6: Snitt for å eksponere hodet akupunkter; 7: Snitt for å eksponere rygg og midje akupunkter. 8: Suturposisjon. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Protocol

Alle prosedyrer utført på rotter i denne studien fulgte National Standard for Laboratory Animal Welfare and Ethics Review Guidelines (2018) offisielt vedtatt av Folkerepublikken Kina og Veiledning for omsorg og bruk av forsøksdyr fra National Academies Press15. Denne protokollen består av tre hovedtrinn. For det første skreddersys og monteres rottejakkene basert på de individuelle kroppsformene til rotter med ulik vekt. Deretter utføres akupunkturmanipulasjon etter standardprosedyrer. Til s…

Representative Results

I dette forsøket ble totalt 12 rotter valgt for elektroakupunkturbehandling, og deres reaksjoner under fikseringsmetoden ble observert (som vist i tabell 2). Blant de 12 rottene viste bare 1 rotte intens kamp i løpet av 15 min elektroakupunkturnålretensjonsperioden. Som et resultat av sine kraftige bevegelser kom nålen av midtveis, og utgjorde 8,33% av det totale antall rotter. Dette resultatet antyder at fikseringsmetoden som brukes generelt demonstrerer en betydelig grad av stabilitet og pålitelig…

Discussion

Elektroakupunktur har vist seg å ha god terapeutisk effekt på ulike sykdommer som kognitiv svikt 16,17^, myokardskade¹⁸ og betennelsessmerter¹⁹. For å forstå virkningsmekanismen er det utført dyreforsøk primært med rotter. Fiksering av dyrene under prosedyrene er avgjørende for nøyaktige resultater. Mens mange studier har administrert elektroakupunktur etter dyrebedøvelse, kan denne praksisen hindre hjernen…

Materials

75% alcohol	Shandong Lircon medical technology co., ltd	2002-0059	Disinfection
acupuncture needles	Beijing Luo ya shan chuan medical equipment co., Ltd.		needling
Adult Sprague-Dawley (SD) rats	Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd.	SCXK 2020-0001	The recipient  subjected to fixation
an elevated fixation rack	Taizhou shiai instruments and equipments for scientific and teaching research  Co., ltd	/	Fix rats
Hans electronic acupuncture apparatus	Beijing Huayun Ante Science and Technology Co. Ltd.	HANS-200A	electroacupuncture
Medical cotton ball	Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd.	20172142357	Disinfection
Pet electric clipper	Fenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance Factory	/	Shave the hair of rats
Tweezers	Qingdao Schultz Biotechnology Co., ltd		Pinch cotton balls