Улучшенная фиксация подвески с помощью крысиной куртки в экспериментах с иглоукалыванием на крысах
Summary
Здесь мы представляем усовершенствованный метод фиксации суспензии с использованием крысиной куртки для эффективного обездвиживания крыс во время экспериментов с иглоукалыванием. Кроме того, выясняется структура и применение этого фиксирующего аппарата, а также инструкции и оценка его использования в электроакупунктурной терапии.
Abstract
В основных экспериментальных исследованиях иглоукалывания крысы обычно используются в качестве лабораторных животных. Однако им сложно сохранять фиксированную осанку. Во время процедур электроакупунктуры важное значение имеет правильная иммобилизация крыс. В настоящее время используются различные методы фиксации крыс, в том числе наркозная фиксация, высокоплатформенная фиксация, бинтовая фиксация и фиксация самодельной крысиной шубой. Однако эти методы имеют свои ограничения, которые могут в некоторой степени повлиять на эффективность и работоспособность эксперимента. Этот протокол вводит метод подвешивания и фиксации крыс с помощью крысиной одежды. Во-первых, крысы одеты в крысиные куртки, которые соответствуют форме их тела, пользуясь их предпочтением темноты и норы. Операцию по иглоукалыванию можно проводить после того, как крысы наденут крысиную одежду. В подвешенном состоянии крысы относительно неподвижны, так как их конечности не могут двигаться. Этот метод фиксации не только экономичен и удобен в использовании, но и обеспечивает стабильную и надежную фиксацию крыс в удобном расслабленном положении. Это также эффективно минимизирует затраты времени, экспериментального пространства и трудовых ресурсов. Кроме того, этот метод позволяет воздействовать на большинство акупунктурных точек, используемых для иглоукалывания у крыс. В этой статье основное внимание уделяется составу устройства, включающему в себя специально разработанную крысиную оболочку, приподнятую стойку фиксации и их соединительные конструкции. Кроме того, будет представлен наглядный пример, демонстрирующий применение метода фиксации суспензии на основе одежды крыс в процедурах электроакупунктуры у крыс.
Introduction
Иглоукалывание – это традиционная терапия, характеризующаяся уколами в определенных акупунктурных точках или других положениях для профилактики и лечения заболеваний. Электроакупунктура сочетает в себе нитевидные иглы с электростимуляцией1, что позволяет точно контролировать количество стимуляции путем регулировки соответствующих параметров, способствуя стандартизации лечения иглоукалыванием2. В последние годы исследования механизмов электроакупунктуры продолжали расширяться и углубляться3,4, что привело к ежегодному увеличению исследований, посвященных механизмам электроакупунктуры5.
В фундаментальных исследованиях по электроакупунктуре крысы являются наиболее часто используемыми животными. Во время лечения электроакупунктурой реципиент должен оставаться неподвижным, чтобы обеспечить плавную процедуру. В отличие от клинических испытаний на людях, мелкие животные, используемые в экспериментах на животных, не могут сознательно выполнять команды во время 15-30-минутных процедур электроакупунктуры. Это ставит перед исследователями первостепенную задачу достижения стабильной и надежной фиксации. Неправильная фиксация может привести к негативным эмоциям, таким как тревога, депрессия и страху животных, что не только увеличивает риск травм для крыс и вероятность укуса для экспериментального персонала, но и влияет на стабильность и убедительность результатов исследования.
В предыдущих исследованиях исследователи часто использовали анестезию7, высокую платформенную фиксацию8, связывающую фиксацию 6,9 или фиксацию крысиной шерсти10 перед операциями иглоукалывания или электроакупунктуры. Однако, учитывая воздействие анестезии на организм11 и функции мозга12, а также учитывая, что иглоукалывание проводится пациентам в сознании в клинических случаях, анестезия может в определенной степени повлиять на результаты исследований. Поэтому, по сравнению с наркозной фиксацией, комфортная фиксация крыс в бодрствующем состоянии является лучшим вариантом.
Однако в неанестезиологическом состоянии различные методы фиксации также имеют свои соответствующие ограничения, в том числе ограниченное воздействие на акупунктурные точки из-за покрытия крысиной шерсти крысами 10, необходимость по меньшей мере двух человек для выполнения операции13, нерегулируемый размер фиксатора14 или стрессовое состояние крыс в вынужденном положении6. Чтобы решить эти технические проблемы, мы разработали крысиную оболочку и фиксирующую стойку, подходящую для акупунктурных манипуляций в большинстве частей тела крысы. Это может помочь исследователям эффективно проводить процедуры иглоукалывания на крысах.
Обоснование этого протокола заключается в следующем: во-первых, закрытый головной убор на куртке крысы использует естественную склонность крыс к темноте и рытью нор, тем самым ограничивая диапазон их деятельности. Во-вторых, связывающие веревки возле суставов конечностей крыс обеспечивают физическое сдерживание сжатия, накладывая определенные ограничения на их движения. Тем не менее, крысы по-прежнему способны прыгать и перемещаться горизонтально, даже будучи одетыми в куртку. Наконец, поскольку крысы не могут касаться земли без фиксированной точки силы в подвешенном состоянии, мы добавили устройство фиксации подвески к куртке крысы, еще больше ограничивающее их движения и обеспечивающее удержание иглы. Состав фиксирующего устройства показан на рисунке 1.
Рисунок 1: Принципиальная схема крысиной оболочки и фиксации подвески. (А) Общий вид крысиной куртки в плоском виде. (Б) Трехмерный вид крысиной куртки. (C) Специально сшитая крысиная куртка с разрезом возле акупунктурных точек на голове и пояснице. (D) Иллюстрация нескольких крыс, одновременно подвешенных на приподнятой стойке. 1: Общий вид ткани; 2: Выходное отверстие передней конечности; 3: Выход задней конечности; 4: Веревка для обвязки; 5: Полость, образовавшаяся после наложения швов; 6: Разрез для обнажения акупунктурных точек головы; 7: Разрез для обнажения акупунктурных точек спины и поясницы. 8: Положение шва. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
Protocol
Representative Results
Discussion
Было показано, что электроакупунктура оказывает хорошее терапевтическое воздействие при различных заболеваниях, таких как когнитивные нарушения 16,17, повреждение миокарда18 и воспалительная боль19. Чтобы понять механизм его дей?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Авторы выражают благодарность научно-исследовательской рисунковой платформе Figdraw Дома для исследователей за предоставление материала, использованного для создания рисунка 2 в этой статье, с авторизованным идентификатором лицензии: URUUO5699e. Эта работа получила поддержку грантов, предоставленных Национальным фондом естественных наук Китая (81873380, 82074566), Фондом естественных наук провинции Хубэй (2022CFCO43) и Проектом строительства студии наследия национальной знаменитой традиционной китайской медицины Национального управления традиционной китайской медицины ([2022] No5, [2022] No75).
Materials
| 75% alcohol | Shandong Lircon medical technology co., ltd | 2002-0059 | Disinfection |
| acupuncture needles | Beijing Luo ya shan chuan medical equipment co., Ltd. | needling | |
| Adult Sprague-Dawley (SD) rats | Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd. | SCXK 2020-0001 | The recipient subjected to fixation |
| an elevated fixation rack | Taizhou shiai instruments and equipments for scientific and teaching research Co., ltd | / | Fix rats |
| Hans electronic acupuncture apparatus | Beijing Huayun Ante Science and Technology Co. Ltd. | HANS-200A | electroacupuncture |
| Medical cotton ball | Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd. | 20172142357 | Disinfection |
| Pet electric clipper | Fenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance Factory | / | Shave the hair of rats |
| Tweezers | Qingdao Schultz Biotechnology Co., ltd | Pinch cotton balls |
Riferimenti
- Liu, Z., et al. Effect of Electroacupuncture on Urinary Leakage Among Women With Stress Urinary Incontinence: A Randomized Clinical Trial. The Journal of the American Medical Association. 317 (24), 2493-2501 (2017).
- Tsuei, J. J. Recent developments in clinical acupuncture. The American Journal of Chinese Medicine. 11 (1-4), 150-158 (1983).
- Liu, S., et al. Somatotopic Organization and Intensity Dependence in Driving Distinct NPY-Expressing Sympathetic Pathways by Electroacupuncture. Neuron. 108 (3), 436-450 (2020).
- Liu, S., et al. A neuroanatomical basis for electroacupuncture to drive the vagal-adrenal axis. Nature. 598 (7882), 641-645 (2021).
- Li, X., Wei, W., Wang, Y., Wang, Q., Liu, Z. Global Trend in the Research and Development of Acupuncture Treatment on Parkinson’s Disease From 2000 to 2021: A Bibliometric Analysis. Frontiers In Neurology. 13, 906317 (2022).
- Jiang, S., et al. Application Progress of fixation methods for rodents under non anesthesia in acupuncture and moxibustion experiments domestically and abroad. Shanghai Journal of Acupuncture and Moxibustion. 40 (12), 1509-1514 (2021).
- Jiang, H. Z., et al. Fixation method in the study of acupuncture intervention on rats. Journal of Shanxi College of Traditional Chinese Medicine. 20 (3), 169-171 (2019).
- Wang, Y., Ning, Y., Wang, P. Y., Yang, Y. Q. Method of Placing a Rat on an Elevated Platform for Acupuncture. Shanghai Journal of Acupuncture and Moxibustion. 31 (5), 289-292 (2012).
- Wang, F., Xiong, J., Zeng, F., He, Z. X. A fixation frame for acupuncture and moxibustion of Shu-Mu acupoint combination in rats. Acupuncture Research. 47 (10), 938-940 (2022).
- Tu, S., P, C., Y, Y. H. Fixation method for needle warming moxibustion treatment on swinging rats bound with coat. Chinese Journal of Comparative Medicine. 31 (5), 128-132 (2021).
- Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. Influence of anesthetic agent, depth of anesthesia and body temperature on cardiovascular functional parameters in the rat. Laboratory Animals. 48 (1), 6-14 (2014).
- Kiyatkin, E. A., Brown, P. L. Brain and body temperature homeostasis during sodium pentobarbital anesthesia with and without body warming in rats. Physiology & Behavior. 84 (4), 563-570 (2005).
- He, C., Zhang, C., Zhou, S., Fan, Y. Using old meshy cage cover to make a rat fixating device for acupuncture study. Acupuncture Research. 46 (4), 348-350 (2021).
- Li, Y., Lin, N., Huang, Y., Xue, X., Liu, Q. A Newly-made Rat Holder for Convenient Acupuncture Needle Insertion. Acupuncture Research. 41 (5), 466-468 (2016).
- Bielitzki, J. T., Barbee, R. W., Garber, J. . Guide for the care and use of laboratory animals. 85 (3), 963-965 (2011).
- Zheng, X., et al. Electroacupuncture ameliorates beta-amyloid pathology and cognitive impairment in Alzheimer disease via a novel mechanism involving activation of TFEB (transcription factor EB). Autophagy. 17 (11), 3833-3847 (2021).
- Su, X., et al. Effectiveness and Safety of Acupuncture for Vascular Cognitive Impairment: A Systematic Review and Meta-Analysis. Frontiers In Aging Neuroscience. 13, 692508 (2021).
- Wang, Q., et al. Efficacy of electroacupuncture pretreatment for myocardial injury in patients undergoing percutaneous coronary intervention: A randomized clinical trial with a 2-year follow-up. International Journal of Cardiology. 194, 28-35 (2015).
- Zhang, R., Lao, L., Ren, K., Berman, B. M. Mechanisms of acupuncture-electroacupuncture on persistent pain. Anesthesiology. 120 (2), 482-503 (2014).
