Qui viene presentato un nuovo dispositivo automatizzato per la contusione da lesione del midollo spinale per topi, in grado di produrre con precisione modelli di contusione da lesione del midollo spinale con vari gradi.
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Articolo metodologico
Impattatore automatizzato per il modello di lesione del midollo spinale contusivo nei topi
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
La lesione del midollo spinale (SCI) dovuta a lesioni traumatiche come incidenti stradali e cadute è associata a una disfunzione permanente del midollo spinale. La creazione di modelli di contusione della lesione del midollo spinale impattando sul midollo spinale provoca patologie simili alla maggior parte delle lesioni del midollo spinale nella pratica clinica. Modelli animali accurati, riproducibili e convenienti di lesione del midollo spinale sono essenziali per lo studio della lesione del midollo spinale. Presentiamo un nuovo dispositivo automatizzato per la contusione delle lesioni del midollo spinale per topi, il sistema intelligente per lesioni del midollo spinale dell'Università di Guangzhou Jinan, in grado di produrre modelli di contusione per lesioni del midollo spinale con precisione, riproducibilità e praticità. Il sistema produce con precisione modelli di vari gradi di lesione del midollo spinale tramite sensori di distanza laser combinati con una piattaforma mobile automatizzata e un software avanzato. Abbiamo utilizzato questo sistema per creare tre livelli di modelli di topi con lesione del midollo spinale, abbiamo determinato i loro punteggi della scala di topo Basso (BMS) e abbiamo eseguito saggi comportamentali e di colorazione per dimostrarne l'accuratezza e la riproducibilità. Mostriamo ogni fase dello sviluppo dei modelli di lesione utilizzando questo dispositivo, formando una procedura standardizzata. Questo metodo produce modelli murini riproducibili di contusione per lesioni del midollo spinale e riduce i fattori di manipolazione umana attraverso comode procedure di manipolazione. Il modello animale sviluppato è affidabile per lo studio dei meccanismi di lesione del midollo spinale e degli approcci terapeutici associati.
Introduzione
La lesione del midollo spinale di solito provoca una disfunzione permanente del midollo spinale al di sotto del segmento lesionato. È principalmente causato da oggetti che colpiscono la colonna vertebrale e dall'iperestensione della colonna vertebrale, come incidenti stradali e cadute1. A causa della limitata disponibilità di opzioni terapeutiche efficaci per le lesioni del midollo spinale, la delucidazione della patogenesi delle lesioni del midollo spinale utilizzando modelli animali sarà informativa per lo sviluppo di approcci terapeutici appropriati. Il modello di contusione della lesione del midollo spinale causata dall'impatto sul midollo ....
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Protocollo
Gli studi sugli animali sono stati esaminati e approvati dal Comitato Etico dell'Università di Jinan.
1. Anestetizzazione degli animali e laminectomia spinale T10
- Per questo studio, utilizzare topi C57/6J giovani adulti femmine di 8 settimane. Anestetizzare i topi mediante iniezione intraperitoneale di ketamina (100 mg/kg) e diazepam (5 mg/kg). Verificare che l'anestesia sia riuscita indicata dalla perdita del riflesso del dolore. Applicare un unguento veterinario sugli occhi per prevenire la secchezza sotto anestesia.
- Radere i peli sul dorso dei topi usando un rasoio per rivelare la pelle. Disinfettare ....
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Risultati
La laminectomia è stata eseguita su 24 topi femmina (8 settimane di età) come descritto sopra. I topi del gruppo sham (n = 6) non sono stati sottoposti a lesioni del midollo spinale, mentre il resto dei topi, compreso il gruppo da 0,5 mm (n = 6), il gruppo da 0,8 mm (n = 6) e il gruppo da 1,1 mm (n = 6) sono stati sottoposti a diverse profondità di conflitto del midollo spinale. I punteggi BMS sono stati regolarmente registrati fino a 1 mese dopo l'intervento (Figura 4). Ci sono state differ.......
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Discussione
La lesione del midollo spinale può portare a deficit sensoriali e motori, che possono provocare gravi menomazioni fisiche e mentali. In Cina, l'incidenza di lesioni del midollo spinale nelle diverse province varia da 14,6 a 60,6 per milione18. L'aumento della prevalenza della lesione midollare eserciterà una maggiore pressione sul sistema sanitario. Attualmente, le opzioni terapeutiche efficaci per le lesioni del midollo spinale e le lesioni sono limitate, perché i suoi meccanismi patologici e i p.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari in competizione.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto dalla National Natural Science Foundation of China, n. 82102314 (a ZSJ) e 32170977 (a HSL) e dalla Natural Science Foundation della provincia del Guangdong, n. 2022A1515010438 (a ZSJ) e 2022A1515012306 (a HSL). Questo studio è stato supportato dal Clinical Frontier Technology Program del First Affiliated Hospital dell'Università di Jinan, Cina, n. JNU1AF- CFTP- 2022- a01206 (a HSL). Questo studio è stato supportato dal Guangzhou Science and Technology Plan Project, Nos. 202201020018 (to HSL), 2023A04J1284 (to ZSJ) e 2023A03J1024 (to HSL).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| 0,01 M PBS (polvere, pH7,2-7,4) | Solarbio Life Sciences | P1010 | |
| 2,2,2-Tribromoetanolo | Macklin | 75-80-9 | |
| 4% paraformaldeide fissativo tissutale | Biosharp life science | BL539A | |
| Biomicroscopio | Leica | LCC50 HD | |
| CatWalk | Noldus Information Technology | CatWalk XT 9.1 | |
| Vetro di copertura | CITOTEST Scientific | 10212432C | |
| Macchina per l'inclusione | Changzhou Zhongwei Strumento elettronico | BMJ-A | |
| Etanolo assoluto | DAMAO | 64-17-5 | |
| FootFaultScan | Clever Sys Inc. | - | |
| Vetrino | CITOTEST Scientific | 80302-2104 | |
| Kit di colorazione ematossilina ed eosina | Beyotime Biotechnology | C0105S | |
| trapano per micromolazione | FEIYUBIO | 19-7010 | |
| Fissatore spinale di topo | RWD Life Science | 68094 | |
| Microtomo di paraffina | Thermo | shandon finesse 325 | |
| RotaRod per topi | Ugo Basile | 47600 | |
| Stereomicroscopio | KUY NICE | SZM-7045 | |
| Alcool terz-amilico | Macklin | 75-85-4 | |
| Xilene | Cina Nazionale Farmaceutica | #10023418 |
Riferimenti
- Venkatesh, K., Ghosh, S. K., Mullick, M., Manivasagam, G., Sen, D. Spinal cord injury: pathophysiology, treatment strategies, associated challenges, and future implications. Cell and Tissue Research. 377 (2), 125-151 (2019).
- Chiu, C. W., Cheng, H., Hsieh, S. L.
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Ristampe e permessi
