تحديد وتشخيص وتصنيف أورام غمد الأعصاب المحيطية الخبيثة في نماذج الفئران المعدلة وراثيا
Summary
لقد طورنا منهجية لتقييم ما إذا كانت أورام الجهاز العصبي في الفئران المعدلة وراثيا تلخص بدقة أمراض نظرائهم من البشر. هنا ، نطبق هذه التقنيات النسيجية ، والمعايير المرضية المحددة ، ومنهجيات الثقافة على الأورام الليفية العصبية وأورام غمد الأعصاب المحيطية الخبيثة الناشئة في نموذج الماوس P 0-GGFβ3.
Abstract
عادة ما يصاب المرضى الذين يعانون من متلازمة حساسية الورم الوراثي السائد من النوع 1 (NF1) بأورام ليفية عصبية ضفيرية الشكل (PNs) تتحول لاحقا إلى أورام غمد الأعصاب المحيطية الخبيثة شديدة العدوانية (MPNSTs). سيتم تسهيل فهم العملية التي يتحول بها PN إلى MPNST من خلال توفر نماذج الفئران المعدلة وراثيا (GEM) التي تكرر بدقة تقدم PN-MPNST الذي شوهد في البشر مع NF1. لسوء الحظ ، فإن نماذج GEM مع الاجتثاث Nf1 لا تلخص هذه العملية بالكامل. قادنا هذا إلى تطوير فئران P 0-GGFβ3 ، وهو نموذج GEM يؤدي فيه الإفراط في التعبير عن ميتوجين خلية شوان neuregulin-1 (NRG1) في خلايا Schwann إلى تطوير PNs التي تتطور لتصبح MPNSTs ذات تردد عال. ومع ذلك ، لتحديد ما إذا كان تكوين الورم وتطور الأورام في الفئران P 0-GGFβ3 نمذجة بدقة العمليات التي شوهدت في مرضى NF1 ، كان علينا أولا إثبات أن أمراض أورام غمد الأعصاب المحيطية P0-GGFβ3 تلخص أمراض نظرائهم من البشر.
هنا ، نصف المنهجيات المتخصصة المستخدمة لتشخيص أورام الجهاز العصبي المحيطي وتصنيفها بدقة في نماذج GEM ، باستخدام P 0-GGFβ3 و P0-GGFβ3 ؛ Trp53 +/- الفئران كمثال. نصف الطرق النسيجية والكيميائية المناعية والكيميائية النسيجية المستخدمة لتشخيص PNs و MPNSTs ، وكيفية التمييز بين هذه الأورام وأنواع الأورام الأخرى التي تحاكي أمراضها ، وكيفية تصنيف هذه الأورام. نناقش إنشاء ثقافات المرور المبكر من GEM MPNSTs ، وكيفية توصيف هذه الثقافات باستخدام الكيمياء الخلوية المناعية ، وكيفية التحقق من ورمها من خلال إنشاء الطعم الخيفي. بشكل جماعي ، تميز هذه التقنيات أمراض PNs و MPNSTs التي تنشأ في نماذج GEM وتقارن بشكل نقدي أمراض أورام الفئران هذه بنظيراتها البشرية.
Introduction
على مدى العقود الثلاثة الماضية ، حاولت العديد من المختبرات إنشاء نماذج فئران للسرطانات البشرية عن طريق إدخال طفرات مرتبطة بالسرطان البشري في جينوم الفئران أو عن طريق الإفراط في التعبير عن منتج جيني يتم التعبير عنه بشكل مفرط في السرطانات البشرية. يمكن استخدام نماذج الفئران المعدلة وراثيا (GEM) الناتجة لمجموعة متنوعة من الأغراض مثل إثبات أن التعديل الجينومي الذي تم إدخاله حديثا يبدأ تكوين الورم ، وتحديد التغيرات الجينية أو اللاجينية الأخرى التي تحدث لاحقا والتي تساهم في تطور الورم ، وتحديد مسارات الإشارات الرئيسية التي تدفع بدء الورم وتطوره. على عكس نماذج xenograft التقويمية ، التي تعتمد على استخدام الفئران التي تعاني من نقص المناعة ، فإن نماذج السرطان GEM لديها نظام مناعي يعمل بكامل طاقته وبالتالي أكثر دقة نموذج الاستجابات للعوامل العلاجية المرشحة. ومع ذلك ، عند استخدام نماذج السرطان GEM لأغراض مثل هذه ، من الضروري أن يؤكد الباحثون أن الملاحظات التي تم إجراؤها باستخدام أورام GEM ذات صلة بنظرائهم من البشر. يجب أن يتضمن هذا التحقق تقييما شاملا لأمراض أورام GEM وتحديد ما إذا كانت السمات المرضية لأورام GEM تلخص علم الأمراض لنوع الورم البشري المقابل.
متلازمة حساسية الورم الورم العصبي الليفي من النوع 1 (NF1) هو المرض الوراثي الأكثر شيوعا الذي يؤثر على الجهاز العصبي البشري ، ويحدث في حوالي 1 من كل 3000-3500 ولادة حية1،2،3. يصاب الأفراد المصابون ب NF1 بأورام غمد عصبية محيطية حميدة متعددة تعرف باسم الأورام الليفية العصبية في جلدهم (الأورام الليفية العصبية الجلدية) وفي الأعصاب الكبيرة والضفائر العصبية (الأورام الليفية العصبية الضفيرية). في حين أن كل من الأورام الليفية العصبية الجلدية والضفيرية الشكل تزيد من سوء نوعية حياة المريض من خلال إنتاج ضعف جسدي وسلوكي و / أو اجتماعي ، فإن الأورام الليفية العصبية الضفيرية (PNs) خطيرة بشكل خاص 4,5. وذلك لأن PNs تتحول في كثير من الأحيان إلى أورام غمد الأعصاب المحيطية الخبيثة (MPNSTs) ، وهي أورام خلايا المغزل العدوانية مع معدل بقاء منخفض بشكل استثنائي 1,2. ويرجع هذا المعدل المنخفض للبقاء على قيد الحياة إلى حد كبير إلى أن أنظمة العلاج الإشعاعي والعلاج الكيميائي المستخدمة حاليا لعلاج MPNSTs غير فعالة. ومع ذلك ، فإن تطوير علاجات جديدة أكثر فعالية كان يمثل تحديا. هذا لأنه ، على الرغم من مدى شيوع حدوث MPNSTs في مرضى NF1 ، إلا أنها لا تزال أوراما نادرة. نتيجة لذلك ، من الصعب جدا الحصول على أعداد كبيرة من الأورام البشرية للدراسة. من الصعب أيضا تجنيد عدد كاف من المرضى الذين يعانون من MPNSTs للتجارب السريرية. للتغلب على هذه القيود ، تم إنشاء العديد من نماذج GEM بهدف اكتساب مزيد من الأفكار حول التشوهات التي تؤدي إلى التسبب في الورم العصبي الليفي وتطور PN-MPNST وتسهيل التجارب قبل السريرية مع العوامل العلاجية المرشحة.
مرضى NF1 لديهم طفرات معطلة في نسخة واحدة من جين NF1. يحدث التسبب في الورم العصبي الليفي عندما تحدث طفرة معطلة في جين NF1 الوظيفي المتبقي في خلية في سلالة خلية شوان. ومع ذلك ، من المثير للدهشة أنه عندما تم إنشاء الفئران مع طفرات Nf1 المعطلة للخط الجرثومي ، فإنها لم تصاب بأورام ليفية عصبية 6,7. العرض اللاحق أن الفئران التي تحتوي على خلايا Nf1-null Schwann و Nf1 haploinsufficiency في جميع أنواع الخلايا الأخرى (Krox20-Cre;Nf1flox / – الفئران) وضعت الأورام الليفية العصبية الضفيرية الشكل اقترح أن انخفاض جرعة الجين Nf1 في أنواع الخلايا الإضافية كان مطلوبا لتسبب الورم العصبيالليفي 8. حتى ذلك الحين ، الأورام الليفية العصبية الضفيرية في Krox20-Cre ؛ لم تتقدم الفئران Nf1flox / – لتصبح MPNSTs وبالتالي قلدت جزئيا فقط بيولوجيا نظيراتها البشرية. حدث التسبب في MPNST عندما تم مشاركة طفرات Nf1 مع طفرات في جينات مثبطة للورم إضافية مثل Trp539 أو Cdkn2a10 ، ولكن MPNSTs في نماذج GEM هذه طورت من جديد أو من الأورام الليفية العصبية غير النمطية ذات الإمكانات البيولوجية غير المؤكدة (ANNUBPs) 11،12 ، بدلا من الأورام الليفية العصبية الضفيرية الحميدة الموجودة مسبقا (انظر13،14 للحصول على مراجعات ممتازة لهذه النماذج بالإضافة إلى نماذج أخرى تقدم طفرات إضافية مرتبطة بفقدان الوظيفة MPNST في الجينات مثل Suz12 و Pten15).
كانت نماذج الفئران هذه لا تقدر بثمن لتأسيس الدور الذي تلعبه الجينات مثل NF1 و TP53 و CDKN2A في التسبب في أورام الجهاز العصبي المحيطي المرتبطة ب NF1 وللتجارب قبل السريرية التي تختبر العوامل العلاجية المرشحة. ومع ذلك ، لا يزال لدينا فهم غير مكتمل للعملية التي تتطور بها الأورام الليفية العصبية الضفيرية لتصبح أوراما ليفية عصبية غير نمطية ذات إمكانات بيولوجية غير مؤكدة (ANNUBPs16) ثم MPNSTs. تم إحراز بعض التقدم مؤخرا في فهم هذه العملية مع التقرير الأخير الذي يفيد بأن الفئران التي تم حذفها في Nf1 و Arf تطور ANNUBPs التي تتقدم لتصبح MPNSTs11. ومع ذلك ، فإن نماذج الفئران القائمة على طفرة Nf1 التي تلخص تماما عملية تطور الورم العصبي الليفي الضفيري-MPNST الذي شوهد في البشر غير موجودة بعد. بالإضافة إلى ذلك ، ليس من الواضح ما إذا كانت هناك مسارات متميزة متعددة تؤدي إلى تطوير MPNSTs. بالنظر إلى ذلك ، من الممكن أن تكون GEMs الموصوفة أعلاه نموذجا فقط لمجموعة فرعية من عدة مسارات مختلفة تؤدي إلى تطور الورم العصبي الليفي-MPNST والتسبب في MPNST. يتم التأكيد على هذه النقطة من خلال حقيقة أن MPNSTs تحدث أيضا بشكل متقطع وأن بعض MPNSTs المتفرقة على ما يبدو لا تحتوي على طفرات NF1 17,18.
على الرغم من أن هذه النقطة الأخيرة قد تم تحديها من خلال اقتراح Magollon-Lorenz et al. الأخير بأن بعض MPNSTs المتفرقة التي تفتقر إلى طفرات NF1 على الأقل هي أورام ميلانينية أو نوع مختلف من الساركوما19 ، فقد أبلغنا مؤخرا عن MPNST متقطع وخط خلية مشتق من هذا الورم (خلايا 2XSB) التي كانت NF1 من النوعالبري 20. أثناء توصيف الورم الأم وخط الخلايا 2XSB ، استبعدنا بشكل منهجي إمكانيات التشخيص البديلة ، بما في ذلك سرطان الجلد وأنواع الساركوما المتعددة الأخرى التي يتم أخذها في الاعتبار بشكل روتيني في التشخيص التفريقي لورم غمد العصب المحيطي الخبيثالمتقطع 20. بالإضافة إلى ذلك ، نلاحظ أن Magollon-Lorenz et al. أقروا بأن النتائج التي توصلوا إليها في خطوط خلايا MPNST الثلاثة المتفرقة التي درسوها لا يمكن تعميمها للإشارة إلى أن جميع الأورام التي تم تحديدها على أنها MPNSTs متفرقة ليست MPNSTs.
لبناء نموذج GEM الذي لم يكن فيه الورم العصبي الليفي والتسبب في MPNST يعتمدان بالضرورة على طفرات جينية معينة مثبطة للورم ، قمنا بتوليد فئران معدلة وراثيا كان فيها التعبير المفرط عن ميتوجين خلية شوان القوي neuregulin-1 (NRG1) مدفوعا بمحفز بروتين المايلين الخاص بخلية شوان صفر (P0) (الفئرانP 0-GGFβ3)21. لقد أظهرنا سابقا أن الأورام الليفية العصبية البشرية ، MPNSTs ، وخطوط خلايا MPNST تعبر عن العديد من الأشكال المتماثلة NRG1 جنبا إلى جنب مع كينازات التيروزين مستقبلات erbB (erbB2 و erbB3 و erbB4) التي تتوسط إشارات NRG1 وأن مستقبلات erbB هذه يتم تنشيطها بشكل أساسي22. لقد أثبتنا أيضا أن المثبطات الدوائية لكينازات erbB تمنع بقوة انتشار MPNST22 والبقاء على قيد الحياة23 والهجرة24. تمشيا مع ملاحظاتنا في البشر ، P 0-GGFβ3 الفئران تطوير الأورام الليفية العصبية الضفيرية25 التي تتقدم لتصبح MPNSTs في تردد عال 21,25. لقد أظهرنا أن P 0-GGFβ3 MPNSTs ، مثل نظرائهم من البشر ، يطورون عادة طفرات في Trp53 و Cdkn2a ، بالإضافة إلى العديد من التشوهات الجينومية الأخرى التي من المحتمل أن تساهم في تكوين الورم25. MPNSTs الناشئة في الفئران P 0-GGFβ3 ليس لديها طفرات Nf1 معطلة. ومع ذلك ، باستخدام المكمل الجيني ، أظهرنا أن NRG1 يعزز تكوين الورم في الفئران P 0-GGFβ3 في الغالب من خلال نفس شلالات الإشارات التي يتم تغييرها بواسطة فقدان Nf1 26 ؛ يستند هذا الاستنتاج إلى النتيجة التي توصلنا إليها بأن استبدال التعبير المفرط NRG1 بفقدان Nf1 في وجود عدم كفاية Trp53 (P 0-GGFβ3;Trp53+/- الفئران) تنتج التي تتطور فيها MPNSTs من جديد ، كما هو موضح في cis-Nf1 +/-؛ Trp53 +/- الفئران27.
للحصول على هذه المعلومات وغيرها من المعلومات التي تثبت أن الفئران P 0-GGFβ3 نمذجة دقيقة لعمليات التسبب في الورم العصبي الليفي وتطور الورم العصبي الليفي-MPNST الذي شوهد في البشر المصابين ب NF1 ، قمنا بتطوير منهجيات متخصصة لمعالجة الأنسجة من هذه ، وتشخيص أورامها بدقة ، وتصنيف MPNSTs الناشئة في هذه الفئران ، وإنشاء وتوصيف المرور المبكر P0-GGFβ3 و P0-GGFβ3 ؛ Trp53 +/- مزارع MPNST ومقارنة نقدية لأمراض P 0-GGFβ3 PNs و MPNSTs و P0-GGFβ3 ؛ Trp53 + / – MPNSTs إلى نظرائهم من البشر. العديد من هذه المنهجيات قابلة للتعميم على نماذج GEM الأخرى لأورام الجهاز العصبي. بالإضافة إلى ذلك ، فإن العديد من هذه المنهجيات قابلة للتطبيق على نطاق أوسع على نماذج GEM التي تنشأ فيها الأورام في مواقع الأعضاء الأخرى. وبالتالي ، نقدم هنا وصفا مفصلا لهذه المنهجيات.
Protocol
Representative Results
Discussion
توفر الطرق النسيجية والكيميائية الحيوية المعروضة هنا إطارا لتشخيص وتوصيف نماذج GEM للورم العصبي الليفي والتسبب في MPNST. على مر السنين ، وجدنا أن هذه المنهجيات مفيدة جدا لتقييم أمراض أورام غمد الأعصاب المحيطية الناشئة في نماذج GEM21،25،26. ومع ذ…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
تم دعم هذا العمل بمنح من المعهد الوطني للأمراض العصبية والسكتة الدماغية (R01 NS048353 و R01 NS109655 إلى S.L.C. ؛ R01 NS109655-03S1 إلى D.P.J.) ، والمعهد الوطني للسرطان (R01 CA122804 إلى S.L.C.) ووزارة الدفاع (X81XWH-09-1-0086 و W81XWH-12-1-0164 إلى S.L.C.).
Materials
| 100 mm Tissue Culture Plates | Corning Falcon | 353003 | |
| 3, 3'- Diaminobensidine (DAB) | Vector Laboratories | SK-400 | |
| 6- well plates | Corning Costar | 3516 | |
| Acetic Acid | Fisher Scientific | A38-212 | |
| Alexa Fluor 488 Secondary (Goat Anti-Mouse) | Invitrogen | A11029 | |
| Alexa Fluor 568 Secondary (Goat Anti-Mouse) | Invitrogen | A21043 or A11004 | |
| Alexa Fluor 568 Secondary (Goat Anti-Rabbit) | Invitrogen | A11036 | |
| Ammonium Chloride (NH4Cl) | Fisher Scientific | A661-500 | |
| BCA Protein Assay Kit | Thermo Scientific | 23225 | |
| Bovine Serum Albumin | Fisher Scientific | BP1600-100 | |
| Caldesmon | ABCAM | E89, ab32330 | |
| CD117 | Cell Marque | 117R-18-ASR | |
| CD163 | Leica | NCL-L-CD163 | |
| CD31 | ABCAM | ab29364 | |
| CD34 | ABCAM | ab81289 | |
| CD86 | ABCAM | ab53004 | |
| Cell Scraper | Sarstedt | 83.183 | |
| Cell Stripper | Corning | 25-056-CI | |
| Circle Coverslip | Fisher Scientific | 12-545-100 | |
| Citrisolve Hybrid (d-limonene-based solvent) | Decon Laboratories | 5989-27-5 | |
| Critic Acid | Fisher Scientific | A104-500 | |
| Cytokeratin | ABCAM | C-11, ab7753 | |
| Desmin | Agilent Dako | clone D33 (M0760) | |
| Diaminobensizdine (DAB) Solution | Vector Laboratories | SK-4100 | |
| DMEM | Corning | 15-013-CV | |
| Eosin Y | Thermo Scientific | 7111 | |
| Ethanol (200 Proof) | Decon Laboratories | 2716 | |
| Fetal Calf Serum | Omega Scientific | FB-01 | |
| Forksolin | Sigma-Aldrich | F6886 | |
| Glycerol | Sigma-Aldrich | G6279 | |
| Hank's Balanced Salt Solution (HBSS) | Corning | 21-022-CV | |
| Harris Hematoxylin | Fisherbrand | 245-677 | |
| Hemacytometer | Brightline-Hauser Scientific | 1490 | |
| Hydrochloric Acid | Fisher Scientific | A144-212 | |
| Hydrogen Peroxide | Fisher Scientific | 327-500 | |
| Iba1 | Wako Chemicals | 019-19741 | |
| ImmPRESS HRP (Peroxidase) Polymer Kit ,Mouse on Mouse | Vector Laboratories | MP-2400 | |
| ImmPRESS HRP (Peroxidase) Polymer Kit, Horse Anti-Rabbit | Vector Laboratories | MP-7401 | |
| Incubator | Thermo Scientific | Heracell 240i CO2 incubator | |
| Isoflurane | Piramal | NDC 66794-017-25 | |
| Isopropanol | Fisher Scientific | A415 | |
| Ki-67 | Cell Signaling | 12202 | |
| Laminin | Thermo Fisher Scientific | 23017015 | |
| Liquid Nitrogen | |||
| MART1 | ABCAM | M2-9E3, ab187369 | |
| Microtome | |||
| Nestin | Millipore | Human: MAD5236 (10C2), Human:MAB353 (Rat-401) | |
| Neuregulin 1 beta | In house | Made by S.L.C. (also available as 396-HB-050/CF from R&D Systems) | |
| Neurofibromin | Santa Cruz Biotechnology | sc-67 | |
| NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ mice | Jackson Laboratory | 5557 | |
| Nonfat Dry Milk | Walmart | Great Value Brand | |
| P0-GGFβ3 mice | In house | ||
| Paraffin Wax | Leica | Paraplast 39601006 | |
| Parafilm M | Sigma-Aldrich | PM-999 | |
| Paraformaldehyde (4%) | Thermo Scientific | J19943-K2 | |
| Permount (Xylene Mounting Medium) | Fisher Scientific | SP15-100 | |
| pH Meter | Mettler Toldedo | Seven Excellence, 8603 | |
| Phosphate Buffered Saline (Dulbecco's) | Corning | 20-031-CV | |
| PMEL | ABCAM | EP4863(2), ab137078 | |
| Poly-L-Lysine Hydrobromide | Sigma-Aldrich | P5899-5MG | |
| Portable Isoflurance Machine | VetEquip Inhalation Anesthesia Systems | ||
| PVA-DABCO (Aqueous Mounting Medium) | Millipore Sigma | 10981100ML | |
| Rice Cooker | Beech Hamilton | ||
| S100B | Agilent Dako | Z0311 (now GA504) | |
| SMA | Ventana Medical Systems | clone 1A4 | |
| Sodium Chloride | Fisher Scientific | S640 | |
| Sodium Citrate (Dihydrate) | Fisher Scientific | BP327-1 | |
| Sox10 | ABCAM | ab212843 | |
| Steel histology mold | |||
| Superfrost Plus Microscope Slides | Fisher Scientific | 12-550-15 | |
| TCF4/TCFL2 | Cell Signaling | (CH48H11) #2569 | |
| Tissue Cassette | |||
| Toluidine Blue | ACROS Organics | 348600050 | |
| Triton X-100 | Fisher Scientific | BP151-500 | |
| TRIzol | Invitrogen | 15596026 | |
| Trypsin | Corning | 25-051-31 |
Riferimenti
- Carroll, S. L. Molecular mechanisms promoting the pathogenesis of Schwann cell neoplasms. Acta Neuropathologica. 123 (3), 321-348 (2012).
- Longo, J. F., Weber, S. M., Turner-Ivey, B. P., Carroll, S. L. Recent advances in the diagnosis and pathogenesis of neurofibromatosis type 1 (NF1)-associated peripheral nervous system neoplasms. Advances in Anatomic Pathology. 25 (5), 353-368 (2018).
- Longo, J. F., Carroll, S. L. The RASopathies: Biology, genetics and therapeutic options. Advances in Cancer Research. 153, 305-341 (2022).
- Boyd, K. P., Korf, B. R., Theos, A. Neurofibromatosis type 1. Journal of the American Academy of Dermatology. 61 (1), 1-16 (2009).
- Rad, E., Tee, A. R. Neurofibromatosis type 1: Fundamental insights into cell signalling and cancer. Seminars in Cell and Developmental Biology. 52, 39-46 (2016).
- Brannan, C. I., et al. Targeted disruption of the neurofibromatosis type-1 gene leads to developmental abnormalities in heart and various neural crest-derived tissues. Genes and Development. 8 (9), 1019-1029 (1994).
- Jacks, T., et al. Tumour predisposition in mice heterozygous for a targeted mutation in Nf1. Nature Genetics. 7 (3), 353-361 (1994).
- Zhu, Y., Ghosh, P., Charnay, P., Burns, D. K., Parada, L. F. Neurofibromas in NF1: Schwann cell origin and role of tumor environment. Science. 296 (5569), 920-922 (2002).
- Cichowski, K., et al. Mouse models of tumor development in neurofibromatosis type 1. Science. 286 (5447), 2172-2176 (1999).
- Joseph, N. M., et al. The loss of Nf1 transiently promotes self-renewal but not tumorigenesis by neural crest stem cells. Cancer Cell. 13 (2), 129-140 (2008).
- Rhodes, S. D., et al. Cdkn2a (Arf) loss drives NF1-associated atypical neurofibroma and malignant transformation. Human Molecular Genetics. 28 (16), 2752-2762 (2019).
- Chaney, K. E., et al. Cdkn2a loss in a model of neurofibroma demonstrates stepwise tumor progression to atypical neurofibroma and MPNST. Ricerca sul cancro. 80 (21), 4720-4730 (2020).
- Mohamad, T., Plante, C., Brosseau, J. P. Toward understanding the mechanisms of malignant peripheral nerve sheath tumor development. International Journal of Molecular Science. 22 (16), 8620 (2021).
- Somatilaka, B. N., Sadek, A., McKay, R. M., Le, L. Q. Malignant peripheral nerve sheath tumor: models, biology, and translation. Oncogene. 41 (17), 2405-2421 (2022).
- Keng, V. W., et al. Conditional inactivation of Pten with EGFR overexpression in Schwann cells models sporadic MPNST. Sarcoma. 2012, 620834 (2012).
- Miettinen, M. M., et al. Histopathologic evaluation of atypical neurofibromatous tumors and their transformation into malignant peripheral nerve sheath tumor in patients with neurofibromatosis 1-a consensus overview. Human Pathology. 67, 1-10 (2017).
- Lee, W., et al. PRC2 is recurrently inactivated through EED or SUZ12 loss in malignant peripheral nerve sheath tumors. Nature Genetics. 46 (11), 1227-1232 (2014).
- Zhang, M., et al. Somatic mutations of SUZ12 in malignant peripheral nerve sheath tumors. Nature Genetics. 46 (11), 1170-1172 (2014).
- Magallon-Lorenz, M., et al. Deep genomic analysis of malignant peripheral nerve sheath tumor cell lines challenges current malignant peripheral nerve sheath tumor diagnosis. iScience. 26 (2), 106096 (2023).
- Longo, J. F., et al. Establishment and genomic characterization of a sporadic malignant peripheral nerve sheath tumor cell line. Scientific Reports. 11 (1), 5690 (2021).
- Huijbregts, R. P., Roth, K. A., Schmidt, R. E., Carroll, S. L. Hypertrophic neuropathies and malignant peripheral nerve sheath tumors in transgenic mice overexpressing glial growth factor beta3 in myelinating Schwann cells. Journal of Neuroscience. 23 (19), 7269-7280 (2003).
- Stonecypher, M. S., Byer, S. J., Grizzle, W. E., Carroll, S. L. Activation of the neuregulin-1/ErbB signaling pathway promotes the proliferation of neoplastic Schwann cells in human malignant peripheral nerve sheath tumors. Oncogene. 24 (36), 5589-5605 (2005).
- Kohli, L., et al. The pan erbB inhibitor PD168393 enhances lysosomal dysfunction-induced apoptotic death in malignant peripheral nerve sheath tumor cells. Neuro-Oncology. 14 (3), 266-277 (2012).
- Eckert, J. M., Byer, S. J., Clodfelder-Miller, B. J., Carroll, S. L. Neuregulin-1 beta and neuregulin-1 alpha differentially affect the migration and invasion of malignant peripheral nerve sheath tumor cells. Glia. 57 (14), 1501-1520 (2009).
- Kazmi, S. J., et al. Transgenic mice overexpressing neuregulin-1 model neurofibroma-malignant peripheral nerve sheath tumor progression and implicate specific chromosomal copy number variations in tumorigenesis. American Journal of Pathology. 182 (3), 646-667 (2013).
- Brosius, S. N., et al. Neuregulin-1 overexpression and Trp53 haploinsufficiency cooperatively promote de novo malignant peripheral nerve sheath tumor pathogenesis. Acta Neuropathologica. 127 (4), 573-591 (2014).
- Vogel, K. S., et al. Mouse tumor model for neurofibromatosis type 1. Science. 286 (5447), 2176-2179 (1999).
- Reuss, D. E., et al., Louis, D. N., et al. Malignant peripheral nerve sheath tumour (MPNST). WHO Classification of Tumours of the Central Nervous System, Revised 4th Edition. , 226-229 (2016).
- Landuzzi, L., Ruzzi, F., Lollini, P. L., Scotlandi, K. Synovial sarcoma preclinical modeling: integrating transgenic mouse models and patient-derived models for translational research. Cancers. 15 (3), 588 (2023).
- Cohen, P. R., Rapini, R. P., Farhood, A. I. Expression of the human hematopoietic progenitor cell antigen CD34 in vascular and spindle cell tumors. Journal of Cutaneous Pathology. 20 (1), 15-20 (1993).
- Weiss, S. W., Nickoloff, B. J. CD-34 is expressed by a distinctive cell population in peripheral nerve, nerve sheath tumors, and related lesions. American Journal of Surgical Pathology. 17 (10), 1039-1045 (1993).
- Longo, J. F., Brosius, S. N., Carroll, S. L. Defining gene functions in tumorigenesis by ex vivo ablation of floxed alleles in malignant peripheral nerve sheath tumor cells. Journal of Visualized Experiments. (174), (2021).
- Hoffman, G. E., Murphy, K. J., Sita, L. V. The importance of titrating antibodies for immunocytochemical methods. Current Protocols in Neuroscience. 76, 2.12.1-2.12.37 (2016).
- Brossier, N. M., Carroll, S. L. Genetically engineered mouse models shed new light on the pathogenesis of neurofibromatosis type I-related neoplasms of the peripheral nervous system. Brain Research Bulletin. 88 (1), 58-71 (2012).
